Relatório de aulas práticas 1 e 2 de Análise Ambiental

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RELATÓRIO DE PRÁTICA DE ANÁLISE 
AMBIENTAL 
 
MARCIA MARIA ISSA PORTINHO 
Matrícula Nº 01373766 
 
 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
ENSINO DIGITAL 
 
RELATÓRIO 02 
DATA: 
 
24/03/2023 
 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Análise Ambiental 
 
NOME: Marcia Maria Issa Portinho MATRÍCULA: 01373766 
CURSO: Biomedicina POLO: Pituba/Mercês Salvador, Ba 
PROFESSORA ORIENTADORA: Eliane Bastos 
 
 
 
TUBULOS MULTIPLOS - TESTE PRESUNTIVO E CONFIRMÁTORIO 
 
 
 
TESTE PRESUNTIVO 
 
O objetivo do teste presuntivo é presumir se os microrganismos que cresceram e 
produziram gás a partir de lactose sejam Coliformes, porém não há outras informações 
sobre as demais características desses microrganismos, portanto é necessário à realização 
de outros testes para confirmação. 
 
A. Meios de cultura utilizados Bactérias investigadas 
Caldo Lauril Triptose (LST) 
 
 
 
Detecção e contagem de Escherichia coli e Coliformes 
totais em alimentos e água. 
 
Caldo Verde Bile Brilhante 
(VBB) 
 
Caldo de enriquecimento seletivo utilizado na 
contagem de coliformes a partir de diversas amostras. 
 
Caldo Escherichia coli (EC) 
 
Caldo de enriquecimento seletivo desenvolvido para o 
isolamento de coliformes, incluindo E. coli, de 
amostras de água e alimentos. 
ágar-ágar (Gelidium 
cartilagineum L) 
 
Também conhecido como ágar-ágar, utilizado 
principalmente para culturas sólidas de bactérias 
 
B. Proporções e diluições do teste presuntivo- procedimentos: 
Foram feitas diluições decimais, de 1/10 (para águas sabidamente boas) até 1/100.000; 
Essas diluições foram feitas em tubos contendo água tamponada estéril; 
A amostra foi agitada vigorosamente antes de se iniciar as diluições. 
Usando de tubos, foi feita a 1ª diluição (1/10) colocando 1 ml da amostra em 9 ml de água 
tamponada estéril; 
Agitou-se bem e foi transferido 1 ml para outro tubo de 9 ml da água tamponada estéril 
(1/100), prosseguindo desta maneira até obtenção de todas as diluições desejadas; 
Transferiu-se, com pipeta estéril, 1 ml da amostra para placa de Petri previamente esterilizada; 
Na placa entreaberta, foi adicionado 15 ml meio Plate Count Ágar, previamente fundido e 
 
 
 
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esterilizado em banho maria a 44-46°C; O conteúdo foi homogeneizado na placa em 
movimentos circulares em forma de 8 deitado, em torno de 10 vezes consecutivas; Quando o 
meio de cultura se solidificou, a placa foi incubada em posição invertida a 35,5°C durante 48 
horas; No final do período de incubação, foi feita a contagem das colônias com o auxílio de 
um contador de colônias. 
 
C. Fotos do teste presuntivo 
 
TESTE CONFIRMÁTORIO 
 
A. Importância dessa técnica para a identificação microbiológica da água. Como é 
realizada a leitura. 
A presença de bactérias que produzem gás a partir da fermentação da glicose em uma análise 
microbiológica da água pode indicar contaminação fecal. Isso ocorre porque essas bactérias são 
comumente encontradas no intestino de animais, incluindo humanos, e sua presença na água 
pode indicar a presença de esgoto ou outros materiais fecais. A presença de bactérias fecais na 
água pode indicar um risco para a saúde pública, uma vez que podem causar doenças. 
A leitura do teste confirmatório é realizada com base em alterações específicas que ocorrem na 
amostra quando uma substância é adicionada para identificar um determinado microrganismo. 
A leitura do teste é feita pela observação de mudanças na cor, textura ou aparência da amostra 
de água após a adição da substância de identificação. O resultado é comparado com um 
resultado positivo ou negativo padrão, e uma interpretação é feita para determinar se o 
microrganismo-alvo está presente na amostra de água. 
 
