exercicio microbiologia basica

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Estudo dirigido – Microbiologia Clínica
1. Descreva a teoria da biogênese de Pasteur.
A lei da biogênese, atribuída a Louis Pasteur, é resultante da observação de que seres vivos provêm apenas de
outros seres vivos, através da reprodução. Ou seja, que seres vivos não se formam diretamente a partir de
materiais não vivos em forma como proposta na geração espontânea.
2. Descreva o postulado de Koch.
Para que um microrganismo possa ser considerado responsável por uma doença deve: 1 ser encontrado em todos
os casos da doença; 2 ser cultivado em cultura pura; 3 provocar a doença quando inoculado num animal de
experiência; 4 poder ser isolado desses animais é cultivado em cultura pura.
Os postulados demonstram a relação causal entre um agente e uma doença. O método é dividido em 4 etapas: o
reconhecimento da doença e do agente causador, o isolamento e crescimento do⁷ patógeno em meio de cultura,
a inserção dele em plantas sadias e o isolamento para verificar se as características continuam as mesmas.
3. Quais os principais tipos de microscopia e seus princípios?
Óptico: Visualizar células intactas
A microscopia eletrônica de varredura (SEM) funciona com uma varredura de feixes de elétrons em uma
superfície preparada para receber esses feixes. Essa superfície é varrida por esses elétrons resultando em
incríveis imagens tridimensionais.
A microscopia eletrônica de transmissão (TEM) é usada para visualizar espécimes finos (seções de tecidos, seções
de células, etc.) através dos quais os elétrons podem passar gerando uma imagem de projeção.
4. Descreva as principais estruturas da célula eucariótica e suas funções.
Células eucariontes possuem um núcleo definido, delimitado pelo envelope nuclear. Células apresentam
membrana plasmática, citoplasma e material genético, o qual pode estar ou não no núcleo. A membrana
plasmática da célula é responsável por controlar o que entra e o que sai, funcionando como uma barreira
seletiva.
5. Descreva as principais estruturas da célula procarionte e suas funções.
Membrana plasmática: controla a troca de substâncias da célula com o meio externo; parede celular: confere
forma à célula; Pilus: possibilita a fixação da bactéria ao meio; Ribossomo: estrutura responsável pela produção
de proteínas.
6. Disserte sobre a morfologia e aspectos macroscópicos das colônias bacterianas e sua importância.
7. Qual a importância do isolamento bacteriano? Quais as técnicas empregadas no isolamento
bacteriano e como são realizadas?
A aplicação dos meios de cultura em um estudo, auxilia na identificação dos microrganismos que podem
provocar infecções, alergias e, até mesmo, a contaminação da água ou alimentos. Por isso, a aplicação desse
estudo se faz tão necessária.
As técnicas de semeadura são o método pelo qual se transfere inóculos bacterianos de um meio de cultura ou
material a ser analisado (secreções, alimentos) para um outro meio de cultura. Para garantir que apenas o
microrganismo desejado seja semeado, são utilizadas as técnicas assépticas: procedimentos que devem ser
adotados visando a não contaminação de materiais, meios e culturas.
Semeaduras em meios sólidos em tubos
Estria sinuosa: semear com alça ou agulha bacteriológica, em zig-zag, partindo da base para a extremidade do
bisel (superfície inclinada do meio).
Objetivo: obtenção de intensa massa de microorganismos.
Estria Reta: semear com agulha bacteriológica, fazendo uma linha reta, com cuidado de não ferir o Agar, partindo
da base para a extremidade do bisel (superfície inclinada do meio).
Objetivo: obtenção de pequena massa de microorganismos.
Picada Central: semear com agulha bacteriológica, no centro do Ágar. Dependendo da finalidade, o inóculo deve
penetrar até 2/3 do tubo ou até o fundo deste.
Objetivo: é utilizado para verificar fermentação e motilidade em algumas técnicas.
Picada em profundidade: semear com agulha bacteriológica, no centro do Ágar. Dependendo da finalidade, o
inóculo deve penetrar até 2/3 do tubo ou até o fundo deste.
Objetivo: é utilizado para verificar fermentação e motilidade em algumas técnicas.
Semeaduras em meios sólidos em placas de Petri
Pour-plate ou disseminação (método em profundidade): Transferir 1 ml da cultura para placa de Petri vazia,
colocar 10 – 20 ml do meio fundido (e resfriado a cerca de 45 – 50°C) sobre a cultura e homogeneizar suavemente
com movimentos circulares. VÍDEO
Objetivo: contagem bacteriana. É utilizado também para análise de microorganismos anaeróbios, adicionando
uma outra camada de meio fundido após o endurecimento da primeira camada.
Estria simples: transferir uma alçada da cultura para meio sólido em placa e estriar com a alça bacteriológica
sobre o meio. A estria pode ser realizada em movimento de zig- zag (estria sinuosa) ou como uma linha reta sobre
o meio (estria reta).
Objetivo: Essa técnica é muito utilizada para visualização de determinadas propriedades metabólicas, como a
produção de enzimas hidrolíticas (hidrólise de substâncias do meio - gema de ovo, sangue...), e produção de
pigmentos.
