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FUNDAÇÃO PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS - FUPAC FACULDADE PRESIDENTE ANTONIO CARLOS DE UBERLÂNDIA SAMUEL OLIVEIRA SILVA ESTÁGIO SUPERVISIONADO OBRIGATÓRIO II – ESO II Uberlândia 2022/2 SAMUEL OLIVEIRA SILVA Estágio supervisionado Obrigatório II – ESO II Análises Clinicas Relatório final de estágio apresentado à Fundação Presidente Antônio Carlos de Uberlândia - FUPAC, como requisito parcial para a aprovação na disciplina de Estágio Supervisionado Obrigatório (Análises Clinicas) do Curso de Graduação em Farmácia. Orientadora: Profa. Dayanne Da R. Ribeiro Uberlândia 2022/2 GLICOSE 1 INDICAÇÃO MÉDICA DO EXAME Sistema enzimático para a determinação da glicose no sangue, líquor e líquidos ascítico, pleural e sinovial por método cinético ou de ponto final. 2 PRINCÍPIO A glicose oxidase catalisa a oxidação da glicose de acordo com a seguinte reação: Glicose + O2+H2O GOD Ácido Glucônico+ H2O2. O peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, sob ação catalisadora da peroxidase, através de uma reação oxidativa de acoplamento formando uma antipirilquinonimina vermelha cuja intensidade de cor é proporcional à concentração da glicose na amostra. 3 AMOSTRA Preparo do paciente É necessário estar de 8 a 12 horas de jejum, sem consumir nenhum tipo de alimento ou bebidas, apenas água é permitido. O exame é utilizado para investigar possíveis casos de diabetes e para controle da doença. Tipos de amostra Usar plasma. Armazenamento e estabilidade da amostra O analito é estável por 3 dias entre 2 – 8 ºC. Volume mínimo (Definir o volume mínimo a ser encaminhado para análise) Volume ideal (Definir o volume ideal a ser encaminhado para análise) Critérios para rejeição da amostra Presença de hemólise intensa. Fazer referência ao manual ou POP de colheita, separação e distribuição de material. 4 PRODUTO UTILIZADO Glicose, Ref. 133 ANVISA - 10009010026 Labtest Diagnóstica Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 Lagoa Santa, MG, 33400-000 Precipitante: Armazenar entre 2 - 8 ºC. Contém tampão fosfato 30 mmo/L, pH 7,5; fenol 1 mmol/L; glicose oxidase 12500 U/L; peroxidase 800 U/L; 4-aminoantipirina 290 mol/L; azida sódica 7,5 mmol/L; e surfactantes. Padrão – 100mg/dL: Armazenar entre 2 - 30 ºC. Contém: glicose 100 mg/dL e biocida não tóxico. Após o manuseio sugere-se armazenar bem vedado para evitar evaporação. Precauções e cuidados especiais. Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados na manipulação do reagente. O Reagente contém azida sódica que é tóxica. Deve-se tomar cuidado para evitar a ingestão e no caso de contato com os olhos, deve-se lavar imediatamente com grande quantidade de água e procurar auxílio médico. Azida pode formar compostos altamente explosivos com tubulações de chumbo e cobre. Portanto, utilizar grandes volumes de água para descartar o reagente. Não utilizar o Reagente 1 quando sua absorbância medida contra a água em 505 nm for igual ou maior que 0,300 ou quando mostrar-se turvo ou com sinais de contaminação. 5 EQUIPAMENTOS Procedimento manual 1. Fotômetro capaz de medir com exatidão a absorbância em 505 nm ou filtro verde (490 a 540 nm). 1. Banho-maria mantido à temperatura constante (37 ºC). 1. Pipetas para medir amostras e reagentes. 1. Cronômetro. Procedimento automatizado Indicar o nome, modelo e o local onde se encontra o equipamento analítico; fazer referência ao manual ou POP para utilização do mesmo. Procedimento alternativo Indicar o equipamento alternativo e os procedimentos para medição dos ensaios. Enumerar as diferenças esperadas quando procedimentos manuais substituem procedimentos automatizados. 6 CONTROLE DE QUALIDADE Materiais Identificar os materiais para controle interno e externo da qualidade (fabricante, número de catálogo), instruções de preparo e frequência da utilização dos mesmos. Limites de tolerância Descrever o procedimento para definição dos limites de tolerância, o sistema adotado para utilização do mapa de Levey-Jennings e das regras de controle e as providências a serem tomadas diante de valores que ultrapassem tais limites. Fazer referência ao manual ou POP para utilização dos materiais de controle. Verificação de novo lote de controles e/ou reagentes. Descrever o procedimento de verificação de novos lotes de controles e de reagentes. Gerenciamento dos dados Definir como os dados relativos ao controle da qualidade são arquivados e gerenciados. Fazer referência ao manual ou POP de garantia da qualidade. 