B. Relatar como é realizada a análise do número mais provável (NMP), utilizada para 
obtenção do resultado do teste confirmatório. 
A análise do número mais provável (NMP) é uma técnica utilizada para determinar a quantidade 
de microrganismos presentes em uma amostra de água para identificar a presença de 
microrganismos patogênicos na água. A análise é realizada por meio da diluição da amostra em 
uma série de tubos de ensaio, seguida de incubação e observação visual do crescimento dos 
microrganismos em cada diluição. Para calcular o número mais provável de microrganismos, 
são utilizadas tabelas de NMP específicas para cada microrganismo que está sendo pesquisado. 
Essas tabelas relacionam o número de tubos que apresentam crescimento de microrganismos 
em cada diluição com o número mais provável de microrganismos presente na amostra original. 
A partir dos resultados obtidos, é possível determinar o número mais provável de 
microrganismos presente na amostra original. 
 
 
 
 
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C. Foto do resultado dos tubos obtidos durante a aula prática. 
D. Atribuição do laudo final dessa amostra baseado na tabela de Hoskins. 
Para atribuir o laudo final de uma amostra de água baseado na tabela de Hoskins, é 
necessário comparar o número mais provável de microrganismos determinado pela 
análise do NMP com os valores de referência estabelecidos pela legislação sanitária 
para cada microrganismo. 
De acordo com a legislação brasileira, a presença de Escherichia coli na água é indicativa de 
contaminação fecal e, portanto, é considerada imprópria para consumo humano. Se o teste 
confirmatório de uma amostra de água apresentar um resultado de 3 NMP/100 mL para 
Escherichia coli, o laudo final dessa amostra seria "imprópria para consumo humano", 
conforme a tabela de Hoskins. 
 
TÉCNICA DOS TUBOS MÚLTIPLOS. COLIFORMES TERMOTOLERANTES E 
CONTAGEM PADRÃO DE BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS 
 
 
 
1. TÉCNICA DOS TUBOS MÚLTIPLOS. COLIFORMES TERMOTOLERANTES 
 
A. Importância da pesquisa das bactérias termotolerantes. 
A pesquisa das bactérias termotolerantes é importante por várias 
razões: 
Indicadores de contaminação fecal: as bactérias termotolerantes 
são frequentemente utilizadas como indicadores de 
contaminação fecal em alimentos e água, uma vez que essas 
bactérias são comumente encontradas no trato intestinal de animais de sangue quente, incluindo 
humanos. 
Indicadores de processos de pasteurização: a presença de bactérias termotolerantes em produtos 
lácteos pasteurizados pode indicar falhas no processo de pasteurização, que é projetado para 
eliminar todas as bactérias patogênicas. 
Identificação de patógenos: algumas bactérias termotolerantes podem ser patogênicas e causar 
doenças em humanos, como a Salmonella, que é um importante agente causador de doenças 
transmitidas por alimentos. 
Avaliação de tratamentos de saneamento: as bactérias termotolerantes podem ser utilizadas para 
avaliar a eficácia de tratamentos de saneamento em instalações de processamento de alimentos, 
como o uso de água quente para lavar utensílios de cozinha e superfícies. 
Em geral, a pesquisa de bactérias termotolerantes é importante para garantir a segurança dos 
alimentos e da água, bem como para avaliar a eficácia de práticas de saneamento em várias 
indústrias. 
 
