Estudo do Genoma Humano Aplicado à Saúde

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Estud� d� Genom� Human� Aplicad� à Saúd�
➔ Com� � identificaçã� d� componente� d�
gene� pod� ajudar e� diagn�tic�? (sit� d�
USP)
- Sequenciamento do Exoma; ( os testes em gerais
buscam por erros que devem estar contidos na
sequência nucleotídica - Assim identificando o
erro no gene, relacionado com doenças)
- Câncer Hereditário;
- Triagem para casais;
- Painéis para doenças raras;
● Diagnóstico por meio de EXOMAS:
EXOMAS: Conjunto de exons dos genes; ⇨ É
onde as alterações são geralmente encontradas.
- Há uma quantidade de Genes e código para cada tipo
de doença específica, variando o valor que é cobrado
sobre cada referida doença e tipos de exames
necessários; (lutaremos para chegar ao SUS)
● Deve-se estar bastante atento para que o
exame seja feito de maneira correta e
indicada. Por que se os erros estiverem
contidos no íntrons e o exame que tiver
sido feito for o do exons, não vai ser
possível identificar essas alterações de
nenhuma maneira.
- Necessitamos saber que tipo de mutação estamos
querendo investigar, se são todas as mutações
possíveis existentes ou só de um canal
especificamente - por haver testes bem mais
específicos e outros mais abrangentes.
- Eles podem se reunir de maneira espaçada como está
na formação, ou intercalantes.
- Repetições variáveis vão variar de um
indivíduo para outro e são única;
- O conjunto de sequências repetitivas é específico
para cada pessoa.
No primeiro experimento nota-se que temos dois
alelos diferentes, sendo quatro do meu pai pra
sequência GATA e oito repetições da minha mãe.
- E por conseguinte, cada experimento e cada
pessoa vai tendo um perfil de repetições;
● Uma situação de transplante dá realmente
certo quando encontramos no indivíduo as
mesmas sequências repetitivas do
doador nele mesmo depois do
transplante.
● Como Analisar uma Molécula de DNA?
Eletroforese - Separação de moléculas através de
corrente elétrica;
PCR: Simulação da variação/ da cópia da
reprodução do DNA;
- Eu posso analisar dessa forma para gel, porém
eu tenho que ter o DNA extraído e tenho que ter
diferentes fragmentos do DNA para poder
comparar - se eu quiser fazer o sequenciamento
do DNA, picos da sequências repetitivas ou
cópias do DNA.
- Se coloca nucleotídeos, enzimas,
oligonucleotídeos e todos os reagentes necessários
e irá para dentro de uma máquina e essa máquina
irá ficar mudando de temperatura.
*E posteriormente, a sequência obtida com esse
procedimento irá ser analisada para ver se há
realmente erros ou mutação nela.
● Depois do PCR, que foi para copiar
todas as moléculas de DNA;
- Um determinado gene, podemos sequenciar a
ordem dos nucleotídeos presente naquele produto
lá do PCR. O sequenciamento vai se dar por meio
do uso da mesma técnica do PCR, só que aí os
nucleotídeos estarão com fluorescência e cada
nucleotídeo terá uma hidroxila a menos, parando a
reação cada vez que eles forem incorporados.
- Assim, conseguimos identificar a ordem pela
fluorescência do último nucleotídeo do filamento
e daí saí montando a sequência.
- Método de Sanger - automatizado
- Sequenciamento Automático:
Novas gerações de sequenciamentos usam
plataformas de primers e fluoróforos e são mais
rápidos.