Aula 03- Métodos de avaliação do crescimento bacteriano

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Profª. Adrielle Pieve de Castro
Mª. Ciências Farmacêuticas – UFSJ
adriellepieve@unilavras.edu.br 
Centro Universitário de Lavras
Faculdade de Farmácia
Disciplina de Microbiologia Geral
2022/2
Métodos de avaliação do 
crescimento bacteriano
Mensurando o crescimento bacteriano
Contagem de células viáveis (placa)
• Célula viável: capaz de dividir-se, originando células-filhas.
• O procedimento de contagem de células viáveis pressupõe que cada célula viável é
capaz de crescer e dividir-se, originando uma colônia.
Número de colônias em placa = número de células viáveis
Mensurando o crescimento bacteriano
Contagem de células viáveis (placa)
• Métodos:
• Semeadura por espalhamento
Mensurando o crescimento bacteriano
Contagem de células viáveis (placa)
• Métodos:
• Semeadura em profundidade
Mensurando o crescimento bacteriano
Contagem de células viáveis (placa)
• Diluições seriadas:
Unidades 
Formadoras de 
Colônias (UFC) 
Mensurando o crescimento bacteriano
Contagem de células viáveis (placa)
• Fontes de erros:
• Inconsistências no plaqueamento, como erros de pipetagem de amostras líquidas,
amostras desuniformes (p. ex., uma amostra contendo grumos celulares)
• Homogeneização insuficiente da amostra;
• Intolerância ao calor (caso a técnica de semeadura em profundidade seja usada), e
muitos outros fatores
Mensurando o crescimento bacteriano
Contagem de células viáveis (placa)
• Aplicações
• Microbiologia de alimentos e industrial;
• Médica- Microbiologia Clínica;
• Aquática;
Alta sensibilidade: 01 célula viável por amostra
inoculada pode ser detectada. Essa propriedade
permite a detecção precisa de contaminação
microbiana em alimentos ou outros produtos
Mensurando o crescimento bacteriano
Espectrofotometria
• As células dispersam luz, e um método rápido e bastante útil para estimar a massa
celular é a turbidez;
• Uma suspensão celular exibe aspecto nebuloso (turvo) ao olho nu porque as células
dispersam a luz que atravessa a suspensão;
• ↑ nº células ↑ quantidade de luz dispersa (mais turva a suspensão);
Mensurando o crescimento bacteriano
Espectrofotometria
Mensurando o crescimento bacteriano
Espectrofotometria
• Densidade óptica = nº células;
• Antes desse procedimento ser realizado, uma
curva padrão deve ser previamente construída,
relacionando o número de células (contagem
microscópica ou de células viáveis), peso seco
ou teor proteico, à turbidez
Mensurando o crescimento bacteriano
Espectrofotometria
• Vantagens:
• Rápido e fácil execução;
• Não causam destruição ou alteração significativa da amostra.
• Desvantagens:
• Embora muitos microrganismos cresçam em suspensões homogêneas em meio
líquido, outros não o fazem. Algumas bactérias formam agrupamentos pequenos ou
grandes, e, nestas situações, as medidas da DO podem ser bastante imprecisas
como avaliação do total da massa microbiana.
Mensurando o crescimento bacteriano
Espectrofotometria
• Aplicações
• Microbiologia Clínica- antibiograma
Obter uma turvação correspondente a 0,5 da escala de
McFarland. Isto significa que há aproximadamente 1,5
x 10 8 unidades formadoras de colônias (UFC)/mL
Escala McFarland
Referências bibliográficas
MADIGAN, MICHAEL T. Microbiologia de Brock. 14. ed. Porto Alegre:
Artmed, 2016.