Esgotamento em estrias ou estrias múltiplas: transferir uma alçada da cultura para meio sólido em placa e estriar
com a alça bacteriológica sobre o meio. A placa é dividida em 4 quadrantes e a inoculação pode ser feita de 2
tipos:
• 3 estrias: estriar em metade da placa, com movimentos de zig-zag. Quando atingir a metade, girar a placa 90° e
estriar até a metade (1/4 da placa), girar mais 90° e estriar o meio restante.
• 4 estrias: estriar até 2/3 da metade da placa, girar 90°, estriar 2/3 do próximo quadrante (1/4 da placa), girar 90°,
estriar mais 2/3 do próximo quadrante (1/4 da placa), girar 90° e estriar o restante do meio.
Objetivo: obtenção de colônias isoladas. É importante não cruzar as estrias (não tocar a alça na estria anterior),
para reduzir o inóculo a cada estria e obter as colônias isoladas. Pode-se, alternativamente, flambar a alça entre
as estrias e tocar a ponta da estria anterior, arrastando um pequeno inóculo para a próxima estria.
Spread-plate ou distensão: Transferir 0,1 ml da cultura para o meio sólido na placa e espalhar uniformemente
com a própria ponta da pipeta, ou alça bacteriológica / swab / alça Drigalski.
Objetivo: obtenção de crescimento confluente, ou para contagem bacteriana. Esta técnica é muito utilizada na
realização de antibiogramas.
Semeaduras em meios líquidos
Difusão: uma alçada da colônia (Ágar em placa) ou da cultura (de outro meio ou líquido) é introduzida no meio
líquido, com agitação da alça, para maior difusão dos microorganismos (da alça para o meio e homogeneização
no meio). Pode-se inclinar o tubo a 30° e esfregar o inóculo na parede do mesmo, quando o tubo retornar à
posição original o inóculo se difundirá no meio. Objetivo: é um repique genérico para crescimento bacteriano em
meio líquido.
8. Descreva a morfologia das células bacterianas.
As bactérias normalmente possuem os diferentes tipos de morfologia, abaixo descritos: Coccus (coco),
Coccobacillus (cocobacilos), Vibrio (Vibrião), Bacillus (bacilos), Spirochete (espiroqueta), Spirillum (Espirilo) Cocos
podem ser redondos, ou ovais, ou ter sua extremidade alongada ou achatada.
9. Descreva os arranjos das células bacterianas.
Quando as bactérias em forma de cocos se dividem, as bactérias podem permanecer unidas umas às outras,
surgindo: Cocos aos pares: Diplococcus (diplococos) Forma de Cadeias: Streptococcus (estreptococos) Forma de
Cachos: Staphylococcus (estafilococos). Menos comuns são aqueles cocos que se dividem em 2 ou 3 planos e
permanecem unidos em grupos cúbicos de 8 indivíduos (sarcina). Bacilos, geralmente só se dividem no plano do
seu menor eixo de tal forma que são poucos os arranjos ou agrupamentos. Muito raros, Diplobacillus
(diplobacilos) (pares) e Streptobacillus (estreptobacilos) (em cadeias). Bactérias espiraladas podem ter 1 ou mais
espirais. Quando tem o corpo rígido e são como vírgulas (vibriões). Espirilos (forma de saca-rolhas) e os
espiralados de corpo flexível (espiroquetas).
10. Em geral, como o material genético das bactériasse apresenta?
A célula bacteriana é procariótica, ou seja, o material genético fica disperso no citoplasma e é constituído de
uma molécula circular de DNA, chamada nucleóide. Além do nucleóide, pode haver também moléculas adicionais
de DNA circular, os plasmídeos.
11. Descreva os plasmídeos bacterianos e sua importância.
• DNA circular extracromossomal • Fita dupla e Pequeno • Replicação independente do nucleóide • Número
variável
https://www.youtube.com/watch?v=bCI-O9vCmHM
• Contêm genes que conferem propriedades especiais às células: • Metabolismo e fatores de virulência •
Resistência a antimicrobianos • Proteínas efetoras • Síntese de nutrientes • Não é essencial à vida bacteriana,
mas confere vantagens • Biotecnologia
12. Descreva o ribossomo bacteriano e compare com o ribossomo eucariótico.
Os ribossomos de procariontes e os de eucariontes são responsáveis pela síntese de proteínas e apresentam-se
bastante semelhantes. Entretanto, algumas diferenças podem ser observadas entre eles.
A primeira diferença diz respeito ao tamanho. Os ribossomos de eucariontes são maiores do que aqueles
observados em organismos procariontes. A composição química dessas estruturas celulares também é diferente,
apresentando, por exemplo, proteínas diferentes.
Essa diferença possui importância médica, uma vez que certos medicamentos são capazes de afetar os
ribossomos de procariontes e de não afetarem os ribossomos das células eucariontes, sendo, portanto,
importantes para o tratamento de doenças bacterianas.
13. Descreva as inclusões citoplasmáticas bacterianas.
Algumas bactérias podem ter em seus citoplasmas inclusões que atuam como reserva de algum nutriente ou
apresentam funções especiais. As inclusões citoplasmáticas são diversas substâncias intracelulares acumuladas
no citoplasma que não realizam nenhuma atividade metabólica e não estão unidas a membranas. As inclusões
são constituídas por nutrientes armazenados, produtos de secreção e grânulos de pigmentos.
