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QUESTIONÁRIO 1 – ESTUDOS DISCIPLINARES XII · Pergunta 1 0,5 em 0,5 pontos Com relação ao método de eletroforese: I – É um método simples e muito eficiente para separar, para identificar e para purificar fragmentos de DNA, RNA e proteínas. II – Consiste na separação de moléculas ionizadas de acordo com sua carga elétrica e seu peso molecular. III – Moléculas com carga negativa migram para o polo positivo e moléculas com carga positiva migram para o polo negativo. IV – A migração das cargas quando são submetidas a uma diferença de potencial é chamada de eletroforese. Assinale a alternativa correta. Resposta Selecionada: e. As afirmativas I, II, III e IV estão corretas. Respostas: a. As afirmativas I, II e III estão corretas. b. As afirmativas II e IV estão corretas. c. As afirmativas I, III e IV estão corretas. d. As afirmativas III e IV estão corretas. e. As afirmativas I, II, III e IV estão corretas. Comentário da resposta: Resposta: E Comentário: É um método simples e muito eficiente para separar, para identificar e para purificar fragmentos de DNA, RNA e proteínas. Consiste na separação de moléculas ionizadas de acordo com sua carga elétrica e seu peso molecular. Moléculas com carga negativa migram para o polo positivo e moléculas com carga positiva migram para o polo negativo. A migração das cargas quando são submetidas a uma diferença de potencial é chamada de eletroforese. · Pergunta 2 0,5 em 0,5 pontos Existem dois modelos básicos na eletroforese. Assinale a alternativa que contém os dois modelos. Resposta Selecionada: b. Gel de poliacrilamida e gel de agarose. Respostas: a. Ponto isoelétrico e carga de proteínas. b. Gel de poliacrilamida e gel de agarose. c. Proteína de membrana e gel de agarose. d. Centrifugação diferencial e gel de poliacrilamida. e. Biureto e ponto isoelétrico. Comentário da resposta: Resposta: B Comentário: Existem apenas dois modelos na eletroforese que são gel de poliacrilamida e gel de agarose. · Pergunta 3 0,5 em 0,5 pontos Na eletroforese, o modelo gel de poliacrilamida é realizado em cuba vertical para minigel (10 x 8 cm). Analise as afirmações a seguir: I – Na cuba, o gel é polimerizado entre duas placas de vidro ou plástico, afastadas 1 mm uma da outra. II – Antes da polimerização, um pente é colocado na parte superior do gel para formar os poços onde serão colocados de 5 a 20 microlitros de cada amostra, misturadas com azul de bromofenol, um indicador da corrida. III – As partes superior e inferior do gel fazem contato com recipientes de tampão, onde estão os eletrodos que estabelecerão o campo elétrico (~100V) durante a corrida (1 a 2h). IV – Terminada a corrida, as placas são retiradas da cuba, e o gel entre elas é cuidadosamente retirado e corado para revelar as bandas de proteína. Como corantes utiliza-se Coomassie Blue ou nitrato de prata. Assinale a alternativa correta: Resposta Selecionada: c. As afirmativas I, II, III e IV estão corretas. Respostas: a. As afirmativas I, II e III estão corretas. b. As afirmativas II e IV estão corretas. c. As afirmativas I, II, III e IV estão corretas. d. As afirmativas I, III e IV estão corretas. e. As afirmativas III e IV estão corretas. Comentário da resposta: Resposta: C Comentário: Na cuba, o gel é polimerizado entre duas placas de vidro ou plástico, afastadas 1 mm uma da outra. Antes da polimerização, um pente é colocado na parte superior do gel para formar os poços onde serão colocados de 5 a 20 microlitros de cada amostra, misturadas com azul de bromofenol, um indicador da corrida. As partes superior e inferior do gel fazem contato com recipientes de tampão, onde estão os eletrodos que estabelecerão o campo elétrico (~100V) durante a corrida (1 a 2h). Terminada a corrida, as placas são retiradas da cuba, e o gel entre elas é cuidadosamente retirado e corado para revelar as bandas de proteína. Como corantes utiliza-se Coomassie Blue ou nitrato de prata. · Pergunta 4 0,5 em 0,5 pontos Com relação ao Ponto Isoelétrico (pI), analise as afirmações a seguir: I – pI é o valor de pH em que um aminoácido ou uma proteína apresenta carga elétrica líquida igual a zero. II – O pI é o pH no qual há equilíbrio entre as cargas negativas e positivas dos grupamentos iônicos de um aminoácido ou de uma proteína. III – Ponto isoelétrico de proteínas é o valor de pH no qual elas não migram quando submetidas a campo elétrico. IV – pI deve ser determinado teoricamente apenas por curva padrão. Assinale a alternativa correta: Resposta Selecionada: a. As afirmativas I, II e III estão corretas. Respostas: a. As afirmativas I, II e III estão corretas. b. As afirmativas I, II e IV estão corretas. c. As afirmativas II e IV estão corretas. d. As afirmativas I, III e IV