Estabilidade de Verde de Malaquita em Solução e em Carne de Peixe

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 As soluções estoque e intermediárias de VM, VB e VLM apresentaram-se
estáveis, para fins analíticos, por até 60 dias;
As soluções de trabalho, constituídas pelos três analitos, devido à rápida
degradação do VLM, podem ser armazenadas por, no máximo, 7 dias. No entanto,
recomenda-se o preparo no momento do uso;
 Quanto à estabilidade dos analitos em filés de tilápias, unicamente o VLM
apresentou-se estável por até 7 dias.
Os resultados obtidos evidenciam a necessidade de controle 
das condições e do tempo de armazenamento das amostras 
de pescado a serem analisadas em programas de 
fiscalização e monitoramento.
CONCLUSÕES
Verde de malaquita (VM) é um corante têxtil ilegalmente utilizado na aquicultura como
agente antimicrobiano. Resíduos de VM e de seu produto de biotransformação (verde de
leucomalaquita, VLM) em alimentos representam riscos ao meio ambiente e à saúde
humana, além de ocasionarem entraves à comercialização. O objetivo deste trabalho foi
avaliar a estabilidade do VM e VLM, assim como do padrão interno (verde brilhante, VB)
em soluções padrão e em filé de tilápias, como parte do procedimento de validação de
um método analítico.
CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIA (CLAE)
 Coluna analítica C18 Symmetry® (2,1 x 150 mm, 3,5 µm); Fase móvel: Acetonitrila (ACN) e acetato de amônio 20 mmol L-1, pH 4,0 (TP),
75:25 v/v, a 0,25 mL min-1;
 VM DAD λ = 620 nm; VLM DFL λex = 265 nm e λem = 360 nm
Estabilidade de VM, VB e VLM em solução
Figura 1. Estabilidade de VM, VB e VLM em solução estoque 1 mg mL-1.
Redução
Oxidação
Verde de malaquita (VM) Verde de leucomalaquita (VLM)
PARTE EXPERIMENTAL
RESULTADOS E DISCUSSÃO
 Solução estoque 1 mg mL-1 (SE), -20ºC;
 Solução intermediária 10 µg mL-1 (SI), -20ºC;
 Solução de trabalho 100 ng mL-1 (ST), 4ºC.
 SOLVENTES: ACN (SE e SI) e ACN/TP (ST).
Amostras de filés de tilápias fortificadas 
a 30 ng g-1, -20ºC.
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Tempo (dias)
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Tempo (dias)
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VB
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Figura 2. Estabilidade de VM, VB e VLM em solução intermediária 10 µg mL-1.
TRATAMENTO DOS DADOS
 Determinações em triplicata;
Teste F;
Teste t. Nível de confiança: 95 %
Soluções estoque e soluções intermediárias
Estáveis por até 60 dias.
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Tempo (dias)
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VM
VB
VLM
Figura 3. Estabilidade de VM, VB e VLM em solução estoque 100 ng mL-1.
Rápida degradação de LVM.
Soluções de trabalho.
Estáveis por até 7 dias.
Preparar imediatamente antes do uso.
Estabilidade de VM, VB e VLM em filés de tilápias
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40
60
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n
tr
o
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Tempo (dias)
VM
VB
VLM
Figura 4. Estabilidade de VM, VB e VLM em filés de tilápias (30 ng g-1)
Estabilidade em filés de tilápias:
VM e VB: perdas de 30% após 24h
VLM: estável por até 7 dias.
AGÊNCIAS FINANCIADORAS
AVALIAÇÃO DA ESTABILIDADE DE VERDE DE MALAQUITA 
EM SOLUÇÃO E EM CARNE DE PEIXE POR CLAE-DAD/DFL
Faculdade de Engenharia de Alimentos, UNICAMP
Martha C. B. Barreira; Juliana C. Hashimoto; Sílvia H. P. Vitorino; Jonas A. R. Paschoal; Felix G. R. Reyes*
Verde de Malaquita – Validação – CLAE
* reyesfgr@fea.unicamp.br
INTRODUÇÃO 
http://www.fapesp.br/index.php