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1. As bactérias podem ser classificadas como Gram-positivas ou Gram-negativas, o que é de grande importância no auxílio do diagnóstico laboratorial. Em relação às características e às diferenças estruturais entre as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, assinale a alternativa correta: Resposta correta. A. As bactérias Gram-negativas apresentam porinas, que são proteínas de membrana. As paredes celulares das bactérias Gram-negativas apresentam uma ou poucas camadas de peptidoglicano. Ainda, as bactérias Gram-negativas apresentam uma membrana externa, constituída de LPS,e porinas, as quais permitem a permeabilidade seletiva de algumas moléculas, como nucleotídeos, dissacarídeos, peptídeos, aminoácidos, vitamina B12 e ferro. Já as bactérias Gram-positivas apresentam várias camadas de peptidoglicano e não têm membrana externa. A maioria das espécies Gram-positivas apresenta ácidos teicoicos situados na parede celular. Você não acertou! B. As bactérias Gram-negativas apresentam várias camadas de peptidoglicano. As paredes celulares das bactérias Gram-negativas apresentam uma ou poucas camadas de peptidoglicano. Ainda, as bactérias Gram-negativas apresentam uma membrana externa, constituída de LPS,e porinas, as quais permitem a permeabilidade seletiva de algumas moléculas, como nucleotídeos, dissacarídeos, peptídeos, aminoácidos, vitamina B12 e ferro. Já as bactérias Gram-positivas apresentam várias camadas de peptidoglicano e não têm membrana externa. A maioria das espécies Gram-positivas apresenta ácidos teicoicos situados na parede celular. Resposta incorreta. C. As bactérias Gram-positivas apresentam uma membrana externa. As paredes celulares das bactérias Gram-negativas apresentam uma ou poucas camadas de peptidoglicano. Ainda, as bactérias Gram-negativas apresentam uma membrana externa, constituída de LPS,e porinas, as quais permitem a permeabilidade seletiva de algumas moléculas, como nucleotídeos, dissacarídeos, peptídeos, aminoácidos, vitamina B12 e ferro. Já as bactérias Gram-positivas apresentam várias camadas de peptidoglicano e não têm membrana externa. A maioria das espécies Gram-positivas apresenta ácidos teicoicos situados na parede celular. Resposta incorreta. D. Os lipopolissacarídeos (LPS) são endotoxinas encontradas nas bactérias Gram-positivas. As paredes celulares das bactérias Gram-negativas apresentam uma ou poucas camadas de peptidoglicano. Ainda, as bactérias Gram-negativas apresentam uma membrana externa, constituída de LPS,e porinas, as quais permitem a permeabilidade seletiva de algumas moléculas, como nucleotídeos, dissacarídeos, peptídeos, aminoácidos, vitamina B12 e ferro. Já as bactérias Gram-positivas apresentam várias camadas de peptidoglicano e não têm membrana externa. A maioria das espécies Gram-positivas apresenta ácidos teicoicos situados na parede celular. Resposta incorreta. E. Os ácidos teicoicos são fatores de virulência encontrados nas bactérias Gram-negativas. As paredes celulares das bactérias Gram-negativas apresentam uma ou poucas camadas de peptidoglicano. Ainda, as bactérias Gram-negativas apresentam uma membrana externa, constituída de LPS,e porinas, as quais permitem a permeabilidade seletiva de algumas moléculas, como nucleotídeos, dissacarídeos, peptídeos, aminoácidos, vitamina B12 e ferro. Já as bactérias Gram-positivas apresentam várias camadas de peptidoglicano e não têm membrana externa. A maioria das espécies Gram-positivas apresenta ácidos teicoicos situados na parede celular. 