14. Descreva a parede celular de bactérias Gram negativas e como se apresentam na coloração de
Gram.
As bactérias gram negativas apresentam uma camada fina de peptideoglicano, um periplasma e uma membrana
externa contendo LPS. O LPS é extremamente imunogênico e é considerado uma endotoxina que pode causar
choque ao paciente, pode ser utilizado para identificar gram negativas em laboratório.
15. Descreva a parede celular de bactérias Gram positivas e como se apresentam na coloração de
Gram.
As bactérias gram positivas apresentam uma camada delgada de peptidoglicano e a presença e a presença de
ácidos teicóicos e lipoteicóicos. Os ácidos teicóicos e lipoteicóicos regulam o movimento de cátions para dentro
e para fora da célula, ajudam a regular a divisão celular e fornecem boa parte da especificidade antigênica da
parede, o que permite a identificação de bactérias.
16. Descreva a parede celular de bacilos álcool-ácido resistentes e como se apresentam na coloração
de Ziehl-Neelsen.
Paredes celulares com alto teor de lipídeos (cerca de 60%, principalmente de Ácido micólico), que quando
tratadas pelo corante Fucsina fenicada, coram-se de vermelho e persistem ao descoramento subsequente por
uma solução de Álcool-ácido forte (diferenciador). É por isto que são conhecidas por Bacilos Álcool-Ácido
Resistentes (BAAR). As outras bactérias, que não possuem tais paredes celulares ricas em lipídios, têm a sua
coloração pela Fuscina descorada pela solução de Álcool-ácido e coram-se em azul pela coloração de fundo do
Azul de metileno (contra corante).
17. Como é a estrutura do peptidoglicano. Como as unidades de NAG e NAM são ligadas entre si e
como as camadas de peptidoglicano são ligadas entre si nos Gram positivos e nos Gram negativos.
O peptidoglicano é um heteropolímero formado por cadeias lineares de resíduos de açúcares
chamados glicanos e por curtos peptídeos que constituem ligações cruzadas entre as cadeias
polissacarídicas.
O peptidoglicano corresponde a um esqueleto, formado por dois derivados de açúcares, a
N-acetilglicosamina (NAG) e o ácido N- acetilmurâmico (NAM), unidos alternadamente, através de
ligações do tipo ß-1,4 (O dissacarídeo NAG-NAM é ligado à cadeia de peptidoglicano, por ligação
pirofosfato, este tipo de ligação permite obter energia para a acção das enzimas transglicosilases).
As Gram positivas possuem ácidos teicóicos e muitas camadas de peptideoglicano, enquanto as Gram
negativas não possuem ácidos teicóicos, possuem uma ou poucas camadas de peptideoglicano, além
de possuírem a camada de lipopolissacarídeo (LPS) e o periplasma.
18. Que enzimas são responsáveis pela ligação entre as camadas de peptideoglicano e qual antibiótico
é capaz de inibir essas enzimas.
Os antibióticos beta-lactâmicos incluem penicilinas (ex. ampicilina), cefalosporinas e monobactamas.
Eles se ligam e inibem enzimas (proteínas ligadoras de penicilina) envolvidas na transpeptidação
(ligação-cruzada) do peptidoglicano. Esses antibióticos têm em comum o anel lactâmico de quatro
membros. Ligados ao anel lactâmico, as penicilinas têm um anel adicional de cinco membros e
https://mundoeducacao.uol.com.br/doencas/doencas-por-bacterias.htm
cefalosporinas um anel de seis membros. Monobactamas consistem em um anel lactâmico sozinho e
exibe atividade antibiótica.
19. Descreva o LPS e sua importância.
As endotoxinas, conhecidas como lipopolissacarídeos (LPS), são componentes da membrana externa
das bactérias gram-negativas. LPS são um padrão molecular associado a patógenos (PAMP), que
servem como marcadores para o sistema imunológico reconhecer invasores bacterianos.
Os LPS são constituídos por um lipídio (gordura), que ancora a estrutura à parede celular, e um
oligossacarídeo (açúcar), que se estende desde a superfície bacteriana. A porção lipídica, conhecida
como lipídeo A, é a principal estrutura reconhecida pelo sistema imunológico. Especificamente, o
lipídeo A é reconhecido por um complexo de duas proteínas do sistema imunológico: Receptor tipo Toll
4 (TLR4) e MD-2. Quando ativado, este complexo desencadeia uma cascata imunológica para
combater o patógeno.
20. Como é realizada a sorotipagem bacteriana e quais estruturas são identificadas?
21. Descreva a cápsula bacteriana e sua importância.
A cápsula bacteriana é considerada um fator de virulência pois aumenta a habilidade de uma
bactéria causar doença. A cápsula protege a célula bacteriana contra a fagocitose por células
eucarióticas como os macrófagos. Um anticorpo específico para a cápsula pode ser necessário para
que a fagocitose ocorra.
22. O que são flagelos e fímbrias e qual a sua importância na bactéria?
O flagelo é responsável pela mobilidade da bactéria. Fímbrias : As fímbrias ou pili são estruturas
curtas e finas que muitas bactérias gram-negativas apresentam em sua superfície, não estão
relacionadas com a mobilidade e sim com a capacidade de adesão.
