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AULA 2 - GAMETOGÊNESE O QUE VAMOS ESTUDAR? 2.1 - DIVISÃO CELULAR (MEIOSE E MITOSE) 2.2 - PREPARANDO-SE PARA A GRAVIDEZ/ DESENVOLVIMENTO DAS CÉLULAS SEXUAIS Origem e migração das células germinativas Multiplicação células germinativas Meiose células germinativas Maturação estrutural/ funcional - ovócitos/espermatozóide 2.3 - SISTEMA REPRODUTIVO MASCULINO E A ESPERMATOGÊNESE 2.4 - SISTEMA REPRODUTIVO FEMININO E A OVOGÊNESE 2.5 - CICLO REPRODUTIVO Células somáticas (2n=46) - diploide Células gaméticas ou germinativas (1n=23) - haploide Células somáticas (2n=46) - diploide Células gaméticas ou germinativas (1n=23) - haploide Cé lu la s ha pl oi de s 2.1 - Divisão Celular: Mitose e Meiose O que é e Onde está acontecendo Meiose e Mitose? Divisão nuclear de uma célula que forma células filhas diplóides (2n) - MITOSE; que forma células filhas haplóides (n) - MEIOSE - seguida de citocinese. • Células somáticas (desenvolvimento/ reparo e substituição partes) • Células germinativas (gametas e precursores) O que é e Onde está acontecendo Meiose e Mitose? Divisão nuclear de uma célula que forma células filhas diplóides (2n) - MITOSE; que forma células filhas haplóides (n) - MEIOSE - seguida de citocinese. • Células somáticas (desenvolvimento/ reparo e substituição partes) • Células germinativas (gametas e precursores) O que é e Onde está acontecendo Meiose e Mitose? Divisão nuclear de uma célula que forma células filhas diplóides (2n) - MITOSE; que forma células filhas haplóides (n) - MEIOSE - seguida de citocinese. • Células somáticas (desenvolvimento/ reparo e substituição partes) • Células germinativas (gametas e precursores) • G1/ G2 (repouso - metabolicamente ativa) • S (síntese DNA) • G0 repouso permanente/ transiente (eg. neurônios/ células epiteliais ou hepatócitos) • fatores crescimento/ mitógenos/ sinais extra-celular • ciclinas/ ciclinas cinases/ inibidores de cliclinas • Comprimento ciclo (6h-dias) A B MITOSE Divisão nuclear células somáticas com formação células-filha com composição cromossômico igual a célula progenitora • Desenvolvimento embrionário/ fetal • Crescimento • Reparo e Substituição Tecidual • Seguida Citocinese Fase S MITOSE • Prófase (B): • condensação cromátides • microtúbulos [α-tubulina/ β-tubulina (GTP ou GDP)] • Metáfase (C): • envelope nuclear desintegra • cinetócoro* • placa metafásica • Anáfase (D): • segregação cromátides irmãs • Telófase (E): • cromátides pólos opostos • descondensação • envelope nuclear MITOSE • Prófase (B): • condensação cromátides • microtúbulos [α-tubulina/ β-tubulina (GTP ou GDP)] • Metáfase (C): • envelope nuclear desintegra • cinetócoro* • placa metafásica MITOSE • Prófase (B): • condensação cromátides • microtúbulos [α-tubulina/ β-tubulina (GTP ou GDP)] • Metáfase (C): • envelope nuclear desintegra • cinetócoro* • placa metafásica • Anáfase (D): • segregação cromátides irmãs • Telófase (E): • cromátides pólos opostos • descondensação • envelope nuclear CITOCINESE (F) • ocorrência/ não ocorrência • anel contráctil actina/ miosina • células filhas • iguais • diferentes • desenvolvimento diferencial (anfíbios) Fase S M EI O SE MEIOSE Divisão nuclear células germinativas* com formação células-filha com composição cromossômico diferente da célula progenitora • Células germinativas/ Células sexuais/ Células reprodutivas/ Células gaméticas* • Seguida Citocinese • igual (células germinativas masculinas) • desigual (células germinativas femininas) MEIOSE • Prófase I (B e C): • condensação cromátides • centríolos/ microtúbulos • envelope nuclear • pareamento homólogos/ “crossing over” Variabilidade! MEIOSE I - R! • Metáfase I (D): • centrossomos/ microtúbulos/ cinetócoro* • placa metafásica • Anáfase I (E): • segregação cromossomos homólogos • Telófase I (F): • cromossomos pólos opostos • descondensação • envelope nuclear ØCitocinese/ Intercinese Variabilidade! MEIOSE II - E! • Prófase II (G): • célula haplóide/ cromátide duplicada • Metáfase II (H) • Anáfase II (I) • Telófase II (J) ØCitocinese (k): • célula haplóide/ cromátide simples • MEIOSE: 1. GAMETAS 2. CROSSING OVER (CROMÁTIDES HOMÓLOGOS) 3. SEGREGAÇÃO ALEATÓRIA CROMOSSOMOS MATERNOS/ PATERNOS Variabilidade genética (1n=23) Manutenção número cromossômico QUANDO A VIDA COMEÇA? 2.2 - PREPARANDO-SE PARA A GRAVIDEZ QUANDO A VIDA COMEÇA? 2. PREPARANDO-SE PARA A GRAVIDEZ “...começa com a fusão de um óvulo e um espermatozoide...” Carlson 2014 2. PREPARANDO-SE PARA A GRAVIDEZ “...começa com a fusão de um óvulo e um espermatozoide...” Carlson 2014 ØGAMETOGÊNESE ØTRANSPORTE DOS GAMETAS ØFERTILIZAÇÃO 2.1 DESENVOLVIMENTO DAS CÉLULAS SEXUAIS Gametogênese - “Mudanças genética e fenotípicas – células germinativas” ØEspermatogênese ØOvogênese A. Origem e migração das células germinativas B. Multiplicação células germinativas - Mitose C. Meiose células germinativas D. Maturação estrutural/ funcional - ovócitos/espermatozóide A. Origem e migração das células germinativas (Gametogênese) • 2ª semana - epiblasto/ 3ª semana - saco vitelino/ 4ª semana - migração/ 5ª semana - futura gônada (Homo sapiens) • [↑fosfatase alcalina] • Camundongos – 100 – 4000 Células Germinativas Primordiais 26 dpf - suíno A. Origem e migração das células germinativas Mesentério dorsal Gônada em formação Saco Vitelino http://telemedicina.med.muni.cz/pediatric-oncology/index.php?pg=special-section--extracranial-germ-cell-tumors Teratoma - 1:40000 nascidos vivos (2016) • Sacrococcígeo (40%) • Ovário (25%) • Testículo (12%) • Cérebro (5%) • Pescoço e mediastino (18%) (http://www.jscisociety.com/text.asp?2016/43/1/57/175469) 1:35.000 – 40.000 nascidos vivos https://www.chop.edu/conditions-diseases/sacrococcygeal-teratoma-sct http://www.uel.br/revistas/uel/index.php/semagrarias/article/viewFile/14445/14081 A. Sagittal image of Fetal MRI at 34 weeks gestation shows well-defined with cystic component measuring about 4.5 × 3.5 cm in oropharyngeal region (arrow). Fetus with oropharyngeal teratoma. B. Photograph during surgery shows the tumor mass (arrow). A 1:35.000-200.000 nascidos vivos (2014) doi: 10.4103/2156-7514.129261 B Figure 1: (a) Gross photograph