QUESTIONÁRIO 2 ESTUDOS DISCIPLINARES XII

Prévia do material em texto

QUESTIONÁRIO 2 ESTUDOS DISCIPLINARES XII
· Pergunta 1
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	Qual é um método habitualmente usado para separar e também purificar macromoléculas, principalmente ácidos nucleicos e proteínas? Essas macromoléculas são submetidas a um campo elétrico, na qual migram para um polo positivo ou negativo de acordo com a sua carga. Dentre as alternativas a seguir, assinale a que se refere ao método.
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	b. 
Eletroforese.
	Respostas:
	a. 
Cromatografia gasosa.
	
	b. 
Eletroforese.
	
	c. 
Espectrofotometria.
	
	d. 
Espectrometria de massa.
	
	e. 
Infravermelho.
	Comentário da resposta:
	Resposta: B
Comentário: A eletroforese é um método habitualmente usado para separar e também purificar macromoléculas, principalmente ácidos nucleicos e proteínas. Essas macromoléculas são submetidas a um campo elétrico, na qual migram para um polo positivo ou negativo de acordo com a sua carga.
	
	
	
· Pergunta 2
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	Na eletroforese, o fluxo migratório é determinado pelo peso molecular, no qual moléculas de:
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	b. 
Menor peso migram mais rápido que as de maior peso, formando as bandas características que serão visualizadas posteriormente.
	Respostas:
	a. 
Maior peso migram mais rápido que as de menor peso, formando as bandas características que serão visualizadas posteriormente.
	
	b. 
Menor peso migram mais rápido que as de maior peso, formando as bandas características que serão visualizadas posteriormente.
	
	c. 
Menor peso migram mais lentamente que as de maior peso, formando as bandas características que serão visualizadas posteriormente.
	
	d. 
Maior peso migram mais lentamente que as de menor peso, formando as bandas características que serão visualizadas posteriormente.
	
	e. 
Maior peso migram em etapas contínuas que as de menor peso, formando as bandas características que serão visualizadas posteriormente.
	Comentário da resposta:
	Resposta: B
Comentário: O fluxo migratório é determinado pelo peso molecular, no qual moléculas de menor peso migram mais rápido que as de maior peso, formando as bandas características que serão visualizadas posteriormente.
	
	
	
· Pergunta 3
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	Analise as afirmativas a seguir sobre a técnica de eletroforese em gel e responda (V) Verdadeiro ou (F) Falso.
( ) A eletroforese ocorre dentro de uma matriz ou gel que possibilita a corrida da amostra.
( ) O gel é introduzido em uma solução tampão específica para eletroforese que fornece as condições ideais para a passagem da corrente e a manutenção do valor do pH.
( ) As amostras são pipetadas em pequenos poços feitos com um pente no gel. Para ocorrer a migração, a cuba e a fonte de eletroforese exercem uma voltagem, corrente e potência constantes, esses fatores irão determinar o sucesso da técnica.
( ) As bandas são visualizadas sob luz ambiente.
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	a. 
V, V, V, F.
	Respostas:
	a. 
V, V, V, F.
	
	b. 
V, F, V, V.
	
	c. 
V, V, V, V.
	
	d. 
F, V, V, F.
	
	e. 
V, V, F, V.
	Comentário da resposta:
	Resposta: A
Comentário: A eletroforese ocorre dentro de uma matriz ou gel que possibilita a corrida da amostra. O gel é introduzido em uma solução tampão específica para eletroforese que fornece as condições ideais para a passagem da corrente e a manutenção do valor do pH. Em seguida, as amostras são pipetadas em pequenos poços feitos com um pente no gel. Para ocorrer a migração, a cuba e a fonte de eletroforese exercem uma voltagem, corrente e potência constantes, esses fatores irão determinar o sucesso da técnica. E, por fim, as bandas são visualizadas sob luz ultravioleta ou LED, através do equipamento chamado transiluminador.
	
	
	
· Pergunta 4
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	Há vários tipos de eletroforese. A eletroforese normalmente é utilizada para separar proteínas e moléculas de  DNA e RNA. Assinale (V) Verdadeiro ou (F) Falso para as técnicas de eletroforese.
 