7 PROCEDIMENTOS Método de ponto final. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: Misturar vigorosamente e incubar em banho-maria a 37 ºC durante 10 minutos. O nível da água no banho deve ser superior ao nível dos reagentes nos tubos de ensaio. Determinar as absorbâncias do Teste e Padrão em 505 nm (490 a 520), acertando o zero com o branco. A cor é estável 30 minutos. O procedimento sugerido para a medição é adequado para fotômetros cujo volume mínimo de solução para medição é igual ou menor que 1,0 mL. Deve ser feita uma verificação da necessidade de ajuste do volume para o fotômetro utilizado. Os volumes de amostra e reagente podem ser modificados proporcionalmente sem prejuízo para o desempenho do teste e o procedimento de cálculo se mantém inalterado. Em caso de redução dos volumes é fundamental que se observe o volume mínimo necessário para a leitura fotométrica. Volumes da amostra menores que 0,01 mL são críticos em aplicações manuais e devem ser usados com cautela porque aumentam a imprecisão da medição. Branco Teste Padrão Amostra ------ 0,01ml ------ Padrão ------ ----- 0,01ml Reagente 1 1,0ml 1,0ml 1,0ml 8 CÁLCULOS Ver linearidade. Absorbância do Teste Glicose (mg/dL) = x 100 Absorbância do Padrão Devido grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a metodologia, o resultado também pode ser obtido utilizando fator de calibração. 100 Fator de Calibração = Absorbância do Padrão Glicose (mg/dL) = Absorbância do Teste x Fator de Calibração. g/dl = g/dl 9 RESULTADOS Unidade de medida mg/dL Conversão de mg/dL para Unidade SI: mmol/L = mg/dL x 0,340 Valores desejáveis ou recomendados Estes valores devem ser usados apenas como orientação. Plasma (Jejum de 8 horas) Idade Mg/dl Prematuro 20 a 60 0 a 1 dia 40 a 60 >1 dia 50 a 80 Crianças e adultos 65 a 99 10 LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO Linearidade O resultado da medição é linear até 500 mg/dL. Quando for obtido valor igual ou maior que 500 mg/dL, diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L, realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. Sugerimos a verificação da linearidade metodológica e fotométrica, no mínimo semestralmente utilizando amostra com valores até 500 mg/dL. Interferências Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório estabeleça sua própria faixa de valores de referência na população atendida. 11 SIGNIFICADO CLÍNICO Valores elevados de glicose ocorrem nos vários tipos de diabetes primárias, nos estados de intolerância à glicose e nas diabetes secundárias à várias doenças (hipertireoidismo, hiperpituitarismo, hiperadrenocorticismo, etc.). Valores diminuídos de glicose ocorrem nas hipoglicemias que podem ser devidas a várias causas. Quando a ocorrência de sintomas de hipoglicemia é relacionada à alimentação, duas formas de hipoglicemia podem ser definidas: hipoglicemia do jejum e pós-prandial. As causas mais comuns de hipoglicemia do jejum são: hiperinsulinismo endógeno (insulinoma e sulfonilurea), hiperinsulinismo exógeno (factício), tumores extrapancreáticos, síndrome autoimune (formação espontâneade anticorpos para receptores da insulina), insuficiência suprarrenal e ou hipofisária, doença hepática grave e alcoolismo. A hipoglicemia pós-prandial dependendo da história clínica e da resposta ao teste oral de tolerância à glicose, é classificada em hipoglicemia alimentar, hipoglicemia do diabético tipo II e do paciente com intolerância à glicose, hipoglicemia funcional ou reativa. Para uma revisão dos critérios diagnósticos e classificação do diabetes mellitus American Diabetes Association. Diabetes Care consultar 2012;(suppl): 1 S64-S71 ou: http://care.diabetesjournals.org/content/35/Supplement_1/S64.full (acesso em 16/04/2012). 12 CASO CLÍNICO Paciente: Samuel Oliveira Silva D.Nasc: 16/03/1993 Medicamentos: nenhum. At = 0,104 Ap=0,095 Glicose mg/dl= absorbância do teste x100 absorbância do padrão Glicose=mg/dl= 0,104/0,095 x 100= 109,47 Glicose= 109,47 mg/dl Valores referencia Idade Mg/dl Prematuro 20 a 60 0 a 1 dia 40 a 60 >1 dia 50 a 80 Crianças e adultos 65 a 99 Visto que o paciente não estava em jejum, e um resultado aparentemente normal.
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