Ciclo do sangue

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Ciclo do sangue
1. Coleta
- Pode ser realizada por:
· Coleta do sangue total
· Aférese
1.1 Coleta de sague total
- Condições:
· Assepsia do local, supervisionada por médico/ enfermeiro, através de única punção venosa (preferência pela veia cubital mediana), colocação em bolsas plásticas com sistema fechado e estéril
- Identificação:
· Identificação devidamente adequada da ficha do doador
· Identificação da bolsa de sangue e dos tubos-pilotos por meio de código de barras
- Quantidades adequadas em relação às bolsas de sangue:
· Anticoagulante: 60-65mL
· Volume de sangue: ~450mL (caso seja coletado um valor menor, este deverá estar escrito na bolsa – no caso de valores <300mL, as bolsas de sangue para fins transfusionais deverão ser específicas)
- Segurança do processo:
· Profissionais da saúde capacitados acompanhados de enfermeiro ou médico
· Todo material utilizado deverá ser descartável, estéril e apiogênico
· O tempo de coleta limite deverá ser de 15min (sendo o tempo ideal 12min)
- Materiais:
· Bolsa coletora, 2 bolsas satélites, minibolsa para desvio de fluxo e coleta de amostras, agulha, tubo coletor, tubos de coleta de amostras
2. Pós coleta:
- Homogeneização
- Inspeção visual:
· Alteração da cor, lipemia do sobrenadante, presença de coágulos e presença de vazamento 
- Parâmetros aceitos:
· Volume: de acordo com método utilizado (todas as unidades processadas)
· Hematócrito: 50 a 80% (1 ou 10% das unidades processadas)
· Hemoglobina: >45g/ unidade (1 ou1 10% das unidades processadas)
· Hemólise: <0,8% das massas no último dia do armazenamento (1 ou1 10% das unidades processadas) 
· Controle microbiológico: negativo (1 ou1 10% das unidades processadas)
- Repouso:
· ~2h à temperatura entre 20-24°C ou deverá ser mantido em placas frias de butanodiol
3. Processamento
Toda bolsa de sangue, desde que esteja dentro dos padrões necessários, poderá ser processada para a obtenção dos seus hemocomponentes eritrocitários, plasmáticos e plaquetários
Todo o processo realizado com as bolsas de sangue deverá ser realizado em um sistema fechado, e, caso haja a necessidade de abertura, é necessário dispor de métodos e equipamentos que garantam a esterilidade do produto
- Princípio físico da separação (de cima para baixo):
Plaquetas Linfócitos Monócitos Granulócitos Hemácias
- Pode ser realizado:
· Coleta do sangue total centrifugação refrigeradaCENTRIFUGAÇÃO LEVE (DUAS FASES): precipitado (hemácia) + sobrenadante (plasma rico em plaqueta - PRP)
CENTRIFUGAÇÃO PESADA (TRÊS FASES): precipitado (hemácias) + interface (camada leucoplaquetária) + sobrenadante (plasma fresco)
· Aférese 
- Podem ser obtidos:
· Hemocomponentes: produto oriundo da centrifugação de uma unidade de sangue total (concentrado de hemácias, concentrado de plaquetas, plasma fresco congelado, crioprecipitado)
· Hemoderivados: produto oriundo do sangue total ou do plasma, obtidos por métodos físico-químicos ou biotecnológico (albumina humana, imunoglobulina, fatores do sangue)
4. Produtos
4.1 Concentrado de hemácias
- Indicação: aumentar a massa eritrocitária em pacientes que necessitam o transporte de oxigênio
- Validade: 42 dias sob refrigeração de 2-6°C, 4 na temperatura ambiente, volume ~150-300mL
- Tipos:
· Concentrado de hemácias desleucocitado: pode ser realizado por filtração e por extração da camada Buffy-Coat deve conter menos de 5X10^6 leucócitos por componente
* Leucócitos estão relacionados com: reações febris não hemolíticas, formação de anticorpos HLA, refratariedade plaquetária, transmissão de doenças virais (CMV, HTLV) e reações enxerto vs. Hospedeiro
CONCENTRADO DE HEMÁCIAS CONGELADO: são conservadas em temperaturas <-65ºC por 10 anos com agente crioprotetor (glicerol e amido hidroxilado)
CONCENTRADO DE HEMÁCIAS REJUVENESCIDO: hemácias tratadas por método que restabeleça níveis normais de 2,3DPG e ATP 
CONCENTRADO DE HEMÁCIAS IRRADIADO: submetido a irradiação com dose mínima de 25Gy
Processo
Tipos
Princípio
Filtração (CHF)
Filtração in line (bancada/ pré estocagem): diminuição da hemólise, remoção dos leucócitos dos doadores antes da apoptose ou necrose e antes de ocorrer colapso dos leucócitos a 4ºC e antes da liberação de citocinas em temperatura ambiente
Filtração on line (beira de leito/pós-estocagem): liberação de citocinas e ocorrência de reação hipotensiva
Uso de filtros com estrutura de teia e poros de fibras (poliéster) para reter leucócitos e plaquetas por peneiramento mecânico e aderência específica. 