( ) Eletroforese em gel de agarose. Nesse caso, a agarose é utilizada como gel para a eletroforese.
( ) Eletroforese em gel de poliacrilamida. A poliacrilamida é feita pela polimerização de dois  polímeros.
( ) Eletroforese desnaturante. Normalmente feita em gel de agarose, inclui um agente desnaturante (normalmente ureia).
( ) Eletroforese luminosa utiliza luz solar.
( ) Eletroforese de transiluminador. Normalmente utiliza lâmpada de cátodo oco.
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	b. 
V, V, V, F, F.
	Respostas:
	a. 
V, V, V, V, V.
	
	b. 
V, V, V, F, F.
	
	c. 
V, F, V, V, F.
	
	d. 
V, F, F, F, F.
	
	e. 
V, V, F, V, V.
	Comentário da resposta:
	Resposta: B
COMENTÁRIO: ELETROFORESE EM GEL DE AGAROSE. NESSE CASO, A AGAROSE É UTILIZADA COMO GEL PARA A ELETROFORESE. A AGAROSE É UM POLISSACARÍDEO E FORMA UMA REDE QUE PRENDE AS MOLÉCULAS DURANTE A MIGRAÇÃO. DEPENDENDO DA CONCENTRAÇÃO DE AGAROSE, HÁ UMA DIFERENÇA NO GRADIENTE DE SEPARAÇÃO, ISTO É, QUANTO MAIOR A CONCENTRAÇÃO DE AGAROSE, MENOR O TAMANHO DOS POROS E MAIOR A DIFICULDADE DA MIGRAÇÃO DOS FRAGMENTOS DE DNA E DE RNA, AUMENTANDO O TEMPO DE MIGRAÇÃO.
ELETROFORESE EM GEL DE POLIACRILAMIDA (PAGE, DE POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS). O GEL DE POLIACRILAMIDA TAMBÉM PODE SER UTILIZADO PARA SEPARAÇÃO DE MOLÉCULAS NA ELETROFORESE. A POLIACRILAMIDA É FEITA PELA POLIMERIZAÇÃO DE DOIS POLÍMEROS: ACRILAMIDA E BISACRILAMIDA. O GEL GERALMENTE É MONTADO NA VERTICAL, ASSIM, VÁRIAS AMOSTRAS PODEM SER ANALISADAS NOS POÇOS QUE SÃO MONTADOS DURANTE O PREPARO DO GEL. O TAMPÃO QUE É UTILIZADO É O MESMO NO GEL E NA CUBA DE ELETROFORESE E TEM PH DE APROXIMADAMENTE 9 PARA PROTEÍNAS, ASSIM, AS MACROMOLÉCULAS FICAM COM SUAS CARGAS NEGATIVAS E MIGRAM EM DIREÇÃO AO ÂNODO. ELETROFORESE DESNATURANTE. NORMALMENTE FEITA EM GEL DE AGAROSE, INCLUI UM AGENTE DESNATURANTE (NORMALMENTE UREIA), O QUE AJUDA A TORNAR A SEPARAÇÃO MELHOR ENTRE MOLÉCULAS QUE APRESENTAM DIFERENCIAÇÃO EM SUAS ESTRUTURAS SECUNDÁRIAS. ELETROFORESE CAPILAR. FUNCIONA COMO A ELETROFORESE NORMAL, PORÉM O GEL E A AMOSTRA ESTÃO DENTRO DE UM CAPILAR, E A AMOSTRA É DETECTADA AUTOMATICAMENTE. ESSE PROCESSO É ATUALMENTE UTILIZADO EM SEQUENCIADORES DE DNA.
	
	
	
· Pergunta 5
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	
A eletroforese pode ser usada para separar moléculas com base na carga, tamanho e afinidade de ligação que possuem. A técnica é aplicada principalmente para separar e analisar biomoléculas, como DNA, RNA, proteínas, ácidos nucleicos, plasmídeos e fragmentos dessas macromoléculas. Essa é uma das técnicas utilizadas para identificar DNA-fonte, como no teste de paternidade e na ciência forense.
 
Analise as afirmações a seguir:
 
I – A eletroforese de ânion ou partículas carregadas negativamente é chamada  anaforese.
II – A eletroforese de cátion ou partículas carregadas positivamente é chamada cataforese.
III – Um fator importante é o  tamanho da partícula. Pequenos íons e moléculas podem se mover através de um gel ou líquido muito mais rapidamente do que os grandes.
IV – O processo de eletroforese foi observado pela primeira vez em 1807 por Ferdinand Frederic Reuss, da Universidade Estadual de Moscou, que notou que as partículas de argila migraram em águas expostas a um campo elétrico contínuo.
 
