Isolamento e Identificação de Staphylococcus

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Danyela Trindade 
 
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Microbiologia 1-Epidemia 
ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE 
Staphylococcus spp. 
 
As bactérias 
são seres unicelulares e procariontes (cromossomo 
dessas células não é envolvido por uma membrana 
celular) 
formas mais comuns das bactérias: 
• cocos, que são as formas esféricas 
• bacilos ou bastonetes, que são as formas 
cilíndricas 
• espirilos ou helicoidais 
• vibrião 
• espiroquetas 
GÊNERO STAPHYLOCOCCUS 
Cocos gram positivos 
Formam arranjos em “cachos de uva” 
imóveis 
Anaeróbios facultativos 
Não apresentam cápsula, com exceção da espécie S. 
(Staphylococcus) aureus 
Não formam endósporos 
Produzem enzima catalase 
s. aureus possui a enzima coagulase na parede celular 
fazem parte da microbiota normal da pele e mucosas 
dos seres humanos 
17 dessas espécies podem ser isoladas de amostras 
biológicas humanas 
Podem causar infecções cutâneas, toxinfecções 
alimentares, infecções nas vias urinárias de mulheres 
jovens e infecções oportunistas nos muito jovens, 
idosos ou imunocomprometidos devido a formação de 
biofilmes em dispositivos médicos (próteses e 
cateteres) 
As spp. (espécies) de importância clínica humana 
encontradas em maior frequência são S. aureus, S. 
saprophyticus e S. epidermidis 
STAPHYLOCOCCUS AUREUS 
É a espécie mais comumente associada à doença 
humana 
Envolvida na formação de abscessos, toxinfecções 
alimentares (enterotoxina estafilocócica) e a síndrome 
do choque tóxico 
Os estafilococos patogênicos são, em geral, hemolíticos 
e S. aureus coagula o plasma 
Cerca de 40 a 70% dos seres humanos saudáveis 
podem ser portadores de S. aureus na cavidade nasal 
Portador: indivíduo ou animal, que abriga um agente 
infeccioso específico de uma doença, sem apresentar 
sintomas ou sinais clínicos desta e constitui uma fonte 
potencial de transmissão para o ser humano 
ISOLAMENTO E CULTIVO DE MICROORGANISMOS 
O estudo de microrganismos é dependente de cultivar e 
mantê-los, viáveis no laboratório, sob a forma de 
culturas puras 
O que são células autotróficas? Células capazes de fixar 
o co2 para a produção de biomoléculas 
O que são células heterotróficas? São células que não 
conseguem fixar o co2 atmosférico, então necessitam 
de nutrientes para a realização de seu metabolismo e 
produção de biomoléculas 
Para obtenção de uma cultura pura de bactérias 
heterotróficas, que é o caso do Staphylococcus, 
utilizam-se meios de cultura 
 
Danyela Trindade 
 
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FATORES NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO 
BACTERIANO 
• Fatores químicos: fontes de carbono, nitrogênio, 
enxofre, fósforo, oligoelementos (ferro, cobre, 
zinco), oxigênio, fatores orgânicos de 
crescimento (vitaminas, aminoácidos, purinas, 
pirimidinas) 
• Fatores físicos: temperatura (-10 a 110 graus 
celsius), pH (6,8 a 7,5, ou ligeiramente alcalino) e 
pressão osmótica 
CLASSIFICAÇÃO DE ACORDO COM A TEMPERATURA DE 
CRESCIMENTO 
• Psicrófilos: crescem em baixas temperaturas 
(temperatura ótima de crescimento é 10 
graus). Dentro desse grupo existem os 
psicotrópicos, os quais tem sua temperatura 
ótima de crescimento em 20 graus. 
• Mesófilos: crescem em temperaturas 
moderadas; tem relação com patógenos que 
crescem no corpo humano. Sua temperatura 
ótima de crescimento é 37 graus. 
• Termófilos: crescem em altas temperaturas. 
Tem temperatura ótima em 62 graus. Dentro 
desse grupo existem os hipertermófilos, os 
quais tem temperatura ótima de crescimento 
90-95 graus. 
CLASSIFICAÇÃO DE ACORDO COM A NECESSIDADE DE 
OXIGÊNIO 
• Aeróbios estritos: necessitam de oxigênio para 
seu metabolismo, pois precisam fazer a 
oxidação de nutrientes (1) 
• Anaeróbios estritos: não crescem na presença 
de oxigênio, pois são anaeróbicos, então 
crescem em regiões onde não tem o2 (2) 
• Anaeróbios facultativos: multiplicam-se na 
presença ou ausência de oxigênio, ou seja, 
realizam respiração aeróbica e anaeróbica. 
Crescem melhor quando há o2 disponível. (3) 
• Microaerófilos: crescem em concentrações de 
o2 menores que a atmosférica, mas dependem 
do o2 (4) 
• Anaeróbios aerotolerantes: são anaeróbios que 
toleram a presença de o2. (5) 
 
MEIO DE CULTURA 
É um material nutriente utilizado em laboratórios para o 
cultivo de microrganismos. Essas preparações químicas 
possuem em sua formulação, nutrientes necessários 
para que os microrganismos possam se multiplicar 
permitindo seu estudo. 
É preparado e distribuído em tubos (meio líquido, que é 
chamado de caldo) ou placas de Petri (meio sólido, que é 
chamado de ágar) 
CRESCIMENTO DE BACTÉRIAS EM MEIO DE CULTURA 
 
ISOLAMENTO DE STAPHYLOCOCCUS DA CAVIDADE 
NASAL 
• Caldo tioglicolato de sódio: é um meio de cultura 
redutor. O tioglicolato de sódio (T+Na) combina-
se com o oxigênio molecular e o torna 
indisponível para a utilização pelo microrganismo 
que cresce nesse meio de cultura. Aí nós 
procuramos se esse microrganismo vai 
apresentar metabolismo anaeróbio ou aeróbio. 
Danyela Trindade 
 
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• Ágar manitol: é um meio de cultura seletivo 
(favorece o crescimento da espécie de 
interesse e inibe o crescimento de outras 
espécies), possui 7,5% de NaCl em sua 
composição, o que o torna seletivo para 
bactérias halófilas, como as do gênero 
Staphylococcus. 
PROCEDIMENTO 
1. Identificar o tubo com caldo tioglicolato de sódio 
e a placa de Petri contendo ágar manitol. 
2. Coletar o material da mucosa nasal circulando 
por 3 vezes a zaragatoa (swab) na pele de 
cada narina. 
3. Inocular o caldo tioglicolato de sódio com swab 
4. Em seguida, inocular o ágar hipertônico manitol 
pela técnica de esgotamento (por estrias, basta 
deslizar o swab fazendo zig-zag na superfície 
do meio de cultura) 
5. Incubar os meios de cultura a 37 graus 
(temperatura de crescimento dos 
microrganismos mesófilos) por 24h 
REFERÊNCIAS 
• Tortora microbiologia 
• Brooks microbiologia médica