2. A coloração de Gram é uma técnica amplamente utilizada em bacteriologia clínica para classificar as bactérias como Gram-positivas ou Gram-negativas, por meio da visualização em microscópio de campo claro. A respeito da técnica da coloração de Gram, assinale a alternativa correta: Resposta incorreta. A. As bactérias Gram-positivas coram-se de rosa/vermelho, enquanto as Gram-negativas coram-se de azul/púrpura. As bactérias Gram-positivas coram-se de azul/púrpura, enquanto as Gram-negativas coram-se de rosa/vermelho. A primeira etapa da coloração de Gram é a adição do corante básico cristal de violeta, que cora as células de azul/roxo-violeta. O iodo é utilizado como mordente, que forma um complexo cristal violeta-iodo. Após, a lâmina passa pela etapa de descoloração com um solvente orgânico (álcool ou solução álcool-acetona).Após a etapa de descoloração, as bactérias Gram-negativas eliminam o complexo cristal violeta-iodo, tornando-se incolores; entretanto, as Gram-positivas não conseguem eliminar o complexo cristal violeta-iodo. Uma vez que as bactérias Gram-negativas tornaram-se incolores, utiliza-se o corante safranina ou fucsina para corá-las de vermelho/rosa. Resposta incorreta. B. O iodo é utilizado como descorante, que remove a coloração azul de algumas bactérias. As bactérias Gram-positivas coram-se de azul/púrpura, enquanto as Gram-negativas coram-se de rosa/vermelho. A primeira etapa da coloração de Gram é a adição do corante básico cristal de violeta, que cora as células de azul/roxo-violeta. O iodo é utilizado como mordente, que forma um complexo cristal violeta-iodo. Após, a lâmina passa pela etapa de descoloração com um solvente orgânico (álcool ou solução álcool-acetona).Após a etapa de descoloração, as bactérias Gram-negativas eliminam o complexo cristal violeta-iodo, tornando-se incolores; entretanto, as Gram-positivas não conseguem eliminar o complexo cristal violeta-iodo. Uma vez que as bactérias Gram-negativas tornaram-se incolores, utiliza-se o corante safranina ou fucsina para corá-las de vermelho/rosa. Resposta incorreta. C. Após a etapa de descoloração, as bactérias Gram-positivas eliminam o complexo cristal violeta-iodo. As bactérias Gram-positivas coram-se de azul/púrpura, enquanto as Gram-negativas coram-se de rosa/vermelho. A primeira etapa da coloração de Gram é a adição do corante básico cristal de violeta, que cora as células de azul/roxo-violeta. O iodo é utilizado como mordente, que forma um complexo cristal violeta-iodo. Após, a lâmina passa pela etapa de descoloração com um solvente orgânico (álcool ou solução álcool-acetona).Após a etapa de descoloração, as bactérias Gram-negativas eliminam o complexo cristal violeta-iodo, tornando-se incolores; entretanto, as Gram-positivas não conseguem eliminar o complexo cristal violeta-iodo. Uma vez que as bactérias Gram-negativas tornaram-se incolores, utiliza-se o corante safranina ou fucsina para corá-las de vermelho/rosa. Resposta incorreta. D. O cristal de violeta é um corante ácido que cora as células de azul/roxo-violeta somente. As bactérias Gram-positivas coram-se de azul/púrpura, enquanto as Gram-negativas coram-se de rosa/vermelho. A primeira etapa da coloração de Gram é a adição do corante básico cristal de violeta, que cora as células de azul/roxo-violeta. O iodo é utilizado como mordente, que forma um complexo cristal violeta-iodo. Após, a lâmina passa pela etapa de descoloração com um solvente orgânico (álcool ou solução álcool-acetona).Após a etapa de descoloração, as bactérias Gram-negativas eliminam o complexo cristal violeta-iodo, tornando-se incolores; entretanto, as Gram-positivas não conseguem eliminar o complexo cristal violeta-iodo. Uma vez que as bactérias Gram-negativas tornaram-se incolores, utiliza-se o corante safranina ou fucsina para corá-las de vermelho/rosa. Você acertou! E. Para se corar as bactérias Gram-negativas, utilizam-se os corantes safranina ou fucsina. As bactérias Gram-positivas coram-se de azul/púrpura, enquanto as Gram-negativas coram-se de rosa/vermelho. A primeira etapa da coloração de Gram é a adição do corante básico cristal de violeta, que cora as células de azul/roxo-violeta. O iodo é