Extração da camada Buffy Coat (BC)
Concentrado de hemácias Buffy-Coat (CHBC): retira-se ~80% dos leucócitos pela centrifugação
Concentrado de hemácias Buffy-Coat filtrada (CHBCF): retira-se ~99,9% dos leucócitos
Sensores infravermelhos nas prensas frontais (detecção de hemácias e controle de Ht e camada leucoplaquetária), permite a separação precisa e reprodutível (dispensa operador), controle de volume (possibilidade de programação para deslocamento de prensas), baixa contaminação por leucócitos (sucesso do processo e facilidade de programação de volume), balanças de precisão integradas com pesagem automática de unidades de plasma e concentrado de hemácias 
* Os leucoócitos estão relacionados com: reações febris não hemolíticas, formação de anticorpos HLA, refratariedade plaquetária, transmissão de doenças virais (CMV e HTLV) e reação enxerto vs. Hospedeiro
* Leucócitos estão relacionados com: reações febris não hemolíticas, formação de anticorpos HLA, refratariedade plaquetária, transmissão de doenças virais (CMV, HTLV) e reações enxerto vs. Hospedeiro
CONCENTRADO DE HEMÁCIAS CONGELADO: são conservadas em temperaturas <-65ºC por 10 anos com agente crioprotetor (glicerol e amido hidroxilado)
CONCENTRADO DE HEMÁCIAS REJUVENESCIDO: hemácias tratadas por método que restabeleça níveis normais de 2,3DPG e ATP 
CONCENTRADO DE HEMÁCIAS IRRADIADO: submetido a irradiação com dose mínima de 25Gy
· Concentrado de hemácias congelado: são conservadas em temperaturas <-65ºC, com validade de 10 anos e agente criopreservador (glicerol e amido hidroxilado)
· Concentrado de hemácias rejuvenescido: hemácias tratadas por método que restabeleça níveis normais de 2,3DGP e ATP
· Concentrado de hemácias lavado: reedução da quantidade final de proteínas totais para 500mg/ unidade
* Indicação: pacientes com histórico de reações alérgias pós transfusão
· Concentrado de hemácias: eritrócitos presentes na bolsa pós centrifugação
· Concentrado de hemácias com camada leucoplaquetária removida: devem ser preparadas por um método que reduza o número de leucócitos para menos de 1,2X10^9
· Concentrado de hemácias irradiado: submetido a irradiação com dose mínima de 25Gy
	Processo
	
	
Irradiação
	A dose em qualquer ponto do componente não deve ser inferior a 15Gy e nem superior a 50Gy, tem como objetivo inativar funcionalmente linfócitos viáveis dos produtos sanguíneos, o procedimento deve ser realizado em até 14 dias após coleta e armazenado no máximo 28 dias após irradiação
* Indicação: transfusão intrauterina, recém-nascidos de baixo peso ou prematuros, imunodeficientes graves, pacientes imunossuprimidos, transplante de componentes HLA compatíveis e receptor parente de 1 grau do doador
*Manipulação: deve ser realizada em ambiente fechado, caso haja a necessidade de abrir a bolsa, necessário realizar o processo em cabine biológica. Caso os componentes plaquetários não forem utilizados em até 4h pós a abertura e o concentrado de hemácias em 24h, jogar a bolsa fora. Utilizar câmaras conservadoras
4.2 Componentes plaquetários
- O que é: suspensão de plaquetas em plasma preparado mediante a dupla centrifugação de uma unidade de sangue total 
- Validade: a produção de concentrado de plaquetas poderá ser realizada até 24h após a coleta do sangue total e mantido a temperatura de 22+-2ºC. Ele deve ser armazenado em temperatura controlada de 22+-2ºC sob agitação constante, com validade de 3-5 dias dependendo do tipo de plastificante da bolsa de conservação- Obtenção das plaquetas: concentrado de plaquetas por aférese (volume ~200-300mL plasma = 1 doador) e pool de concentrado de plaquetas (volume ~40-70mL plasma = 4-6 doadores)
- Métodos de preparação:
· Plasma rico em plaquetas (PRP):
SANGUE TOTAL (450ML EM 63 ML DE CPDA1) CENTRIFUGAÇÃO LEVE CONCENTRADO DE HEMÁCIAS (CH) COM CPDA1 + PLASMA RICO EM PLAQUETAS (PRP)