B. O que das bactérias termotolerantes indicam numa análise microbiológica da água. 
As bactérias termotolerantes são um grupo de bactérias que indicam a contaminação fecal da 
água, assim como os coliformes totais. Elas são um subgrupo dos coliformes fecais e têm a 
capacidade de crescer em temperaturas elevadas (termotolerantes), o que significa que podem 
C
 
 
 
 
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sobreviver em condições adversas e permanecer na água por um período mais longo do que 
outras bactérias. 
A presença de bactérias termotolerantes na água sugere que houve contaminação por fezes 
humanasou animais, já que essas bactérias são comuns no trato intestinal de mamíferos. 
Portanto, sua detecção em uma análise microbiológica de água indica que a água pode conter 
patógenos (agentes causadores de doenças) que podem representar um risco à saúde humana se 
ingeridos. 
Assim como os coliformes totais, a presença de bactérias termotolerantes na água é um 
indicativo de que a água não atende aos padrões sanitários e pode ser imprópria para consumo 
humano, exigindo medidas corretivas para garantir a qualidade e a segurança da água. 
 
C. Meio de cultura é utilizado para a realização dessa técnica. 
O meio de cultura mais comum para a pesquisa de bactérias termotolerantes é o Caldo Lauril 
Sulfato Triptose (LST), também conhecido como Caldo lactosado Lauril sulfato. Esse meio 
contém triptose, lactose, lauril sulfato de sódio e sais minerais, e é utilizado para enriquecer e 
selecionar bactérias do grupo coliforme fecal e das bactérias termotolerantes. 
 
D. Foto dos resultados dessa técnica na aula prática. 
E. Principal bactéria representante desse grupo pesquisado nessa 
técnica. 
As bactérias termotolerantes pertencem ao grupo coliforme fecal e incluem 
várias espécies, como Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter 
aerogenes, Citrobacter freundii e outras. 
Dentre essas espécies, a Escherichia coli é a principal representante das bactérias 
termotolerantes e é frequentemente utilizada como indicador de contaminação fecal da água. A 
E. coli é uma bactéria gram-negativa e é encontrada naturalmente no trato intestinal de humanos 
e animais de sangue quente. A presença de E. coli na água é um indicativo de que houve 
contaminação fecal recente e representa um risco potencial para a saúde pública, já que pode 
ser portadora de patógenos causadores de doenças. 
 
 
2. CONTAGEM PADRÃO DE BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS 
 
A. Importância da pesquisa das bactérias heterotróficas numa análise microbiológica da 
água 
Segundo especialistas em meio ambiente, 97,5% da água 
disponível na terra é salgada, sendo, portanto, imprópria para o 
consumo. Apenas 2,493% da água é doce, mas encontra-se 
inacessível, em geleiras ou em regiões subterrâneas (nos 
chamados aquíferos). De maneira que, somente 0,007% da 
água encontrada em rios, lagos e na atmosfera está, de fato, 
disponível para o consumo. A pesquisa das bactérias 
heterotróficas numa análise microbiológica da água informa 
sobre as condições higiênicas das fontes e possíveis causas de deterioração da qualidade da 
água. 
 
D.
 
 
 
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B. Presença de bactérias numa análise microbiológica da água 
A presença de bactérias fecais na água pode indicar um risco para a saúde pública, uma vez que 
essas bactérias podem estar associadas a patógenos causadores de doenças, como bactérias do 
gênero Escherichia coli e Salmonella. Portanto, a análise microbiológica da água é uma 
ferramenta importante para garantir a segurança e a qualidade da água potável. 
 
C. Medida de tratamento para uma análise de água na qual essa contagem estaria acima 
do valor padrão 
As medidas de tratamento podem variar dependendo da fonte e do tipo de contaminação, mas 
geralmente incluem etapas de desinfecção, como a cloração, a ozonização ou a radiação UV. 
Essas etapas ajudam a matar ou inativar bactérias e outros microrganismos patogênicos 
presentes na água. 
Além disso, é importante identificar a fonte da contaminação e tomar medidas para corrigir o 
problema, como consertar vazamentos, melhorar a gestão de resíduos, monitorar a qualidade 
da água e implementar práticas de tratamento adequadas. 
É importante também, monitorar regularmente a qualidade da água para garantir que os níveis 
de contaminação permaneçam dentro dos limites estabelecidos pelas autoridades reguladoras e 
que a água seja segura para consumo humano.