utilizado como mordente, que forma um complexo cristal violeta-iodo. Após, a lâmina passa pela etapa de descoloração com um solvente orgânico (álcool ou solução álcool-acetona).Após a etapa de descoloração, as bactérias Gram-negativas eliminam o complexo cristal violeta-iodo, tornando-se incolores; entretanto, as Gram-positivas não conseguemeliminar o complexo cristal violeta-iodo. Uma vez que as bactérias Gram-negativas tornaram-se incolores, utiliza-se o corante safranina ou fucsina para corá-las de vermelho/rosa. 3. As bactérias álcool-acidorresistentes apresentam propriedades celulares peculiares. Assinale a alternativa correta em relação às características das bactérias álcool-acidorresistentes: Você não acertou! A. O ácido micólico é um lipídeo encontrado nas membranas celulares das bactérias álcool-acidorresistentes. As bactérias álcool-acidorresistentes apresentam características peculiares quanto às suas paredes celulares: a presença de ácido micólico. Elas não apresentam ácido teicoico, que é característico de bactérias Gram-positivas. Devido às propriedades hidrofóbicas do lipídeo ácido micólico, os corantes utilizados na técnica de Gram, como o cristal violeta, não conseguem penetrar as bactérias álcool-acidorresistentes. Só seria possível realizar a técnica de Gram com essas bactérias caso o ácido micólico fosse removido. Entretanto, as bactérias álcool-acidorresistentes podem ser coradas com o corante carbol-fucsina. Após a impregnação com esse corante, essas bactérias não são descoloradas pela adição de um álcool-ácido — daí a nomenclatura álcool-acidorresistentes. Resposta incorreta. B. O ácido teicoico é encontrado nas paredes celulares das bactérias álcool-acidorresistentes. As bactérias álcool-acidorresistentes apresentam características peculiares quanto às suas paredes celulares: a presença de ácido micólico. Elas não apresentam ácido teicoico, que é característico de bactérias Gram-positivas. Devido às propriedades hidrofóbicas do lipídeo ácido micólico, os corantes utilizados na técnica de Gram, como o cristal violeta, não conseguem penetrar as bactérias álcool-acidorresistentes. Só seria possível realizar a técnica de Gram com essas bactérias caso o ácido micólico fosse removido. Entretanto, as bactérias álcool-acidorresistentes podem ser coradas com o corante carbol-fucsina. Após a impregnação com esse corante, essas bactérias não são descoloradas pela adição de um álcool-ácido — daí a nomenclatura álcool-acidorresistentes. Resposta incorreta. C. O cristal violeta consegue penetrar facilmente a parede celular das bactérias álcool-acidorresistentes. As bactérias álcool-acidorresistentes apresentam características peculiares quanto às suas paredes celulares: a presença de ácido micólico. Elas não apresentam ácido teicoico, que é característico de bactérias Gram-positivas. Devido às propriedades hidrofóbicas do lipídeo ácido micólico, os corantes utilizados na técnica de Gram, como o cristal violeta, não conseguem penetrar as bactérias álcool-acidorresistentes. Só seria possível realizar a técnica de Gram com essas bactérias caso o ácido micólico fosse removido. Entretanto, as bactérias álcool-acidorresistentes podem ser coradas com o corante carbol-fucsina. Após a impregnação com esse corante, essas bactérias não são descoloradas pela adição de um álcool-ácido — daí a nomenclatura álcool-acidorresistentes. Resposta incorreta. D. As bactérias álcool-acidorresistentes impregnadas com o corante carbol-fucsina podem ser descoloradas pela adição de um álcool-ácido. As bactérias álcool-acidorresistentes apresentam características peculiares quanto às suas paredes celulares: a presença de ácido micólico. Elas não apresentam ácido teicoico, que é característico de bactérias Gram-positivas. Devido às propriedades hidrofóbicas do lipídeo ácido micólico, os corantes utilizados na técnica de