of the dead male baby showing huge intraoral mass. (b) Microphotograph of the mass showing cartilage, adipocytes and smooth muscle tissue (H and E stain, 10×). (c) Microphotograph showing bony tissue and adipocytes (H and E stain, 10×). (d) Microphotograph showing immature neuroectodermal epithelium (H and E stain, 10×) DOI: 10.4103/0974-2727.78571 (2011) 2.1 DESENVOLVIMENTO DAS CÉLULAS SEXUAIS Gametogênese - “Mudanças genética e fenotípicas – células germinativas” ØEspermatogênese ØOvogênese A. Origem e migração das células germinativas B. Multiplicação células germinativas - Mitose C. Meiose células germinativas D. Maturação estrutural/ funcional - ovócitos/espermatozóide B. Multiplicação células germinativas - Mitose • Centenas CGPs – Milhares CGPs (Células Germinativas Primordiais) • Ovogônias – mitoses ovário 2º - 5º mês gestacional (7x106 cells) • Espermatogônias – mitoses pré – pós-natal (puberdade) CGPs - 2n 2 CGPs - 2n Ciclo celular G1-S-G2-M 2.1 DESENVOLVIMENTO DAS CÉLULAS SEXUAIS Gametogênese - “Mudanças genética e fenotípicas – células germinativas” ØEspermatogênese ØOvogênese A. Origem e migração das células germinativas B. Multiplicação células germinativas - Mitose C. Meiose células germinativas D. Maturação estrutural/ funcional - ovócitos/espermatozóide • MEIOSE: 1. GAMETAS 2. CROSSING OVER (CROMÁTIDES HOMÓLOGOS) 3. SEGREGAÇÃO ALEATÓRIA CROMOSSOMOS MATERNOS/ PATERNOS Variabilidade genética (1n=23) Manutenção número cromossômico C. MEIOSE CÉLULAS GERMINATIVASMEIOSE PRIMEIRA DIVISÃO REDUCIONAL (R!) – SEPARAÇÃO DOS HOMÓLOGOS SEGUNDA DIVISÃO EQUACIONAL (E!) – DISJUNÇÃO CROMÁTIDES sexo masculino – inicia-se puberdade sexo feminino - inicia-se período fetal – termina fertilização B A C D 2.1 DESENVOLVIMENTO DAS CÉLULAS SEXUAIS Gametogênese - “Mudanças genética e fenotípicas – células germinativas” ØEspermatogênese ØOvogênese A. Origem e migração das células germinativas B. Multiplicação células germinativas - Mitose C. Meiose células germinativas D. Maturação estrutural/ funcional - ovócitos/espermatozóide 2.3 - SISTEMA REPRODUTIVO MASCULINO E A ESPERMATOGÊNESE APARELHO REPRODUTIVO ♂ - MORFOLOGIA TESTÍCULO Garcia, 2012Garcia, 2012 * * * Garcia, 2012 FORMAÇÃO SÊMEN (secreções + 60 - 100x106 SPTZ) • VESÍCULA SEMINAL (50%) • FRUTOSE • PROSTAGLANDINAS • VESICULASE • PRÓSTATA (30%) • ÁCIDO CÍTRICO (SANGUE) • VESICULASE • FIBRINOLISINAS/ FIBRINOGENASE • TAMPÕES PH • ÍONS (ZN, CA2+, MG) • FOSFATASE ÁCIDA • GLÂNDULAS BULBOURETRAIS • GALACTOSE/ GALACTOSAMINA • ÁCIDO SIÁLICO...Garcia, 2012Garcia, 2012 * * * CÉLULAS DE LEYDIG CÉLULAS DE SERTOLI CÉLULAS GAMÉTICAS • FASE PRÉ-NATAL/ INFÂNCIA – CORDÕES SEMINÍFEROS • PUBERDADE – TÚBULOS SEMINÍFEROS CÉLULAS DE SERTOLI • BARREIRA HEMATOTESTICULAR; • CONTROLE ESPERMATOGÊNESE • APOIO MECÂNICO E NUTRIÇÃO (fatores crescimento; transferrinas; proteínas); • FAGOCITOSE; • TESTOSTERONA --- DIHIDROTESTOSTERONA • ESTROGÊNIO E INIBINA • ABP • SECREÇÃO LÍQUIDO TUBULAR • HORMÔNIO ANTIMULLERIANO ESPERMATOGÊNESE 1. MULTIPLICAÇÃO pré e pós-natal (a partir puberdade) 2. CRESCIMENTO 3. MATURAÇÃO 