23. No que consistem os esporos bacterianos, em que situação são gerados e quais bactérias podem
gerar esporos?
Os esporos bacterianos ou endósporos atuam como estruturas de sobrevivência quando a bactéria
encontra-se em condições ambientais desfavoráveis. Eles são produzidos pela própria bactéria e
encontram-se livremente em seu interior. Inclusive, a posição do endósporo é usada como forma de
identificação das espécies.
A produção de esporos é particularmente comum entre as bactérias Bacillus e Clostridium, várias
espécies causadoras de doenças. Muitos esporos bacterianos são altamente duráveis e podem
germinar mesmo após anos de dormência.
24. Uma diluição seriada que encontrou 325, 365 e 378 x 103 colônias crescidas em placas apresenta
quantas unidades formadoras de colônia por ml.
25. Descreva a coloração Gram, seus pontos críticos e possíveis erros.
OBJETIVO: Classificar bactérias com base no tamanho, morfologia celular, agrupamento das células e
comportamento diante dos corantes. É um teste adicional e rápido para o diagnóstico de agentes
infecciosos, sendo também utilizado para avaliar a qualidade da amostra clínica analisada.
possíveis erros:
1. Precipitaçãodo corante simula cocos Gram-positivos;
2. Uso de lâminas que não tenham sido pré-limpas e desengorduradas;
3. Espessura do esfregaço pode interferir na coloração (cora irregularmente);
4. Superaquecimento na fixação do esfregaço (destrói morfologia bacteriana);
5. Descorar insuficientemente com álcool-acetona (Retenção do cristal-violeta);
6. Culturas velhas ou com numerosas bactérias mortas ou expostas à ação de antibióticos
apresentam irregularidades na coloração (bactérias Gram-positivas perdem a capacidade de reter o
cristal-violeta, apresentando-se Gram-negativas e, as bactérias Gram-negativas podem se corar mais
fracamente pela safranina/fucsina, podendo simular a ocorrência de infecções mistas:
Gram-positivas/Gram-negativas).
26. Descreva os reagentes presentes na coloração de Gram.
https://www.wakopyrostar.com/blog-pt/post/envolvimento-dos-lipopolissacarideos-no-progresso-da-nefropatia-diabetica/
-CRISTAL VIOLETA corante que fica impregnado no envoltório bacteriano. É o corante primário.
-IODO é o mordente. Forma um complexo insolúvel com o cristal violeta.
-ÁLCOL-ACETONA (ETAPA CRÍTICA) retira a camada externa das Gram negativas, retirando o corante
primário e desidrata a parede celular das Gram positivas.
-FUCSINA BÁSICA contra-corante. Cora as Gram negativas.
27. Descreva a coloração de Ziehl-Neelsen, seus pontos críticos e possíveis erros.
A técnica de Ziehl-Neelsen evidencia esta ácido-álcool resistência. Segue o seguinte protocolo:
Confeccionar o esfregaço seguindo as técnicas atuais de biossegurança;
Cobrir a lâmina com fucsina fenicada (o mordente é o ácido fénico);
Aquecer a lâmina até à emissão de vapores (é importante não deixar ferver);
Aguardar 5 a 8 minutos;
Lavar com água corrente;
Cobrir a lâmina com álcool-ácido 3% até descorar totalmente o esfregaço;
Lavar com água corrente;
Cobrir a lâmina com azul de metileno durante 1 minuto;
A fucsina fenicada, atuando a quente, vai corar todas as células bacterianas e outras estruturas
presentes no esfregaço de vermelho (o calor vai derreter os lípidos de membrana, tornando-a
permeável). O ⁹ácido diluído em álcool aplicados vão descorar todas as bactérias exceto as
ácido-álcool resistentes, que permanecem coradas de vermelho pela fucsina. Assim, ao serem
observadas após coloração e contraste, com azul de metileno, encontraremos as bactérias:
Ácido-álcool resistentes: coradas de vermelho.
Não ácido-álcool resistentes: coradas de azul.
28. Descreva os reagentes presentes na coloração de Ziehl-Neelsen.
Corante primário: fucsina fenicada (carbolfucsina); Descolorante: álcool-ácido 3% (v/v); Contra-corante:
azul de metileno ou verde malaquita.
29. Descreva a coloração de tinta da China e qual situação utilizar.
Aplica-se tinta nanquim na cultura em uma lâmina e cobre-se com lâmina, visualizar em aumento de
40X. A tinta da China não penetra nas cápsulas bacterianas e fúngicas, permitindo a visualização do
halo branco sobre um fundo preto. Alternativamente pode-se aplicar a fucsina em um segundo passo
que irá corar a cápsula em rosa.
30. Quando utilizamos a coloração com lactofenol azul-algodão.
Serve para a coloração de fungos filamentosos principalmente as estruturas reprodutivas permitindo
sua identificação. Pode ser utilizado azul de metileno como opção.