Gram, como o cristal violeta, não conseguem penetrar as bactérias álcool-acidorresistentes. Só seria possível realizar a técnica de Gram com essas bactérias caso o ácido micólico fosse removido. Entretanto, as bactérias álcool-acidorresistentes podem ser coradas com o corante carbol-fucsina. Após a impregnação com esse corante, essas bactérias não são descoloradas pela adição de um álcool-ácido — daí a nomenclatura álcool-acidorresistentes. Resposta correta. E. O ácido micólico impede que as bactérias álcool-acidorresistentes sejam coradas pela coloração de Gram. As bactérias álcool-acidorresistentes apresentam características peculiares quanto às suas paredes celulares: a presença de ácido micólico. Elas não apresentam ácido teicoico, que é característico de bactérias Gram-positivas. Devido às propriedades hidrofóbicas do lipídeo ácido micólico, os corantes utilizados na técnica de Gram, como o cristal violeta, não conseguem penetrar as bactérias álcool-acidorresistentes. Só seria possível realizar a técnica de Gram com essas bactérias caso o ácido micólico fosse removido. Entretanto, as bactérias álcool-acidorresistentes podem ser coradas com o corante carbol-fucsina. Após a impregnação com esse corante, essas bactérias não são descoloradas pela adição de um álcool-ácido — daí a nomenclatura álcool-acidorresistentes. 4. A coloração de Ziehl-Neelsen é umas das técnicas laboratoriais mais utilizadas para a identificação de bacilos álcool-acidorresistentes (BAAR), como, por exemplo, a Mycobacterium tuberculosis, agente causador da tuberculose. Sobre a coloração de Ziehl-Neelsen, assinale a alternativa correta: Você não acertou! A. A coloração de Ziehl-Neelsen não é considerada uma técnica diferencial, uma vez que não é possível diferenciar gêneros bacterianos. A coloração de Ziehl-Neelsen é considerada uma técnica diferencial, já que cora somente as bactérias que contêm ácido micólico nas paredes celulares, ou seja, diferencia as bactérias álcool-acidorresistentes das não acidorresistentes. Essa coloração não é a ideal para diferenciar as bactérias Gram-positivas das Gram-negativas, já que essas bactérias coram-se de azul nessa técnica (deve-se diferenciá-las pela coloração de Gram). Após a descoloração com álcool-ácido, as bactérias álcool-acidorresistentes permanecem vermelhas, enquanto as bactérias não acidorresistentes tornam-se incolores nessa etapa,sendo necessário corá-las com um contracorante. A carbol-fucsina é o corante vermelho que cora as bactérias álcool-acidorresistentes de vermelho, enquanto o azul de metileno é um contracorante (coloração de contraste), que cora o fundo da lâmina e outros microrganismos não acidorresistentes de azul. Resposta incorreta. B. A carbol-fucsina funciona como contracorante (coloração de contraste) na coloração de Ziehl-Neelsen. A coloração de Ziehl-Neelsen é considerada uma técnica diferencial, já que cora somente as bactérias que contêm ácido micólico nas paredes celulares, ou seja, diferencia as bactérias álcool-acidorresistentes das não acidorresistentes. Essa coloração não é a ideal para diferenciar as bactérias Gram-positivas das Gram-negativas, já que essas bactérias coram-se de azul nessa técnica (deve-se diferenciá-las pela coloração de Gram). Após a descoloração com álcool-ácido, as bactérias álcool-acidorresistentes permanecem vermelhas, enquanto as bactérias não acidorresistentes tornam-se incolores nessa etapa,sendo necessário corá-las com um contracorante. A carbol-fucsina é o corante vermelho que cora as bactérias álcool-acidorresistentes de vermelho, enquanto o azul de metileno é um contracorante (coloração de contraste), que cora o fundo da lâmina e outros microrganismos não acidorresistentes de azul. Resposta correta. C. A coloração de Ziehl-Neelsen não é a ideal para diferenciar as bactérias Gram-positivas das Gram-negativas. A coloração de Ziehl-Neelsen