Assinale a alternativa correta:
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	c. 
I, II, III e IV.
	Respostas:
	a. 
Apenas I e II.
	
	b. 
Apenas I, II e IV.
	
	c. 
I, II, III e IV.
	
	d. 
Apenas I e III.
	
	e. 
Apenas II, III e IV.
	Comentário da resposta:
	Resposta: C
Comentário: A eletroforese de ânion ou partículas carregadas negativamente é chamada  anaforese. A eletroforese de cátion ou partículas carregadas positivamente é chamada cataforese. Um fator importante é o  tamanho da partícula. Pequenos íons e moléculas podem se mover através de um gel ou líquido muito mais rapidamente do que os grandes. O processo de eletroforese foi observado pela primeira vez em 1807 por Ferdinand Frederic Reuss, da Universidade Estadual de Moscou, que notou que as partículas de argila migraram em águas expostas a um campo elétrico contínuo.· Pergunta 6
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	As técnicas eletroquímicas constituem-se em poderosa ferramenta para os analistas na resolução de seus problemas, especialmente por causa de algumas características vantajosas, como a elevada sensibilidade das determinações, custo moderado e portabilidade.
 
Analise as afirmativas a seguir:
 
I – Aparecem aspectos desvantajosos das medições eletroquímicas, principalmente quando comparadas às efetuadas com técnicas espectroscópicas. Um dos problemas refere-se à interação do eletrodo com a amostra, que, em muitos casos, ocasiona perda ou irreprodutibilidade nas medidas.
II – A versatilidade das técnicas eletroquímicas também merece destaque, visto que é possível controlar as reações eletródicas modificando a interface eletrodo-solução e selecionando-se criteriosamente o potencial aplicado à célula.
III – O uso de reagentes moleculares para manipular deliberadamente a superfície de eletrodos tem vasta aplicação em eletroanalítica, pois conduz à melhoria na capacidade de reconhecimento e/ou na amplificação de sinais de corrente.
 
Assinale a resposta correta:
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	e. 
I, II e III.
	Respostas:
	a. 
Apenas I.
	
	b. 
Apenas I e II.
	
	c. 
Apenas III.
	
	d. 
Apenas II e III.
	
	e. 
I, II e III.
	Comentário da resposta:
	Resposta: E
Comentário: Aparecem aspectos desvantajosos das medições eletroquímicas, principalmente quando comparadas às efetuadas com técnicas espectroscópicas. Um dos problemas refere-se à interação do eletrodo com a amostra, que, em muitos casos, ocasiona perda ou irreprodutibilidade nas medidas. A versatilidade das técnicas eletroquímicas também merece destaque, visto que é possível controlar as reações eletródicas modificando a interface eletrodo-solução e selecionando-se criteriosamente o potencial aplicado à célula. O uso de reagentes moleculares para manipular deliberadamente a superfície de eletrodos tem vasta aplicação em eletroanalítica, pois conduz à melhoria na capacidade de reconhecimento e/ou na amplificação de sinais de corrente, ao mesmo tempo em que pode tornar as determinações mais seletivas pelo efeito eletrocatalítico (diminuição da sobretensão dos processos eletródicos) ou pela restrição da passagem de espécies interferentes empregando-se membranas apropriadas.
	
	
	
· Pergunta 7
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	O efeito eletroforético tem como base a teoria de Debye-Hückel-Onsager. Essa teoria de dissociação eletrolítica aceita o fato de as partículas carregadas moverem-se sob a influência de forças eletrostáticas para um eletrodo de carga oposta quando é aplicada uma diferença de potencial em uma solução contendo eletrólitos. Para sua execução, é necessária uma solução tampão, que possui várias funções nesse processo.
 
Analise tais funções e marque para as afirmativas (V) Verdadeiro ou (F) Falso.
 
( ) Conduz corrente elétrica.
( ) Determina a carga elétrica do soluto.
( ) Colore a substância a ser analisada.
( )  Estabiliza o pH.
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	d. 
F, V, F, V.
	Respostas:
	a. 
V, V, F, F.
	
	b. 
F, V, V, V.
	
	c. 
F, F, V, V.
	
	d. 
F, V, F, V.
	
	e. 
V, F, F, V.
	Comentário da resposta:
	Resposta: D
Comentário: A eletroforese é a migração de uma molécula carregada sob a influência de um campo elétrico. Estabiliza o pH e determina a carga elétrica do soluto.
	