31. Quais as necessidades nutricionais bacterianas?
Fonte de Carbono
orgânico: oxidação e geração de energia.
inorgânico: redução de gasto de energia.
heterotróficos: muitas vezes é a fonte de
energia (glicose)
autotróficos: necessita fonte de energia
alternativa ( CO2 )
Fonte de Nitrogênio
orgânico: aminoácidos e peptídeos.
inorgânico: NO3-; No2-; NH4+;
Fixação de nitrogênio atmosférico: N2
Fonte de Enxofre
inorgânico: H2S; SO4-; etc;
orgânico: aminoácidos, coenzimas.
S-Aminoácidos: cisteína e metionina;
coenzimas.
Fonte de Fósforo
inorgânico: PO2. orgânico: fosfolipídeos e
ácidos nucleicos.
Fonte de Hidrogênio e Oxigênio
Em geral vem em conjunto com a fonte de
carbono.
Fonte de Microelementos Necessário em menor
quantidade.
Ferro, Sódio, etc.
https://pt.wikipedia.org/wiki/Biosseguran%C3%A7a
https://pt.wikipedia.org/wiki/Carbolfucsina
https://pt.wikipedia.org/wiki/Fenol
https://pt.wikipedia.org/w/index.php?title=%C3%81lcool-%C3%A1cido&action=edit&redlink=1
https://pt.wikipedia.org/wiki/Azul_de_metileno
https://pt.wikipedia.org/wiki/Membrana
32. Como as bactérias são classificadas de acordo com a temperatura de crescimento?
- psicrófilas: entre 12 e 17º C
- mesófilas: entre 28 e 37ºC
- termófilas: 57 e 87ºC
33. Como as bactérias são classificadas de acordo com a concentração de oxigênio necessária para
crescer?
- aeróbias obrigatórias
- anaeróbicas facultativas
- anaeróbicas obrigatórias
- anaeróbios aerotolerantes
- microaerófilos
34. Como cultivar organismos anaeróbios?
Alguns anaeróbios podem ser avaliados em meio contendo tioglicolato. Algumas bactérias pedem
concentrações menores de oxigênio ou aumento da atmosfera de CO2, para isso podemos colocar
uma vela na jarra e criar o ambiente para crescimento delas.
35. Descreva os pontos de uma curva de crescimento bacteriano.
Quando falamos em taxa de crescimento bacteriana falamos em crescimento da população como um
conjunto e não de cada célula bacteriana individual. É claro que para se dividir uma célula precisa
crescer e fazer cópia de todas as estruturas que a compõem, contudo, no laboratório o que
analisamos e observamos é o comportamento populacional.
LAG- Ocorre quando colocamos a bactéria em um ambiente novo.
-> Fase de adaptação.
-> O tempo pode ser breve ou longo.
Exponencial- As bactérias se dividem em intervalos regulares de tempo.
-> São influenciadas pelas condições químicas e físicas do meio.
-> O tempo depende de fatores genéticos e fisiológicos dos microrganismos (taxa de crescimento
específica).
Estacionária- A taxa de morte e crescimento se igualam e não vemos mais um aumento da população
bacteriana.
Morte ou Declínio- A morte das células bacterianas.
-> A população bacteriana diminui gradativamente.
36. Defina meio complexo e meio sintético.
Um meio quimicamente definido (sintético) é aquele no qual todos os constituintes são conhecidos.
Um meio complexo é aquele no qual a exata constituição não é conhecida e podem conter extratos
moídos ou digeridos de animais, peixes, leveduras e vegetais, que fornecem os nutrientes, as vitaminas
e os minerais necessários.
37. Descreva os meios seletivos e sua função.
São aqueles cujas características impedem o crescimento de certos microrganismos, permitindo
apenas o crescimento de outros.
ex: Ágar MacConkey (gram - e +); Ágar Cetrime ( enterobactérias - e Pseudomonas aeruginosas +).
38. Descreva os meios diferenciais e sua função.
São aqueles que conferem características especiais às colônias que, em condições normais, seriam
idênticas.
ex: Ágar Sangue: Alfa-hemólise: Lise total das hemácias, halo transparente em torno da colônia.
Beta-hemólise: Lise parcial das hemácias, halo verde em torno da colônia. Gama-hemólise: Sem lise
das hemácias;
Ágar Sal Manitol (Staphylococcus aureus cresce na alta concentração de sal do meio e libera ácidos
que alteram o indicador de pH. Outras bactérias como o Staphylococcus saprophyticus não liberam
ácido e o meio permanece na cor original).
39. O que são biofilmes e qual sua importância?
É o crescimento de microrganismos em uma superfície sólida, podendo ser benéficos ou nocivos. Em
geral são polimicrobianos, mas podem ser formados por um tipo de microrganismo, e podem conferir
um ambiente de colaboração e atuar na resistência a antibióticos. A formação de biofilmes pode ser
controlada por quorum sensing.
40. O que é quorum sensing?
Consiste na produção de moléculas auto-indutoras que modulam o comportamento populacional.
41. Que métodos podemos utilizar para controlar o crescimento bacteriano?
Conservar instrumentos e prevenir a disseminação de microrganismos patogênicos.
-> Esterilização; Desinfecção; Antissepsia; Assepsia; Degerminação; Microbicida; Microbiostático.
