LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA CLÍNICA - QUANTIFICAÇÃO BACTERIANA - PRE E POS TESTE

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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA CLÍNICA - 
QUANTIFICAÇÃO BACTERIANA 
Pré Teste 
 
1) A microbiologia de alimentos é o estudo dos microrganismos que habitam, crescem e contaminam os alimentos, 
sendo os de maior importância aqueles que causam a deterioração dos alimentos. Contudo, microrganismos 
benéficos, tais como os probióticos, estão se tornando importantes na ciência dos alimentos. 
A quantificação bacteriana é importante na microbiologia de alimentos para detectar possíveis contaminações com:: 
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 A. coliformes fecais, coliformes totais; 
Os coliformes fecais e totais são bactérias patogênicas que infectam os alimentos e causam doenças se esses 
alimentos forem ingeridos. 
 
2) Na natureza, os microrganismos encontram-se formando populações mistas (vários tipos de microrganismos que 
pertencem a um mesmo habitat). Por sua vez, o desenvolvimento da microbiologia, assim como todos os 
procedimentos laboratoriais para o diagnóstico, depende da obtenção de biomassa microbiana na forma de 
populações puras, que, quando desenvolvidas/crescidas em meios de cultura, são denominadas culturas 
puras ou axênicas (populações homogêneas quanto ao tipo de microrganismo, cultivadas em meios de cultura sem 
a presença de outras formas de vida contaminantes). A obtenção de uma cultura pura a partir de uma cultura mista 
denomina-se isolamento, que é conseguido por meio da semeadura dos microrganismos na superfície de meios de 
cultura sólidos em placas de Petri, o que permitirá a formação de colônias (que são populações isoladas que 
crescem na superfície desses meios).São exemplos de semeaduras para quantificação de bactérias em meios 
sólidos: 
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A. sementeira por espalhamento (spread plate), sementeira por incorporação (pour plate); 
Estas são as duas técnicas de semeadura mais relevantes para a quantificação de bactérias. 
 
3) Como todos os seres vivos, os microrganismos necessitam de nutrientes apropriados ao seu desenvolvimento, 
assim como de condições físicas ou ambientais favoráveis. Quando eles são cultivados em laboratório, essas 
necessidades devem ser respeitadas. 
Indique a alternativa que aponta para semeadura por incorporação: 
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 B. É a mistura de 1mL ou 0,1mL da amostra analisada com o meio de cultura em estado líquido. A amostra é 
diluída antes de ser semeada, para obter placas com número de colônias não superior a 300. Após o período de 
incubação, as placas devem apresentar de 25 a 250-300 colônias, de modo que possam ser contadas; 
Esta é a semeadura por incorporação. 
 
4) A obtenção de uma cultura pura a partir de uma cultura mista denomina-se isolamento, conseguido por meio da 
semeadura dos microrganismos na superfície de meios de cultura sólidos em placas de Petri, o que permitirá a 
formação de colônias (populações isoladas que crescem na superfície desses meios). 
Indique a alternativa que aponta para semeadura por espalhamento: 
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A. O volume de 1mL ou 0,1mL da amostra analisada é pipetado em cima de meio de cultura e, após, espalhado 
com uma vareta de vidro por toda a superfície do ágar; 
Esta é a semeadura por espalhamento 
 
5) No momento do experimento, inicialmente acenda a chama do bico de Bunsen para criar a zona de segurança para 
poder trabalhar na sua experiência. Essa zona de segurança que é feita quando se acende a chama do bico de 
Bunsen é necessária para: 
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A. esterilizar a área de outros microrganismos que possam existir ao redor e não prejudicar o experimento; 
Em um laboratório em que vários outros experimentos podem ocorrer, é necessário nos preocuparmos com a 
esterilização. 
 
