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Métodos e Técnicas em análises clínicas Théo Martins Guimarães F1889I5 Aula 1: 09/02/2023 O exame laboratorial tem por finalidade dar suporte ao corpo clínico para um bom diagnostico, seguindo a eficiência, qualidade e confiabilidade. O exame possui 3 etapas antes do diagnóstico. A fase pré-analítica (60% - 95% dos erros laboratoriais – desde a recepção até a coleta do material biológico), fase analítica (negligência, desconhecimento técnico-científico, estresse contínuo), fase pós-analítica - interpretação e conduta. TUBOS DE COLETA N COR MATERIAL OBJETIVO ANALÍTICO AÇÃO 1 Azul Citrato de Sódio Coagulograma Utilizado com objetivo de inibir a coagulação, preservando os fatores 2 Vermelho Siliconizado Exame sorológico e bioquímico Ativador de coágulo, por isso, objetiva acelerar a coagulação do sangue coletado. 3 Amarelo Ativador de coágulo + gel Coagulação e preservação celular Dois componentes fazem com que o sangue coagule mais rapidamente e, após a coagulação, o gel realiza a separação física entre a porção celular e a líquida (soro). 4 Lilás EDTA Hemograma e Plaquetas As paredes desse tubo são jateadas com EDTA, conhecido por ser o melhor anticoagulante para a preservação da morfologia celular, sendo assim, é recomendado para as rotinas de hematologia. 5 Branca EDTA Biologia Molecular IDEM 6 Verde Heparina Bioquímico Aditivo que ativa enzimas antiplaquetárias que bloqueiam a cascata da coagulação 7 Cinza Fluoreto + EDTA Glicose Funções de inibidor glicólico e anticoagulante, respectivamente, esses compostos são utilizados para análises que incluem dosagem de glicose. Importantes observações devem ser feitas antes do início da fase analítica para identificar prováveis não conformidades, como: presença de coágulos na amostra, hemólise, lipemia (grande quantidade de lipídios no sangue), local de coleta e condição clínica do paciente. Métodos e Técnicas em análises clínicas Théo Martins Guimarães F1889I5 Conceitos importantes: • VR: Média de resultados considerados dentro de uma população saudável para servir de métrica na avaliação dos demais resultados. Valor volátil e específico de cada equipamento e fabricante. • Teste qualitativo: Reagente/ Não reagente – Positivo/Negativo – Presença/Ausência. • Teste quantitativo: Métrica que mede a positividade ou negatividade do dato estudado numericamente, possibilitando a quantificação dos resultados. • Especificidade: potencialidade do teste de detectar de maneira correta indivíduos sadios, ou seja, relaciona-se a capacidade de identificar de maneira inequívoca os indivíduos não-doentes. • Sensibilidade: potencialidade do teste detectar uma ínfima porção do analito na amostra, ou seja, é a capacidade de detectar de maneira correta os pacientes doentes. • Precisão: se refere ao grau de concordância entre indicações ou valores medidos, obtidos por medições repetidas, no mesmo objeto ou em objetos similares, sob condições especificadas. • Exatidão: se refere a quão próximo um valor de uma medida está do “valor real”. • Média X: Valor alvo de um reagente de controle. • DP: Variação de desvio padrão dentro da normalidade. • Erros aleatórios: Difícil identificação. • Erros sistêmicos: Mesma alteração repetidamente em todos os resultados. Relação Exatidão x Sensibilidade Os testes com elevada especificidade possuem baixa probabilidade de apresentarem resultado falso- positivo, ou seja, de evidenciar indivíduos saudáveis como doentes. O teste com alta sensibilidade é muito utilizado para triagem diagnóstica, com possibilidade ínfima de revelar resultados falso-negativos. Essa relação é avaliada através da utilização da Curva de ROC, cuja o objetivos, é a padronização de teste laboratoriais, minimizado FP e FN. Desta forma, foram criados valores preditivos positivos e valores preditivos negativos. O Valor Preditivo Positivo (VPP) representa a probabilidade de uma pessoa doente apresentar resultado de teste laboratorial positivo. Já, o Valor Preditivo Negativo (VPN) representa a probabilidade de uma pessoa sem doença ter resultados compatíveis com a normalidade. A sensibilidade, especificidade, os VPP e VPN são determinados com base nos estudos populacionais, o que contribui para o equilíbrio e confiabilidade do teste. Métodos e Técnicas em análises clínicas Théo Martins Guimarães F1889I5 Aula 2: 16/02/2023 O quesito qualidade no geral está totalmente ligado á expectativa individual do cliente. Contudo, a real qualidade que deve ser transmitida através dos resultados laboratoriais emitidos, não está ligada com a expectativa e para isso é necessários dois controles, o interno e o externo. Controle de qualidade intralaboratorial: Possível identificar tendencias, perda de precisão e perda de exatidão. É avaliado através dos gráficos de “ Regras de Westgard “ e “ Curva de Levey-Jennings”. Dentro do laboratório de análises clínicas, trabalhamos com o controle da normalidade de +/- 2x DP da X. Gráfico de Levey-Jennings Gráfico que traz os resultados de controle em relação ao tempo. Exemplos: • Tendencia: Valores que tendenciam para um determinado lado do gráfico. • Perda de exatidão: Não ter resultados exatos e corretos – pontos deixam a esperada oscilação dentro da medida, para cima ou para baixo do gráfico. • Perda de Precisão: Reprodutibilidade de resultados – imprecisão- mesmo com resultados dentre da média, os pontos se distanciam muito entre si. 85 90 95 80 75 200 0 195 0 190 0 205 0 210 0 Métodos e Técnicas em análises clínicas Théo Martins Guimarães F1889I5 Regras de Westgard As regras de Westgard tem como principal funcionalidade interpretar os resultados do controle de Qualidade Interno, através da combinação de diversos critérios, com o objetivo de perceber o comportamento inadequado dos resultados. Através da sigla 1/2s, que significa que o controle é tolerável até 2x seu DP. • Regra 1:3s – Rejeição: Controle ultrapassou o limite de 3X do DP. Limite de rejeição para o gráfico de Levey-Jennings. • Regra R:4S – Regra de Rejeição: Diferença entre os resultados dos dois controles é maior que 4DP. • Regra de 4:1s: Quando 4 resultados de um controle excedem 4x o mesmo limite. Métodos e Técnicas em análises clínicas Théo Martins Guimarães F1889I5 • Regra 7x e 7T: Resultados de um controle que apresentam um mesmo lado durante dias consecutivos, não ultrapassando 7. • Regra 10x: Resultados variáveis, porém no mesmo lado do gráfico durante 10 dias consecutivos.
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