Agentes Físicos: Temperatura; Radiação; Filtração; Dessecação; Microondas;Osmolaridade; Vácuo;
Pressão de Oxigênio.
Agentes Químicos: Os agentes químicos agem alterando a permeabilidade da membrana,
desnaturando proteínas, inibindo o metabolismo dos microrganismos, causando oxidação de
moléculas ou inibindo a síntese de ácidos nucleicos.
-> Álcoois; Fenóis e derivados; Aldeídos e derivados; Iodo e Cloro; Clorexidina e Periogard; Sabões e
detergentes; Conservantes alimentícios; Esterilizantes gasosos; Metais pesados.
42. Descreva o processo de transformação bacteriana.
A bactéria capta DNA externo e recombina com seu cromossomo. Alguns gêneros apresentam
competência natural, ou seja, podem captar DNA do ambiente naturalmente, outras não têm essa
capacidade e precisam passar por competência induzida no laboratório.
43. Descreva o processo de transdução.
Na transdução bacteriana ocorre troca de material genético entre bactérias com a participação de um
bacteriófago. A conjugação bacteriana, assim como ocorre na transformação e na transdução, é a passagem de
DNA de uma célula doadora para uma receptora.
44. Descreva o processo de conjugação bacteriana.
As bactérias trocam material genético através do pilus sexual.
45. O que são fagos. Explique ciclo lítico e ciclo lisogênico.
são vírus que infectam bactérias.
> Alguns fagos levam genes ligados a fatores de
virulência.
01- o fago se liga à célula hospedeira e injeta DNA.
02- o DNA do fago circulariza e entra no ciclo lítico.
03- novo DNA e proteínas do fago são sintetizados e
montados em vírions.
04- lise celular, liberando vírions de fagos.
05- o DNA do fago circulariza e entra no ciclo
lisogênico.
06- o DNA do fago se integra ao cromossomo
bacteriano.
07- bactéria lisogênica se reproduz normalmente.
08- ocasionalmente, o profago é removido do
cromossomo bacteriano e entra no ciclo lítico.
>> No processo de transdução, os fagos levam
material genético de uma bactéria para outra.
> Fragmentos de DNA bacteriano entram no fago no
momento da montagem viral, este fago leva o gene
bacteriano para a próxima bactéria que ele irá
infectar.
46. Diferencie virulência e patogenicidade.
Patogenicidade - Propriedade de um microrganismo de provocar alterações fisiológicas no
hospedeiro, ou seja, capacidade de produzir doenças.
Virulência - Grau de patogenicidades, determinada pelo fator de virulência expresso pelos
microorganismos.
47. Descreva os mecanismos de entrada dos microrganismos.
ingestão; inalação; trauma; perfuração; picadas de artrópodes; transmissão sexual.
48. Qual a relação entre os microrganismos e o hospedeiro durante as doenças?
Nosso organismo supre diversas das necessidades bacterianas > calor > umidade > nutrientes >
proteção contra o ambiente extremo.
A doença bacteriana é resultado da relação entre a bactéria e o organismo do paciente:
Hospedeiro- local da infecção; resposta imune do hospedeiro; estado nutricional; uso de
medicamentos; doenças de base.
Bactéria- tamanho do inóculo; fatores de virulência; oportunismo; ilhas de patogenicidade.
49. Explique o processo de colonização e disseminação de bactérias.
Colonização -> Bactérias diferentes podem colonizar sítios diferentes; defeitos em mecanismos de
defesa do hospedeiro permitem a colonização de sítios estéreis; requer presença de estruturas
espaciais na bactéria.
Para colonizar determinados sítios as bactérias precisam se aderir ao tecido local:
Adesão -> Fímbrias; Adesinas; Pili; Biofilme.
O ciclo de vida biofilme: 01- depósito de bactérias. 02- microcolonia. 03- maturação. 04- dispersão.
50. Diferencia exotoxina e endotoxina. Dê exemplos.
Endotoxinas -> produzidas por gram negativas. >consiste no LPS-Lipídeo a ativa proteínas de fase
aguda e moléculas inflamatórias. >em bactérias gram positivas os ácidos lipoteóicos e teicóicos
podem ativar respostas imunes fracas.
Exotoxinas -> produzidas por gram positivas e gram negativas. >são proteínas secretadas que alteram
a função celular ou destroem a célula. >podem estar codificados no cromossomo, plasmídeos ou
fagos. >apresentam diversos mecanismos de ação, toxinas diferentes agem de modo diferente e em
células diferentes.
51. Descreva as principais classes de antibióticos e seus mecanismos de ação.
Quinolonas: Agem na DNA Topoisomerase.
Actinomicina: Inibe a tradução do RNA (proteínas menores).
Rifampin e Streptovaricins: Não deixa a RNA Polimerase se ligar ao DNA.
Inibidores Síntese Proteica: Se ligam as subunidades ribossomais ( 30s ou 50s ).
Mupirocin e Puromycin: Não permite que o aminoácido se ligue ao RNAt.
Polymyxins e Daptomycin: Entra no meio das membranas destruindo-as.
Trimethoprim e Sulfonamides: Ácido Fólico > inibem THF e DHF > impede a produção de RNA e DNA.
