Aula 04 - Bactérias Patogênicas - Staphylococcus aureus

Prévia do material em texto

Microbiologia clínica
Dr. César Augusto Caneschi
2019
Bactérias Patogênicas
Staphylococcus aureus
Famílias Staphylococcacea
Micrococcacea
Raras
Staphylococcus spp
Coagulase Positiva – CPS
S. aureus
Coagulase negativa – CNS
S. epidermidis
S. saprophyticus
catalase positiva
Staphylococcus aureus
✓Patógeno oportunista – pode estar presente na microbiota –
comensal. (Escarro, secreção traqueal, vaginal, uretral, secreção de 
orofaringe, orelha, maxilar, conjuntival e urina.)
✓80% da população – portador assintomático.
✓Presença em animais de estimação ou para agropecuária;
✓S. aureus resistente a meticilina (MRSA) – resistentes a 
penicilinas – produtores de beta-lactamase (90%).
✓VRSA - S. aureus resistente a vancomicina. 
Cápsula polissacarídica – proteção da bactéria
Peptideoglicanos e ác. Teicóico – ativação do complemento
SpA – ptn A (adesina) que impede a fagocitose;
Fator clumping +
liga-se ao fibrinogênio →
diferenciação laboratorial
(formação de aglutinação) –
maioria das S. aureus.
Staphylococcus aureus
Membro da microbiota residente
Grande importância patogênica – infecções superficiais e
disseminadas
Presença de linhagens multirresistentes; presença de 
genes adquiridos; toxinas diversas, síndrome do Choque tóxico e 
Síndrome da Pele Escaldada Estafilocócica.
Infecções diversas:
Staphylococcus aureus
✓Anaeróbios facultativos;
✓Imóveis;
✓Gram positivos em cachos
✓H2O2 → H2 + H2O
Distinguir Staphylococcus de
Outros membros da família.
✓Enzimas extracelulares (coagulase – positiva) –
distingue de outras espécies deste gênero;
Procedimentos:
A- Colocar 2 gotas de salina em uma lâmina;
- Adicionar uma colônia isolada;
- Adicionar uma gota de plasma e misturar com 
um palito de plástico;
- Observar se há aglutinação em 10 segundos;
B- Adicionar 0,1 mL de caldo BHI, incubado por uma noite, 
com colônia suspeita a um tubo com 0,5 ml de plasma de 
coelho,
-Incubar por 4 horas à 35°C em estufa ou banho-maria;
- Presença de coágulo é observada pela inclinação suave do 
tubo de ensaio a 90º.
DNAse positivo – pode substituir a prova da catalase.
- Adicionar ao meio original azul de ortotoluidina na 
concentração de 0,1% (coloração azul intensa)
- Incubar a 35°C /24 h;
• Coloração rósea ao redor das colônias → produtoras de 
DNAse.
http://www.medicalexpo.com/pt/prod/elitech-group/product-68339-
764796.html?utm_source=ProductDetail&utm_medium=Web&utm_content=SimilarP
roduct&utm_campaign=CA
Aglutinação em látex
✓Aeróbias e anaeróbias facultativas;
✓18-24h – 35-37ºC,
✓Crescem em elevadas concentrações de NaCl
Ágar manitol salino (7,5% NaCl)
✓ágar sangue (beta-hemolíticas), 
Ágar CLED (urina - colônias amarelas), 
Ágar manitol salino (seletivo indicador) 
suspeita de Staphylococcus: 
positivo (amarela) e negativo (vermelho).
Colônias convexas, amarelo a branca, cremosa,
Odor “semelhante a queijo”.
MRSA
Ampicilina ou amoxicilina e outro com o mesmo 
antibiótico adicionado de um inibidor de 
beta-lactamase (ampicilina- sulbactam ou amoxicilina-ácido clavulânico). 
Famílias Staphylococcacea
Micrococcacea
Raras
Staphylococcus spp
Coagulase Positiva – CPS
S. aureus
Coagulase negativa – CNS
S. epidermidis
S. saprophyticus
catalase positiva
Staphylococcus epidermidis
✓Microbiota da pele e mucosas; patógeno oportunista
✓Infecções hospitalares;
✓Adesão a superfícies → biofilme (hospitais e 
indústrias)
CULTURA DE CATETER (MÉTODO DE MAKI)
Segmento de cateter 
Cultura do lúmen: injetar 1 mL de salina no 
seu interior com uma agulha → ágar sangue
Cultura da superfície externa: rolar o 
segmento do cateter 5X sobre o meio de 
cultura.
Cultura, provas bioquímicas e 
Testes moleculares;
Isolamento/ 
identificação
Teste de sensibilidade
Sim
Patogênica?
Não
CNS
Dados clínicos
Cocos Gram positivos
Coagulase?
Catalase positivo
Staphylococcus
coagulase positivo
S. aureus
Staphylococcus
coagulase negativo
S. saprophyticus - urina
S. lugdunensis - endocartide
S. epidermidis - biofilme
TSA, ágar sangue (gama 
hemólise)
S. epidermidis
- Resistente a polimixina
- Sensível a novobiocina
S. saprophyticus
- Sensível a polimixina
- Resistente a novobiocina
- Gama hemolítica
Teste de sensibilidade:
-Semear a cepa em placa de Muller Hington acrescida de
um disco teste de novobiocina contendo 5 µg.
S. lugdunensis
PROVAS DIFERENCIAS
1- Teste pirrolidonil arilamidase (PYR). 
Positivo para cepas de S. lugdunensis.
Disco impregnado com L-pirrolidonul-beta-naftilaminda (PYR) em 
lâmina.
Umedecer o disco com água e adicionar esfregaço da bactéria e 
aguardar 5’;
Pingar uma gota do reagente PYR;
Formação de cor vermelho-cereja – positivo 
(presença de enzima que hidrolisa o PYR –
Pirrolidonil arilamidase).
S. lugdunensis
2- Teste da ornitina descarboxilase
Transformar a ornitina (aminoácido) presente no meio contendo 
amina primária (putrescina):
Ocorre elevação do pH → mudança do indicador de amarelo para 
púrpura. 
Isolamento/ 
identificação
PYR +
Ornitina +
Sim
Patogênica?
Não
CNS
Dados clínicos
Cocos Gram positivos
Coagulase?
Catalase positivo
Staphylococcus
coagulase positivo
S. aureus
Staphylococcus
coagulase negativo
ágar sangue (gama hemólise)
S. saprophyticus - urina S. epidermidis - biofilme S. lugdunensis - endocartide
R - polimixina
S - novobiocina
S - polimixina
R - novobiocina
Látex positivo
DNAse positivo
Staphylococcus coagulase negativo
- Elevada resistência a antimicrobianos 
- Resistência a beta lactâmicos pode ser maior que S. aureus.
- S. epidermidis isoladas em hospitais → resistentes à 
meticilina/oxacilina.