é considerada uma técnica diferencial, já que cora somente as bactérias que contêm ácido micólico nas paredes celulares, ou seja, diferencia as bactérias álcool-acidorresistentes das não acidorresistentes. Essa coloração não é a ideal para diferenciar as bactérias Gram-positivas das Gram-negativas, já que essas bactérias coram-se de azul nessa técnica (deve-se diferenciá-las pela coloração de Gram). Após a descoloração com álcool-ácido, as bactérias álcool-acidorresistentes permanecem vermelhas, enquanto as bactérias não acidorresistentes tornam-se incolores nessa etapa,sendo necessário corá-las com umcontracorante. A carbol-fucsina é o corante vermelho que cora as bactérias álcool-acidorresistentes de vermelho, enquanto o azul de metileno é um contracorante (coloração de contraste), que cora o fundo da lâmina e outros microrganismos não acidorresistentes de azul. Resposta incorreta. D. Após a etapa de descoloração com álcool-ácido, as bactérias álcool-acidorresistentes tornam-se incolores, necessitando-se, então, corá-las com um contracorante. A coloração de Ziehl-Neelsen é considerada uma técnica diferencial, já que cora somente as bactérias que contêm ácido micólico nas paredes celulares, ou seja, diferencia as bactérias álcool-acidorresistentes das não acidorresistentes. Essa coloração não é a ideal para diferenciar as bactérias Gram-positivas das Gram-negativas, já que essas bactérias coram-se de azul nessa técnica (deve-se diferenciá-las pela coloração de Gram). Após a descoloração com álcool-ácido, as bactérias álcool-acidorresistentes permanecem vermelhas, enquanto as bactérias não acidorresistentes tornam-se incolores nessa etapa,sendo necessário corá-las com um contracorante. A carbol-fucsina é o corante vermelho que cora as bactérias álcool-acidorresistentes de vermelho, enquanto o azul de metileno é um contracorante (coloração de contraste), que cora o fundo da lâmina e outros microrganismos não acidorresistentes de azul. Resposta incorreta. E. Na coloração de Ziehl-Neelsen, utilizando-se carbol-fucsina e azul de metileno, as bactérias álcool-acidorresistentes coram-se de azul, enquanto outros microrganismos não acidorresistentes coram-se de vermelho. A coloração de Ziehl-Neelsen é considerada uma técnica diferencial, já que cora somente as bactérias que contêm ácido micólico nas paredes celulares, ou seja, diferencia as bactérias álcool-acidorresistentes das não acidorresistentes. Essa coloração não é a ideal para diferenciar as bactérias Gram-positivas das Gram-negativas, já que essas bactérias coram-se de azul nessa técnica (deve-se diferenciá-las pela coloração de Gram). Após a descoloração com álcool-ácido, as bactérias álcool-acidorresistentes permanecem vermelhas, enquanto as bactérias não acidorresistentes tornam-se incolores nessa etapa,sendo necessário corá-las com um contracorante. A carbol-fucsina é o corante vermelho que cora as bactérias álcool-acidorresistentes de vermelho, enquanto o azul de metileno é um contracorante (coloração de contraste), que cora o fundo da lâmina e outros microrganismos não acidorresistentes de azul. 5. Existem diferentes protocolos de coloração de bactérias utilizados na bacteriologia clínica, sendo alguns indicados para situações específicas, em que a coloração de Gram não é indicada. A respeito das técnicas de coloração utilizadas para visualização de bactérias em microscópio óptico, assinale a alternativa correta: Resposta incorreta. A. A coloração negativa, em que se utiliza a tinta da Índia ou nigrosina, é indicada para se detectar a presença de flagelos. Os flagelos são muitos finos para serem visualizados no microscópio óptico; é necessário aplicar uma técnica de coloração especial, em que um mordente é utilizado para aumentar seu diâmetro e o corante carbol-fucsina é utilizado para corá-los. A coloração negativa, em que se utiliza a tinta