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Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 1 Citologia Bacteriana ➢ Elementos essenciais às bactérias: • Membrana plasmática; • Citoplasma; • Parede celular; • Cromossomo; • Plasmídeo (DNA circular); • Ribossomos; • Grânulos de reserva (energia e nutrientes). ➢ Elementos não essenciais às bactérias: • Cápsula (inibem os macrófagos e neutrófilos de fagocitarem a bactéria); ✓ Adesão da bactéria a superfícies sólidas. • Flagelos (locomoção e alimentação); ✓ Monotríquio: 1 único flagelo em um dos polos; ✓ Anfitríquio: 1 flagelo em cada extremidade. ✓ Lofotríquio: tufo de flagelos em um dos polos; ✓ Peritríqueo: ocupa toda a superfície da bactéria; ✓ A bactéria se movimenta por movimentos rotacionais dos flagelos. • Fímbrias (fixam a bactéria ao substrato e em outras células); • Pili (conjugação bacteriana); Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 2 • Esporos (forma de resistência). ✓ Somente algumas bactérias conseguem formar esporos. ❖ Membrana plasmática • Estrutura fina, situada no interior da parede celular; • Reveste o citoplasma; • Bicamada fosfolipídica; • Não possuem esteróis -> menos rígidas; • Algumas podem ter hopanoides (esteróis) • Seletividade; • Digestão de nutrientes; • Produção de energia; • Mesossomos (invaginações na membrana plasmática de algumas bactérias, responsáveis pela respiração dessas). ❖ Citoplasma • Substância celular localizada no interior da membrana plasmática; • Composição: água (80%) proteínas, carboidratos, lipídeos e íons inorgânicos; • Nucleiode; Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 3 • Ribossomos; • Depósitos de reserva: Inclusões e vacúolos de gás; ❖ Parede celular • Estrutura complexa e semirrígida; • Dá a forma da célula; • Forma as bactérias; • Previne sua ruptura; • Ponto de ancoragem para os flagelos; • Contribui para a patogenicidade; • Local de ação de alguns antibióticos; • Diferenciação dos principais tipos celulares; • Peptidoglicano dá resistência estrutural à parede. ➢ Parede celular de bactérias Gram-positivas • Muitas camadas de peptídeoglicano -> estrutura rígida e espessa; • Algumas bactérias Gram + podem ter espaço periplasmático; Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 4 • Ácidos lipoteicoico e teicoico conseguem manter a estrutura da parede quando a bactéria vai se dividir; • Ácido lipoteicoico atravessa a camada de peptídeglicano e está ligado a M.P.; ✓ Ácido teicoico associado a lipídios de membrana; ✓ Diferencia os sorotipos bacterianos; ✓ Antígenos de superfície (podem se ligar a receptores específicos das nossas células); ✓ São fatores de virulência (favorece a adesão da bactéria a célula do hospedeiro); ✓ Pode funcionar como endotoxina. • Ácido teicoico da parede está ligado à camada de peptidoglicano; ✓ Formado por álcool ou fosfato; ✓ Fosfato gera carga negativa (favorece o movimento de cátions p/ dentro e p/ fora da célula); ✓ Fatores de virulência; • Peptidoglicano pode ser degradado pela lisozima (lágrimas e muco) -> sem peptidoglicano as bactérias não sobrevivem às grandes diferenças de pressão osmótica. Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 5 ➢ Parede celular de bactérias Gram-negativas • Parede celular com uma ou poucas camadas de peptideoglicano e uma membrana externa; • Espaço periplasmático (entre a membrana externa e M.P.) -> sistema de transporte de ferro, proteínas, açúcares e enzimas hidrolíticas; • Apresentam porinas (proteínas transmembranares): entradas de substâncias, antibióticos e nutrição; • Presença de enzimas que clivam antimicrobianos e os inativam; • Membrana externa: face externa (LPS) e face interna (fosfolipídios); ✓ Barreira impermeável a grandes moléculas. • Estrutura do LPS: ✓ Lipídeo A, cerne polissacarídeo e polissacarídeo O.; ✓ Pode ser uma endotoxina (sepse); ✓ Fornece rigidez à parede celular; ✓ Molécula muito inflamatória (citocinas); ✓ Pirógeno (indutor de febre); ✓ Lipídio A = parte lipídica do LPS; embebido na parede superior da membrana externa; é liberado quando a bactéria morre, causando toda a sintomatologia da doença; ✓ Cerne polissacarídeo = ligado ao lipídio A e contém açúcares incomuns; papel estrutural (fornece estabilidade); ✓ Polissacarídeo O. = se estende p/ fora do polissacarídeo; composto por moléculas de açúcar; funciona como antígeno. Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 6 ➢ Paredes celulares atípicas • Alguns tipos de bactérias não têm parede ou têm pouco material de parede; • Gênero Micoplasma: ✓ Menores bactérias; ✓ Podem se reproduzir fora de células vivas de hospedeiros; ✓ Atravessam filtros bacterianos; ✓ M.P. únicas; ✓ Possuem esteróis. • Arqueias: ✓ Podem ou não ter paredes incomuns; ✓ Polissacarídeos e proteínas (sem peptideoglicano); ✓ Pseudomureína na parede celular; ✓ Não podem ser coradas pelo gram devido à ausência de peptidoglicano. ❖ Cromossomo bacteriano (nucleoide) • Esférico, alongado ou em halteres; • 20% do volume celular é DNA; • Fixado à membrana plasmática; • Proteínas na M.P. -> replicação do DNA e segregação de novos cromossomos p/ as células filhas na divisão celular. ❖ Plasmídeo • DNA circular de dupla fita, extracromossômico; • Replicação independentemente do DNA cromossômico; • Não são cruciais p/ a sobrevivência em condições ambientais normais; • Podem ser transferidos de uma bactéria p/ outra; • Plasmídeo R: resistência a antibióticos e metais pesados; • Plasmídeo F: fertilidade bacteriana (conjugação); Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 7 • Plasmídeo de virulência: síntese de toxinas. ❖ Ribossomos • Presente em todas as células procarióticas; • Duas subunidades: proteína e RNA ribossomal (rRNA) • Antibióticos inibem a síntese proteica nos ribossomos procarióticos; • Estreptomicina e gentamicina fixam-se à subunidade 30s e interferem na síntese proteica; • Eritromicina e cloranfenicol interferem na síntese proteica pela fixação à subunidade 50s. ❖ Estruturas externas ➢ Cápsula ✓ Polissacarídeos ou proteínas; ✓ Camadas não fixadas na célula: SLIME; ✓ Cápsula + SLIME: glicocálix; ✓ Antifagocítica, barreira p/ moléculas hidrofílicas tóxicas, aderência e outras bactérias e aos tecidos do hospedeiro. ➢ Flagelos ✓ Subunidades de proteínas flagelina enroladas em hélice e fixadas na membrana basal; ✓ 1 ou + flagelos; ✓ Motilidade (potencial de membrana e quimiotaxia). Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 8 ➢ Fímbrias ✓ Subunidades de proteína pilina; ✓ Menores que flagelos e se distribuem pela superfície celular; ✓ Adesão a outras bactérias ou ao hospedeiro; ✓ Troca de material genético (Pili F). ➢ Esporos bacterianos ✓ Bactérias Gram positivas (Bacillus e Clostridium); ✓ Estrutura desidratada, de múltiplas camadas. ✓ Protege e permite a sobrevivência das bactérias em um estado de ‘animação suspenso’’; (forma de resistência) ✓ Contém uma cópia do cromossomo e elevada concentração de cálcio ligado ao ácido dipicolínico; ✓ 2 camadas de peptidoglicano, 1 membrana externa e 1 interna e um revestimento proteico semelhante a queratina. ❖ Morfologia Bacteriana ➢ Diferenças macroscópicas • Organização das colônias: odor, cor, tamanho, forma, capacidade de resistir a certos antibióticos, fermentar açúcares, lisar hemácias e hidrolisar lipídeos. ➢ Diferenças microscópicas Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 9 • Tamanho, forma, arranjo (coco, bacilo, cocobacilo, vibriões e espirilos) e capacidade de reter corantes. ➢ Diferenças metabólicas • Exigência de ambiente anaeróbio ou aeróbio, nutrientes específicos, produção de metabólicos específicos. ➢ Diferenças antigênicas • Descoberta de anticorpos no sangue para o combate de antígenos específicos. ➢ Diferenças genéticas • Análise de pedaços de cromossomos, ou genoma inteiroem buscas de sequências específicas de DNA. ❖ Coloração de Gram • Desenvolvida por Hans Christian Gram em 1884; • Classifica as bactérias em Gram + e Gram -; • Utiliza: cultura bacteriana, lâmina de vidro, água destilada ou solução salina, fixação através de calor; • Corantes: Cristal violeta 1’, lugol 1’, álcool 15’’, safranina/fucsina 30’’ • Bactérias Gram – se coram em vermelho/rosa; ✓ Quando entram em contato com o álcool, a gordura da camada externa (parede celular) é removida total ou parcialmente, assim a bactéria Gram – perde a coloração do cristal violeta e se recoram com a safranina/fucuccina Ana Beatriz Araujo (@abianamed) 10 • Bactérias Gram + se coram em violeta. ✓ A bactéria Gram + quando tratada com álcool, devido sua camada espessa de peptidoglicano, não se descora, uma vez que o álcool não consegue retirar o crista violeta do interior dessa. ❖ Coloração acidorresistente – Ziehl-Neelsen • Se liga fortemente apenas as bactérias que apresentam um material ceroso em suas paredes celulares; • Mycobacterium tuberculosis (agente causador da tuberculose); • Mycobacterium leprae (agente causador da hanseníase); • Gênero Nocardia sp. • Características: ✓ Bacilos finos ✓ Grande quantidade de ácidos graxos ✓ Bactérias intracelulares obrigatórias
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