4. DIFERENCIAÇÃO • MULTIPLICAÇÃO • espermatogônias A, A2, A3, A4, I e B • CRESCIMENTO • espermatócitos I (24 dias) • Produção e armazenamento mRNA • (EX: PROTAMINAS) • MATURAÇÃO • espermatócito II (8 HORAS) • espermátides • TRADUÇÃO mRNAs • DIFERENCIAÇÃO (ESPERMIOGÊNESE) • Espermatozóide 64 dias – espermatogênese humana pontes citoplasmáticas – sincronização ESPERMATOGÊNESE ESPERMIOGÊNESE • Redução núcleo/ citoplasma • Condensação material cromossômicos (protaminas) • Acrossoma – Complexo Golgi • Centríolos – flagelo • Mitocôndrias em espiral • Membrana plasmática – domínios moleculares diferentes • Corpo residual - fagocitose Laminina Citocina proteinases degradação rompimento Cito I Cito I ØGametogênese/ Espermatogênese 1. Origem, Migração e Multiplicação células germinativas 2. Meiose células germinativas 3. Crescimento e Maturação estrutural/ funcional – espermatozoides 1. Imóveis/ incapazes fertilização 2. Maturação biológica/ recobertos glicoproteínas • Anomalias cromossômicas • Anomalias morfológicas • Anomalias movimento • 10% anormais • > 20% anormais - ↓ fertilidade REGULAÇÃO HORMONAL DA ESPERMATOGÊNESE 2.4 - SISTEMA REPRODUTIVO FEMININO E A OVOGÊNESE 4. SISTEMA REPRODUTIVO FEMININO E A OVOGÊNESE porção uterina OVOGÊNESE 1. MULTIPLICAÇÃO* Pré-natal 2. CRESCIMENTO 3. MATURAÇÃO 4. DIFERENCIAÇÃO Não Ocorre!!!!! • Ovogônias – atividade mitótica ovário 2º - 5º mês gestacional (7x106 cells) • 7º mês –2x106 ovócitos • Nascimento 6 – 8x105 ovócitos I • 40.000 puberdade (Prófase I – diplóteno) • 400 ovulados • 10-30 ovócitos ciclo menstrual – 1ª divisão meiótica 1. MULTIPLICAÇÃO OVOGÊNESE 1. MULTIPLICAÇÃO* Pré-natal 2. CRESCIMENTO 3. MATURAÇÃO 4. DIFERENCIAÇÃO Não Ocorre!!!!! OVÓCITO + CÉLULAS FOLICULARES FOLÍCULO 2. CRESCIMENTO 3. MATURAÇÃO • Pré-Natal • Ovócitos + células foliculares • Microvilosidades/ junções gap • 7 – 9º mês pré-natal: Meiose I (prófase – diplóteno) • Fator inibidor meiose • Pós-Natal • Degeneração/ atresia ovócitos • 40.000 puberdade (Meiose I) • 10-30 cada ciclo • Desenvolvimento folicular • Anfíbios/ Aves • Acúmulo vitelo • Amplificação genes/ síntese mRNA • Produção grânulos corticais • Mamíferos • Acúmulo vitelo insignificante • Amplificação genes/ síntese mRNA • Produção grânulos corticais • Ovócito/ Células foliculares • Zona pelúcida • Membrana Basal • Teca • Teca interna – secretora/ fatores angiogênicos • Teca externa – tecido fibroso • Antro • Cumulus oophorus • Corona radiata • Mitose período pré-natal - ♀♂ • Mitose pós-natal - ♂ (puberdade) • Meiose – pré-natal ♀ • Meiose – pós-natal ♂ • Gametogênese • Multiplicação ♀♂ • Crescimento ♀♂ • Maturação ♀♂ • Diferenciação ♂ • Cito I – 4 espermatozoides/ 1 ovócito + 3 corpúsculos polares • Duração ± 64 dias ♂/ décadas ♀ • Aneuploidias • Trissomia 21 (Síndrome Down) • Trissomia 18 (Síndrome Edwards) • Trissomia 13 (Síndrome de Patau) • Poliploidias • 23, X ou 23, Y + 46, XX ou 46, XY • meioseI ou meiose II • Tetraploides/ triploides • Aneuplodes/ tetraploides – Abortos! Regulação Hormonal Feminina
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