da Índia ou nigrosina, é indicada para se detectar a presença de cápsulas. Nessa técnica, o corante não penetra na cápsula (permanece incolor), mas colore de preto o restante do material. A coloração de Schaeffer-Fulton é utilizada para detectar a presença de endósporo na bactéria. Já as técnicas de Ziehl-Neelsen eKinyoun são utilizadas para diferenciar bactérias álcool-acidorresistentes das não álcool-acidorresistentes. Resposta incorreta. B. A coloração de Kinyoun é utilizada para detectar a presença de endósporo na bactéria. Os flagelos são muitos finos para serem visualizados no microscópio óptico; é necessário aplicar uma técnica de coloração especial, em que um mordente é utilizado para aumentar seu diâmetro e o corante carbol-fucsina é utilizado para corá-los. A coloração negativa, em que se utiliza a tinta da Índia ou nigrosina, é indicada para se detectar a presença de cápsulas. Nessa técnica, o corante não penetra na cápsula (permanece incolor), mas colore de preto o restante do material. A coloração de Schaeffer-Fulton é utilizada para detectar a presença de endósporo na bactéria. Já as técnicas de Ziehl-Neelsen eKinyoun são utilizadas para diferenciar bactérias álcool-acidorresistentes das não álcool-acidorresistentes. Resposta incorreta. C. A técnica de Ziehl-Neelsen é utilizada para detectar a presença de cápsula bacteriana. Os flagelos são muitos finos para serem visualizados no microscópio óptico; é necessário aplicar uma técnica de coloração especial, em que um mordente é utilizado para aumentar seu diâmetro e o corante carbol-fucsina é utilizado para corá-los. A coloração negativa, em que se utiliza a tinta da Índia ou nigrosina, é indicada para se detectar a presença de cápsulas. Nessa técnica, o corante não penetra na cápsula (permanece incolor), mas colore de preto o restante do material. A coloração de Schaeffer-Fulton é utilizada para detectar a presença de endósporo na bactéria. Já as técnicas de Ziehl-Neelsen eKinyoun são utilizadas para diferenciar bactérias álcool-acidorresistentes das não álcool-acidorresistentes. Resposta correta. D. Para se visualizar a presença dos flagelos, pode-se aplicar uma técnica especial em que se utiliza um mordente e o corante carbol-fucsina. Os flagelos são muitos finos para serem visualizados no microscópio óptico; é necessário aplicar uma técnica de coloração especial, em que um mordente é utilizado para aumentar seu diâmetro e o corante carbol-fucsina é utilizado para corá-los. A coloração negativa, em que se utiliza a tinta da Índia ou nigrosina, é indicada para se detectar a presença de cápsulas. Nessa técnica, o corante não penetra na cápsula (permanece incolor), mas colore de preto o restante do material. A coloração de Schaeffer-Fulton é utilizada para detectar a presença de endósporo na bactéria. Já as técnicas de Ziehl-Neelsen eKinyoun são utilizadas para diferenciar bactérias álcool-acidorresistentes das não álcool-acidorresistentes. Você não acertou! E. A coloração de Schaeffer-Fulton é utilizada para diferenciar bactérias álcool-acidorresistentes das não álcool-acidorresistentes. Os flagelos são muitos finos para serem visualizados no microscópio óptico; é necessário aplicar uma técnica de coloração especial, em que um mordente é utilizado para aumentar seu diâmetro e o corante carbol-fucsina é utilizado para corá-los. A coloração negativa, em que se utiliza a tinta da Índia ou nigrosina, é indicada para se detectar a presença de cápsulas. Nessa técnica, o corante não penetra na cápsula (permanece incolor), mas colore de preto o restante do material. A coloração de Schaeffer-Fulton é utilizada para detectar a presença de endósporo na bactéria. Já as técnicas de Ziehl-Neelsen eKinyoun são utilizadas para diferenciar bactérias álcool-acidorresistentes das não álcool-acidorresistentes.
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