Inibidores de Síntese de Membrana: Beta Lactâmicos ( anel que bloqueia a enzima PBP ) > Enzima PBP
é responsável pela ligação de peptideoglicanos > impede que a enzima passe aminoácidos para outra
enzima. > Cycloserine, Vancomycin, Bacitracin e Penicillins.
52. No que consiste a seleção natural e como ela atua na resistência bacteriana aos antibióticos.
Mutações genéticas aleatórias e consequente seleção natural (genes de resistência que fazem parte
de unidades de DNA chamadas de transposons).
53. Como as bactérias trocam genes de resistência entre si?
Os mecanismos responsáveis pela transferência de genes entre bactérias referentes à mesma geração são a
transdução, transformação e conjugação, e os principais elementos genéticos envolvidos são os plasmídeos,
integrons e transposons.
54. Quais os principais mecanismos de resistência bacteriana aos antibióticos:
Bombas de efluxo : Expulsam os antibióticos.
Alterações do sítio alvo : Alterações estruturais.
Perda de Porinas : Número, tamanho e seletividade.
Enzimas: Enzimas contra antibióticos.
Outros: Biofilme, cápsula, alvos alternativos, hiperprodução de alvos.
55. Descreva a ação das beta lactamases no processo de resistência bacteriana.
O que são β Lactamases e qual sua relação com a resistência bacteriana?
As β-lactamases hidrolisam a ligação amida do anel beta-lactâmico, destruindo, assim, o local onde
os antimicrobianos β-lactâmicos ligam-se às PBPs bacterianas e através do qual exercem seu efeito
antibacteriano.
56. Como funcionam as bombas de efluxo?
Antibióticos entram na célula bacteriana mas são expulsos para fora > níveis efetivos de inibição
nunca são obtidos > responsável por alguns perfis de resistência intrínseca.
57. Descreva o processo de alteração em porinas e quais bactérias apresentam esse mecanismo de
resistência.
Alterações em porinas impedem que os medicamentos entrem na célula > As alterações nas porinas
incluem diminuição do poro > Alterações no poro também podem na carga dos aminoácidos também
podem mudar a seletividade do poro > Diminuição na expressão de porinas também confere
resistência aos antibióticos. A perda de porinas constitui um mecanismo exclusivo de bactérias
Gram-negativas, porque somente essas possuem membrana externa.
58. Como podemos avaliar a sensibilidade dos microrganismos aos antibióticos.
O antibiograma é um teste que determina o perfil de sensibilidade e resistência de bactérias e fungos
aos antibióticos. Através do resultado do antibiograma o médico pode indicar qual antibiótico mais
indicado para tratar a infecção, evitando, assim, o uso de antibióticos desnecessários e o surgimento
de resistência.
59. Descreva o MIC (CIM) e o MBC como obter esses resultados?
A concentração inibitória mínima (CIM) é a mais baixa concentração de um produto químico
responsável por limitar o crescimento visível de uma bactéria (ou seja, que tem atividade
bacteriostática). Os valores de CIM determinados dependem do microrganismo, do alvo da infecção e
do antibiótico em uso. O conceito de MIC é distinto do de concentração bactericida mínima (MBC) que
corresponde à concentração mínima de agente antimicrobiano que resulta na morte bacteriana (ou
seja, a concentração a partir da qual um agente é bactericida). Quanto mais próximos forem os
valores destas duas variáveis, mais letal será o antibiótico.
A CIM de um agente antimicrobiano pode ser determinada atravésda preparação de soluções desse
agente em concentrações crescentes, as quais são posteriormente incubadas com lotes
individualizados de bactérias cultivadas. A medição dos resultados e determinação dos CIM é
efetuada por diluição em ágar e microdiluição em meio líquido, seguindo as diretrizes de
organizações tais como CLSI, BSAC ou EUCAST.
60. Descreva o método de disco-difusão.
Método para avaliar a resistência bacteriana.
> Incubação de 18 a 24 horas.
> Diâmetro do halo é aferido.
> Resultado qualitativo.
> Interpretação S I R.
> Aplicável a qualquer laboratório.
> Baixo custo.
> Não aplicável a anaeróbios.
> Problemas na detecção de resistência
intermediária quando testadas moléculas
grandes.
61. Explique como uma bactéria é classificada como sensível ou resistente.
Se uma bactéria sofre a ação de um antibiótico, esta diz-se sensível; se pelo contrário, o antibiótico
não exerce qualquer efeito sobre a bactéria está diz-se resistente. A resistência pode ser natural ou
adquirida (por exemplo, pela transferência de plasmídeos ou por ocorrência de mutações).
62. Descreva o processo de identificação de Staphylococcus aureus.
Coloração de gram: positiva
Prova da Catalase: positiva, cocos isolados, aos pares ou agrupados.
Prova da Coagulase: positiva.
63. Descreva o processo de identificação de Micrococcus sp.
Coloração de gram: positiva
Prova da Catalase: positiva, cocos em formato de tétrades.
Oxidase: positiva.
Disco de Furazolidona: resistente.
64. Descreva o processo de identificação de Streptococcus sp.
Coloração de gram: positiva
Prova da catalase: negativa.
65. Descreva o processo de identificação de Enterococcus sp.
Coloração de gram: positiva.