	
	
· Pergunta 8
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	As técnicas analíticas instrumentais têm se destacado sobremaneira nos últimos anos pelos avanços tecnológicos, tanto na montagem de sistemas analíticos mais robustos e de menor tamanho, quanto no desenvolvimento de softwares de operação e tratamento de dados que otimizam o tempo de análise e de interpretação dos resultados obtidos, o que tem levado, em associação a outros fatores de mercado, a uma redução nos preços dos equipamentos de laboratório. São objetivos dos controles de qualidade internos e externos realizados no laboratório clínico:
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	e. 
Todas as alternativas estão corretas.
	Respostas:
	a. 
Analisar o comportamento das análises instrumentais frequentemente.
	
	b. 
Identificar problemas e realizar correções.
	
	c. 
Avaliar e garantir a eficácia de métodos de trabalho, desempenho dos equipamentos, verificar interferência do ruído de rede e reagentes.
	
	d. 
Somente as alternativas A e B estão corretas.
	
	e. 
Todas as alternativas estão corretas.
	Comentário da resposta:
	Resposta: E
Comentário: Para garantir a qualidade dos ensaios, deve-se: analisar o comportamento das análises instrumentais frequentemente, identificar problemas e realizar correções, avaliar e garantir a eficácia de métodos de trabalho, desempenho dos equipamentos, verificar interferência do ruído de rede e reagentes.
	
	
	
· Pergunta 9
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	Embora o método instrumental aumente o custo de uma análise pelo uso de equipamentos sofisticados, que demandam aparatos eletrônicos mais complexos, sua utilização vem sendo cada vez mais difundida nos laboratórios.
Assinale a alternativa que apresenta o princípio da seguinte técnica: a técnica é aplicada principalmente para separar e analisar biomoléculas, como DNA, RNA, proteínas, ácidos nucleicos, plasmídeos e fragmentos dessas macromoléculas.
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	c. 
Eletroforese.
	Respostas:
	a. 
Cromatografia.
	
	b. 
Fotoluminescência.
	
	c. 
Eletroforese.
	
	d. 
Potenciômetro.
	
	e. 
Espectrofotometria.
	Comentário da resposta:
	Resposta: C
Comentário: Eletroforese é a técnica aplicada principalmente para separar e analisar biomoléculas, como DNA, RNA, proteínas, ácidos nucleicos, plasmídeos e fragmentos dessas macromoléculas.
	
	
	
· Pergunta 10
0,5 em 0,5 pontos
	
	
	
	Os fundamentos da eletroforese bidimensional foram introduzidos em 1975. A técnica resulta da combinação da focalização isoelétrica e da eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante. As proteínas são separadas de acordo com seu ponto isoelétrico pela focalização isoelétrica, na primeira dimensão e, na segunda dimensão, as proteínas são separadas de acordo com suas massas moleculares.
 
Analise as afirmações a seguir:
 
I – A eletroforese bidimensional é uma ferramenta importantíssima em investigações bioquímicas. Ela combina duas formas diferentes de separação de proteínas: a focalização isoelétrica e a eletroforese do tipo SDS-PAGE. Em cada uma de suas etapas, as proteínas são separadas por diferentes características.
II – A SDS-PAGE, eletroforese unidimensional, consiste em um método para a separação de polipeptídios de acordo com os seus pesos moleculares.
III – A técnica é realizada em gel de poliacrilamida contendo duodecil sulfato de sódio (SDS). No entanto, os métodos unidimensionais de separação podem separar um número relativamente pequeno de proteínas (geralmente menos de 50).
IV – A eletroforese bidimensional apresenta uma menor capacidade para separar misturas complexas.
V – Apesar de ser amplamente utilizado, esse método apresenta problemas de reprodutibilidade, uma vez que é incapaz de detectar proteínas em baixa abundância ou altamente hidrofóbicas.
 
Assinale a alternativa correta:
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	e. 
Apenas I, II, III e V.
	Respostas:
	a. 
Apenas I, II e III.
	
	b. 
Apenas II, III e V.
	
	c. 
Apenas III, IV e V.
	
	d. 
Apenas I, IV e V.
	
	e. 
Apenas I, II, III e V.
	Comentário da resposta:
	Resposta: E
Comentário: A eletroforese bidimensional é uma ferramenta importantíssima em investigações bioquímicas. Ela combina duas formas diferentes de separação de proteínas: a focalização isoelétrica e a eletroforese do tipo SDS-PAGE. Em cada uma de suas etapas, as proteínas são separadas por diferentes características.
A SDS-PAGE, eletroforese unidimensional, consiste em um método para a separação de polipeptídios de acordo com os seus pesos moleculares.
A técnica é realizada em gel de poliacrilamida contendo duodecil sulfato de sódio (SDS). No entanto, os métodos unidimensionais de separação podem separar um número relativamente pequenode proteínas (geralmente menos de 50).
A eletroforese bidimensional apresenta uma maior capacidade para separar misturas complexas.
Apesar de ser amplamente utilizado, esse método apresenta problemas de reprodutibilidade, uma vez que é incapaz de detectar proteínas em baixa abundância ou altamente hidrofóbicas.
	
	
	
Quarta-feira, 19 de Outubro de 2022 12h27min5