 
 
 
 
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QUANTIFICAÇÃO BACTERIANA 
Pós Teste 
1) As soluções formadas por líquidos com sólidos dissolvidos são as mais comuns no cotidiano das pessoas. 
Água com sal ou água com açúcar são exemplos clássicos desse tipo de solução. Mas existem soluções, 
como os sucos concentrados adquiridos em supermercados, que necessitam receber certa quantidade de 
solvente no seu preparo. Trata-se das chamadas soluções concentradas. Elas apresentam grande 
quantidade de soluto em pouco solvente e, ao receberem quantidade extra de água (solventes), têm seu 
volume final aumentado. 
Ao adicionarmos solvente a determinada solução, estamos realizando uma diluição. Nesse procedimento, a 
quantidade de solvente é aumentada, e a quantidade de soluto permanece a mesma, o que leva a diminuição 
da concentração da solução. 
Tendo em vista o conceito de diluição, qual o objetivo da técnica de diluição para o diagnóstico laboratorial? 
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A. A maioria dos laboratórios tem as soluções armazenadas em concentração mais alta, seja por conveniência, 
seja para evitar a contaminação. Por isso, faz as diluições de acordo com a demanda e a necessidade para 
determinado exame; 
Os laboratórios realizam a diluição para diagnóstico, tendo em vista que suas concentrações são altas para 
armazenamento. 
 
2) Os meios de cultura são insumos preparados em laboratório que fornecem os nutrientes para o crescimento 
e o desenvolvimento de microrganismos (como bactérias e fungos) fora do seu habitat. Existe uma 
variedade enorme desses meios, os quais são utilizados para análises laboratoriais e estudos científicos em 
diversas áreas, principalmente em alimentos, água, cosméticos e microbiologia clínica. 
Qual das alternativas apresenta a característica de um meio de cultura sólido? 
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A. A presença do ágar bacteriológico, utilizado como agente gelificante em meio de cultura ou para determinar 
motilidade e crescimento de anaeróbios e microaerófilos; 
O ágar é um componente característico do meio de cultura sólido. 
 
3) Os meios de cultura em microbiologia para o cultivo de bactérias são conhecidos como meios artificiais ou 
meios sintéticos, pois não ocorrem naturalmente, ou seja, eles são preparados no laboratório. Existem 
várias maneiras de se classificar os meios de cultura. 
Qual das alternativas apresenta um meio de cultura líquido e o seu respectivo objetivo? 
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B. São também conhecidos como caldos, e seu acondicionamento é feito em tubos de ensaio. São utilizados para 
ativação das culturas, repiques de microrganismos, provas bioquímicas etc.; 
Caldos são um meio de cultura líquido. 
 
4) Além dos nutrientes e condições ambientais favoráveis para o cultivo de microrganismos, muitos critérios 
devem ser considerados. Diferentes microrganismos apresentam diferentes necessidades, e, por isso, o 
meio de cultura é adaptado para satisfazer essas necessidades, utilizando nutrientes específicos 
dependendo do microrganismo de interesse. 
Quando o meio de cultura é adequado e a bactéria cresce, realizamos uma leitura de placas. A unidade de 
medida é o UFC, que significa: 
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A. unidade formadora de colônias por mL; 
Esta é a medida para a quantificação de bactérias. 
 
5) Segundo a Anvisa, para secreção vaginal, endocervical, uretral e na urina, na cultura para Neisseria 
gonorrhoeae, é suficiente ágar-chocolate; para melhorar o isolamento, semear material endocervical e 
uretral, utilizando o meio seletivo de Thayer Martin. 
Qual a importância de utilizar o meio seletivo correto dependendo da amostra biológica utilizada? 
Você acertou! 
A. Cada meio seletivo é apropriado para um tipo de microrganismo; assim, é necessário que, dependendo da 
amostra biológica, o meio seletivo seja adequado para crescimento do microrganismo de que se queira fazer o 
diagnóstico; 
Cada microrganismo crescerá em um meio seletivo diferente devido às diferentes necessidades nutricionais de cada 
tipo de microrganismo.