Prova da Catalase: negativa
PYR: positiva
66. Descreva as principais provas de identificação de enterobactérias e seus resultados.
67. Qual a diferença entre EPEC, EHEC, ETEC, EIEC e EXPEC.
https://pt.wikipedia.org/wiki/Produto_qu%C3%ADmico
https://pt.wikipedia.org/wiki/Bact%C3%A9ria
https://pt.wikipedia.org/wiki/Bactericida
68. Descreva a shigelose.
Não é encontrada em uma microbiota sadia e
tem o poder de invadir as células do intestino.
Shigelose -> S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii
e S. sanney.
> Diarréia com presença de muco, sangue e
leucócitos.
> Invadem as células do intestino e causam
destruição do tecido local.
> Forte reação inflamatória.
> Raramente invade a circulação sanguínea.
> Produzem toxina de Shiga
> S. dysenteriae produz altos níveis de STX-
causa síndrome hemolítica urêmica (mais
violenta que a EHEC).
69. Descreva a febre tifóide.
Salmonella sp. - Diarréia; Febre; Dor abdominal; Dor de cabeça; Constipação; Danos respiratórios;
Danos no fígado; Danos no baço; Danos neurológicos fatais.
70. Qual a diferença entre diarreia e disenteria.
Diarréia - Evacuação intestinal frequente, líquida e abundante.
Disenteria - Diarréia acompanhada de muco e sangue. Ulceração de mucosas. Fortes dores
abdominais. Disenteria bacilar: E. coli, Salmonella sp. e Shigella sp.
71. Descreva o meio de Rugai.
> É interpretado observando as alterações em todo
tudo
>Fase Superior ápice
azul - sacarose negativa LTD negativo
amarelo - sacarose positiva LTD negativo
verde - sacarose negativa LTD positivo
castanho - sacarose positiva LTD positivo
>Base
amarelo - glicose positiva
azul - uréia positiva
preto - H2S positivo
amarelo com bolhas - glicose e gás positivo
>Fase Inferior
violeta - lisina descarboxilase positiva
amarelo - lisina descarboxilase negativa
com turvação - motilidade positiva
sem turvação - motilidade negativa se observa
nitidamente o crescimento
>Teste de Indol na Rolha - após a incubação pingar
assepticamente, 2 a 3 gotas do reativo de kovacs na
rolha de algodão hidrófilo.
indol positivo - algodão fica rosa ou vermelho
indol negativo - algodão permanece sem cor ou com
coloração amarelo
72. Descreva o ágar MacConkey e seus resultados.
O Meio é seletivo pois permite o crescimento de Gram negativos e inibe o crescimento de Gram
positivos, e é diferencial pois apresenta lactose, bactérias que fermentam a lactose (lactose +) ficam
com a cor roxa e as bactérias que não fermentam lactose apresentam-se incolores.
73. Descreva o meio EPM, Mili e citrato.
Tubo EPM
- fermentação da glicose
- produção de gás
- H2S
- ureia
- fenilalanina
- inocular picando até o fundo e semear na
superfície, incubar com a tampa frouxa 24 horas/
35°C
Tubo Mili
- fazer picada central apenas
- incubar 24 horas / 35°C
- motilidade
- bactérias móveis crescem além da picada turvando
o meio, enquanto as imóveis crescem apenas na
linha de picada.
- descarboxilação da lisina
- lisina positivo o meio torna-se roxo, na prova
negativa o meio permanece amarelado nos ⅔
inferiores. - após a leitura da lisina adicionar 3 gotas
de reativo de kovacs para o teste de indol
- a formação de um anel rosa na superfície do meio
indica positividade para o indol.
Citrato
- inocular a superfície e incubar 24 horas/ 35°C
- a prova positiva é evidenciada pelo aparecimento
de coloração azul na superfície.
74. Descreva o meio TSI e seus resultados.
75. Diferencie os padrões de hemólise encontrados em ágar sangue.
Beta Hemólise -> Lise total das hemácias, formam uma zona transparente ao redor da colônia. -
Streptococcus pyogenes e Streptococcus agalactiae.
Alfa Hemólise -> Hemólise parcial (resulta em perda da hemoglobina pela hemácia), forma uma zona
verde-acinzentada ao redor da colônia. - Streptococcus pneumoniae.
Gama Hemólise -> Não causam hemólise de nenhum grau. - Enterococcus sp
76. Descreva os principais pontos dos bacilos Gram negativos não fermentadores.
- Não fermentam glicose - Aeróbios - Oxidase positivo - Não alteram o ágar TSI. > bacteremias >
pneumonias > peritonites > infecção de catéter.
- Pseudomonas aeruginosa - Complexo Acinetobacter baumannii - Complexo Burkholderia -
Stenotrophomonas sp. - Elizabethkingia sp. - Chryseobacterium sp.
77. Descreva as neisserias.
Cocos Gram Negativos - Neisserias - diplococos gram positivos em forma de grão de feijão - oxidase
positivo - não móveis.
> Neisseria gonorrhoeae - Gonorreia.
> Neisseria meningitidis - meningites.
> usar ágar chocolate ou thayer martin. > sobrevivem dentro de neutrófilos.
78. Disserte sobre o Treponema pallidum e suas características.