Prévia do material em texto
2 CENTRO UNIVERSITÁRIO MAURÍCIO DE NASSAU CURSO DE GRADUAÇÃO EM MEDICINA VETERINÁRIA PROF.ª MARIANA OLIVEIRA ARRUDA DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA EDUARDA SILVA MORAES JOSÉ ALEXANDRE LIMA MIRANDA MILLENA MARIA MENDES SOARES RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA São Luís - MA 2022 Eduarda Silva Moraes José Alexandre Lima Miranda Millena Maria Mendes Soares RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA Trabalho apresentado à disciplina de Microbiologia, do Curso de Medicina Veterinária do Centro Universitário Maurício de Nassau, para obtenção parcial de nota. Prof.ª Mariana Oliveira Arruda São Luís - MA 2022 SUMÁRIO 1. INTRODUÇÃO .................................................................................................... 04 2. OBJETIVOS ........................................................................................................ 04 3. MATERIAIS ......................................................................................................... 04 4. MÉTODOS .......................................................................................................... 05 4.1 Preparação do Esfregaço ............................................................................ 05 4.2 Método de Coloração de Gram .................................................................... 05 5. RESULTADOS .................................................................................................... 06 6. CONCLUSÃO ..................................................................................................... 06 REFERÊNCIAS ........................................................................................................ 07 1. INTRODUÇÃO A coloração de Gram é um passo de suma importância na caracterização e classificação inicial das bactérias, isso porque esse método de coloração permite que as bactérias sejam visualizadas no microscópio. Sem a coloração é impossível observá-las ou identificar sua estrutura. O método de coloração de Gram recebeu esse nome em homenagem ao patologista dinamarquês Hans Christian Joachim Gram que realizou a descoberta em 1884 e, aliás, até hoje continua sendo a mais utilizada nos laboratórios de análises clínicas e microbiologia. Através da coloração é possível identificar e diferenciar os dois principais grupos de bactérias, sejam Gram-positivas ou Gram-negativas. Neste relatório apresentaremos as atividades realizadas pelos alunos do Curso de Graduação em Medicina Veterinária na aula prática do dia 31 de agosto de 2022, relativas à disciplina de Microbiologia que atualmente é ministrada pela professora Mariana Oliveira Arruda, no Centro Universitário Maurício de Nassau. Este relatório está dividido da seguinte forma: introdução, na qual explicitamos, de forma sucinta, as atividades realizadas pelos alunos; os objetivos da aula prática realizada em laboratório, bem como os materiais e métodos que foram utilizados durante a Coloração de Gram. Por fim, apresentaremos os resultados desta experiência e nossas conclusões. 2. OBJETIVOS · Compreender conceitos básicos estudados em sala de aula; · Aprender de forma prática o método da Coloração de Gram; · Entender o uso do microscópio e sua importância para a visualização dos microrganismos; · Identificar a presença de bactérias e sua classificação; · Manipular materiais e associar a sua função a cada etapa do método; 3. MATERIAIS : · Lâmina para microscópio; · Luvas; · Álcool 70%; · Soro fisiológico; · Alça de platina; · Bico de Bunsen; · Corantes: Cristal violeta; Lugol; Álcool Fucsina; Descorante; · Óleo de imersão; · Microscópio; 4. MÉTODOS 4.1 Preparação do Esfregaço Começamos pelo método de preparação do esfregaço, limpando a lâmina com álcool. Em seguida foi feito o processo esterilização na chama do bico de Bunsen (flambagem) até a lâmina ficar rubro. Após isso adicionamos uma gota de soro fisiológico, flambamos a alça bacteriológica e deixamos esfriar próximo da chama, abrimos a placa com a cultura teste e tocamos a colônia escolhida para retirada da amostra. Esfregamos o material com movimentos de rotação da alça bacteriológica, para obter um esfregaço uniforme. Fixamos o esfregaço, passando a lâmina (lado oposto ao esfregaço) cinco vezes na chama do Bico de Bunsen (rapidamente). 4.2 Método de Coloração de Gram Após a fixação do esfregaço seguimos para o método de Coloração de Gram. Posteriormente cobriu-se o esfregaço seco com cristal violeta e deixamos por um minuto. Após o tempo determinado lavamos com água corrente, secamos a lâmina e a cobrimos com solução de lugol e deixamos por um minuto. Repetimos o procedimento de lavar em água corrente e secar. Em seguida passamos o descorante e deixamos por trinta segundos, lavamos em água corrente e cobrimos a lâmina com solução de fucsina por trinta segundos. Lavamos novamente a lâmina, cobrimos com papel toalha para a secagem. Por fim, foi colocado uma gota de óleo de imersão e observamos a lâmina no microscópio na objetiva de 100x. 5. RESULTADOS 6. CONCLUSÃO Após completarmos todas as etapas do Método de Coloração de Gram, as amostras foram isoladas e analisadas. Foi recolhida uma das amostras para estudo em laboratório e a espécie encontrada com base na análise foram bactérias Gram-Negativas do tipo Bacilos. Bacilos possuem formatos de bastonetes com coloração rosada e só é possível sua visualização por meio de microscópio. Referências: COLORAÇÃO DE GRAM - O QUE É BACTÉRIA GRAM-POSITIVA E GRAM-NEGATIVA?. Kasvi, 2019. Disponível em: <https://kasvi.com.br/bacteria-gram-positiva-gram-negativa/>. Acesso em: 04 de outubro de 2022.