estão corretas. e. As afirmativas II e III estão corretas. Comentário da resposta: Resposta: A Comentário: pI é o valor de pH em que um aminoácido ou uma proteína apresenta carga elétrica líquida igual a zero. O pI é o pH no qual há equilíbrio entre as cargas negativas e positivas dos grupamentos iônicos de um aminoácido ou de uma proteína. Ponto isoelétrico de proteínas é o valor de pH no qual elas não migram quando submetidas a campo elétrico. pI deve ser determinado experimentalmente. · Pergunta 5 0,5 em 0,5 pontos O pI é o pH no qual há equilíbrio entre as cargas negativas e positivas dos grupamentos iônicos de um aminoácido ou de uma proteína. Assinale a alternativa correta: Resposta Selecionada: d. pH = pI, a carga líquida da proteína é zero. Respostas: a. pH ≠ pI, a carga líquida da proteína é zero. b. pH ≠ pI, a carga líquida da proteína é um. c. pH = pI, a carga líquida da proteína é um. d. pH = pI, a carga líquida da proteína é zero. e. pH = pI, a carga líquida da proteína é dois. Comentário da resposta: Resposta: D Comentário: pH = pI, a carga líquida da proteína é zero. Com a aplicação de um campo elétrico, as proteínas entram no gel e migram até que cada um alcance um pH equivalente a seu pI. · Pergunta 6 0,5 em 0,5 pontos Os eletrodos utilizados nas técnicas eletroquímicas são dispositivos que permitem a análise do sistema com manipulação mínima, através da magnitude da diferença de potencial. Analise as afirmações a seguir e responda a alternativa correta: Resposta Selecionada: a. As células eletroquímicas são compostas de solução eletrolítica e dos eletrodos, além do composto a ser analisado. Respostas: a. As células eletroquímicas são compostas de solução eletrolítica e dos eletrodos, além do composto a ser analisado. b. Quando esses dispositivos são introduzidos nas soluções eletrolíticas, permitem o estudo da cor do analito. c. Os eletrodos são caracterizados por apresentarem maior portabilidade, facilidade de automação, capacidade de miniaturização e alto custo em relação a outros métodos instrumentais. d. A quantificação das espécies estudadas ocorre pela separação realizada por uma coluna cromatográfica. e. O transporte de massa ocorre por complexação, que é o movimento não espontâneo dos íons devido ao gradiente de concentração do analito na solução. Comentário da resposta: Resposta: A Comentário: Os eletrodos utilizados nas técnicas eletroquímicas são dispositivos que permitem a análise do sistema com manipulação mínima, através da magnitude da diferença de potencial. Assim, quando esses dispositivos são introduzidos nas soluções eletrolíticas, permitem o estudo do transporte de carga no eletrólito e de transferência de carga entre eletrodo e a interface, com o eletrólito. Os eletrodos são caracterizados por apresentarem maior portabilidade, facilidade de automação, capacidade de miniaturização e baixo custo em relação a outros métodos instrumentais, além de proporcionarem elevada sensibilidade,seletividade e viabilidade econômica. A quantificação das espécies estudadas ocorre pelo transporte de massa das espécies eletroativas para o eletrodo. O transporte de massa ocorre por difusão, que é o movimento espontâneo dos íons devido ao gradiente de concentração do analito na solução. · Pergunta 7 0,5 em 0,5 pontos O termo “eletroquímica” foi designado, em 1814, por George Fohn Singer, referindo-se aos processos químicos que geram ou são gerados através de corrente elétrica. Analise as afirmações a seguir: I – A eletroquímica fundamenta-se nas reações de oxidação-redução, onde ocorrem as transferências de elétrons entre as espécies químicas. II – A espécie eletroativa atua de forma a oxidar ou reduzir em uma região de potencial aplicado, na qual a transferência de elétrons seja favorável termodinamicamente ou cineticamente, criando-se um fluxo de elétrons. III – Nos métodos eletroanalíticos, pode-se avaliar, por exemplo, a concentração de analitos eletroativos, os mecanismos de reação, a partir de fatores como diferença de potencial, intensidade de corrente e acúmulo interfacial de carga. IV – A demora nas detecções, a baixa sensibilidade, a seletividade e o alto custo das medidas eletroquímicas refletem o vasto campo de suas aplicações e técnicas. Assinale a alternativa correta: Resposta Selecionada: e. As afirmativas I, II e III estão corretas. Respostas: a. As afirmativas I, II e IV estão corretas. b. As afirmativas III e IV estão corretas. c. As afirmativas I, III e IV estão corretas. d. As afirmativas II e IV estão corretas. e. As afirmativas I, II e III estão corretas. Comentário da resposta: Resposta: E Comentário: A eletroquímica fundamenta-se nas reações de oxidação-redução, onde ocorrem as transferências de elétrons entre as espécies químicas. A