PRP CENTRIFUGAÇÃO PESADA PRP + CONCENTRADO DE PLAQUETAS (CP)
* Desvantagens: grande formação de agregados nos concentrados de plaquetas, alto risco de contaminação do concentrado de plaquetas com hemácias e baixa recuperação do plasma
· Buffy- Coat (BC):
SANGUE TOTAL CENTRIFUGAÇÃO PESADA PLASMA FRESCO CONCENTRADO + BUFFY COAT (BC) + CONCENTRADO DE HEMÁCIAS (CH)
5 BC POOL DE BUFFY COAT (PBC) CENTRIFUGAÇÃO LEVE CONCENTRADO DE PLAQUETAS DO POOL DE BUFFY COAT (CPPBC)
* Vantagens: possibilita maior retirada de plasma do CH, menor risco de formação de agregados nos concentrados de plaquetas e diminuição do número de leucócitos dos hemocomponentes devido a sua separação das hemácias e plasma
* Desvantagens: uso de extrator automático
- Inspeção visual dos componentes plaquetários: 
· Alteração de cor (presença de hemácias deixa a bolsa alaranjada)
· Lipemia (bolsa mais amarelada)
· Presença de grumos
· Presença de vazamentos
· Swirling (movimentação contra a luz as plaquetas em formato discoide refletem esta luz de forma heterogênea, permitindo a sua visualização a olho nu de “nuvens peroladas - swirling”)
- Critérios de aceitação da bolsa:
· Volume: 40-70mL
· Nº de plaquetas: > 5,5x10^10
· Nº de leucócitos: < 2,0x10^8
· pH: >6,4 (último dia)
· Swirling: presente
· Teste microbiológico: negativo
- Conservação de plaquetas:
· Conservadora de plaquetas
4.3 Componentes plasmáticos
- Plasma fresco congelado (PFC): 
· Utilidade: cada unidade de plasma fresco congelado contém ao menos 70% da atividade dos fatores Vlll e V de coagulação pré congelamento e volume superior a 150mL
· Obtenção: centrifugação de bolsa de sangue total ou por separadores celulares automatizados, por aférese
· Validade: deve ser congelado até 8h pós a coleta e não pode ser produzido caso o volume de sangue coletado seja <405mL. A estabilidade é dependente da temperatura e da velocidade de congelamento, além da temperatura de armazenamento (se armazenado em temperatura entre -20- -30ºC a validade é de 12 meses, se armazenado em temperatura entre -30ºC ou inferior, a validade é de 24 meses) 
· Preparação: 
SANGUE TOTAL CENTRIFUGAÇÃO LEVE CONCENTRADO DE HEMÁCIAS (CH) + PLASMA RICO EM PLAQUETAS (PRP) + CONGELAMENTO (ATÉ 8H DEPOIS) 
PLASMA FRESCO POR AFÉRESE: SEPARAÇÃO NO MOMENTO DA COLETA
· Controle de qualidade: deve ser avaliado antes do congelamento e um percentual pré e pós congelamento – coloração atípica (lipemia, icterícia e hemólise), presença de fibrina, presença de hemácias e presença de vazamento
· Parâmetros e critérios de aceitação do plasma:
VOLUME: >150mL em todas as unidades coletadas
TTPA: até o valor do pool controle + 20% em 1% ou 4 unidades (o que for maior)
FATOR Vlll (C*): >70% de atividade presente pré congelamento em 1% ou 4 unidades (o que for maior)
FATOR V: >70% de atividade presente pré congelamento em 1% ou 4 unidades (o que for maior)
DETERMINAÇÃO DE LEUCOCITOS RESIDUAIS: <0,1x10^6/mL em 1% ou 4 unidades (o que for maior)
DETERMINAÇÃO DE HEMÁCIAS RESIDUAIS:<6,0x10^6/mL em 1% ou 4 unidades (o que for maior)
DETERMINAÇÃO DE PLAQUETAS RESIDUAIS: <50x10^6/mL em 1% ou 4 unidades (o que for maior)
- PFC 24h: 
· Obtenção: plasma separado de uma unidade de sangue total por centrifugação e totalmente congelado entre 8 – 24 pós coleta
· Preparação: 
SANGUE TOTAL CENTRIFUGAÇÃO LEVE CONCENTRADO DE HEMÁCIAS (CH) + PLASMA RICO EM PLAQUETAS (PRP) CONGELAMENTO (ATÉ 24H DEPOIS) 
PLASMA FRESCO POR AFÉRESE: SEPARAÇÃO NO MOMENTO DA COLETA
- Plasma comum: 
· Utilidade: indústria
· Obtenção: produzido fora das especificações
- Plasma isento de crioprecipitado:
· Obtenção: plasma que foi retirado, em sistema fechado, o crioprecipitado
- Crioprecipitado: 
· Utilidade: fração do plasma insolúvel a frio, o produto deve conter, no mínimo, 70 unidades internacionais de Fator Vlll e 140mg/dL de fibrinogênio
· Obtenção: obtido através do plasma fresco congelado