espécie eletroativa atua de forma a oxidar ou reduzir em uma região de potencial aplicado, na qual a transferência de elétrons seja favorável termodinamicamente ou cineticamente, criando-se um fluxo de elétrons. Nos métodos eletroanalíticos, pode-se avaliar, por exemplo, a concentração de analitos eletroativos, os mecanismos de reação, a partir de fatores como diferença de potencial, intensidade de corrente e acúmulo interfacial de carga. A rapidez nas detecções, a alta sensibilidade, a seletividade e o baixo custo das medidas eletroquímicas refletem o vasto campo de suas aplicações e técnicas. · Pergunta 8 0,5 em 0,5 pontos Qual foi a técnica empregada pela primeira vez em 1937 pelo bioquímico Arne Tisélius e que permite realizar a separação de macromoléculas, como DNA, RNA, proteínas e enzimas, com tamanhos e cargas diferentes? Resposta Selecionada: c. Eletroforese. Respostas: a. Cromatografia gasosa. b. Cromatografia líquida. c. Eletroforese. d. Espectrofotometria de absorção atômica. e. Espectrometria de massa. Comentário da resposta: Resposta: C Comentário: A eletroforese é muito utilizada e tem papel importante na análise laboratorial e também em pesquisas científicas. Essa técnica foi empregada pela primeira vez em 1937 pelo bioquímico Arne Tisélius e permite realizar a separação de macromoléculas, como DNA, RNA, proteínas e enzimas, com tamanhos e cargas diferentes. · Pergunta 9 0,5 em 0,5 pontos É um método de separação de moléculas carregadas submetidas a um campo elétrico. Amostras de fragmentos de DNA, após o ensaio, mostraram um padrão de migração semelhante ao mostrado na figura a seguir. Qual é o método empregado? Assinale a resposta correta. (Fonte: Adaptado de: U so da citogenética molecular no melhoramento genético de trigo. Disponível em: cnpt.embrapa.br. Acesso em: 21 abr. 2021) Resposta Selecionada: d. Eletroforese. Respostas: a. Cromatografia gasosa. b. Cromatografia líquida. c. Espectrofotometria de absorção atômica. d. Eletroforese. e. Espectrometria de massa. Comentário da resposta: Resposta: D Comentário: A eletroforese é um método de separação de moléculas carregadas submetidas a um campo elétrico. Amostras de fragmentos de DNA após eletroforese mostraram um padrão de migração. Na eletroforese, o modelo gel de poliacrilamida é realizado em cuba vertical para minigel (10 x 8 cm). As partes superior e inferior do gel fazem contato com recipientes de tampão, onde estão os eletrodos que estabelecerão o campo elétrico (~100V) durante a corrida (1 a 2h). Terminada a corrida, as placas são retiradas da cuba, e o gel entre elas é cuidadosamente retirado e corado para revelar as bandas de proteína. Como corantes utiliza-se Coomassie Blue ou nitrato de prata. · Pergunta 10 0,5 em 0,5 pontos No funcionamento diário de um laboratório de análises clínicas, uma série de técnicas analíticas para diagnósticos clínicos e moleculares são utilizadas. Analise as afirmativas a seguir: I – A eletroquímica envolve a mensuração da corrente ou voltagem gerada pela atividade de espécies de íons específicas. II – A eletroforese é uma técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de acordo com sua massa e carga. Pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. III – No Nível de Biossegurança 2, a pipetagem deve ser realizada exclusivamente com a boca, sendo vedada a utilização de dispositivos mecânicos, como peras ou pipetador tipo lápis. IV – As dosagens bioquímicas são de extrema importância na prática clínica, sendo que o conjunto de eletrólitos, metabólitos e enzimas dosados cria um rol de resultados que auxilia na elucidação diagnóstica na prática clínica. Assinale a alternativa correta. Resposta Selecionada: b. As afirmativas I, II e IV estão corretas. Respostas: a. As afirmativas I, II e III estão corretas. b. As afirmativas I, II e IV estão corretas. c. As afirmativas II e IV estão corretas. d. As afirmativas I, III e IV estão corretas. e. As afirmativas III e IV estão corretas. Comentário da resposta: Resposta: B Comentário: A eletroquímica envolve a mensuração da corrente ou voltagem gerada pela atividade de espécies de íons específicas. A eletroforese é uma técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de acordo com sua massa e carga. Pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. No Nível de Biossegurança 2, a pipetagem deve ser realizada na utilização de dispositivos mecânicos, como peras ou pipetador tipo lápis. As dosagens bioquímicas são de extrema importância na prática clínica, sendo que o conjunto de eletrólitos, metabólitos e enzimas dosados cria um rol de resultados que auxilia na elucidação diagnóstica na prática clínica. Segunda-feira, 17 de Outubro de 2022 15h
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