Avaliação I Biologia Molecular

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18/04/2023 18:21 Avaliação I - Individual
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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:771462)
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Prova 59054295
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00
A clonagem de DNA se refere à produção, dentro de uma célula, de diversas cópias de uma 
sequência específica de um fragmento de DNA. Sobre o exposto, avalie as asserções a seguir e a 
relação proposta entre elas:
I- A clonagem de DNA depende da utilização de um vetor, do fragmento de DNA e, posteriormente, 
de um organismo hospedeiro.
PORQUE
II- O fragmento de DNA de interesse, será inserido em uma molécula de DNA genômico com 
capacidade de autorreplicação (DNA do vetor), originando o DNA recombinante. Essa inserção se dá 
através de enzimas de restrição e enzimas de ligação. 
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições falsas.
C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
Existem diferentes formas de sequenciar um genoma, sendo que cada uma se aplica dependendo 
da realidade do pesquisador em questão, podendo ser técnicas recentes, que são mais robustas e 
sofisticadas, ou então, técnicas mais antigas, que, ainda assim, demonstram um excelente resultado, 
apesar de serem mais complicadas e menos automatizadas. Sobre essas técnicas, associe os itens, 
utilizando o código a seguir:
I- Sequenciamento de Sanger. 
II- Next Generation Sequencing. 
III- Sequenciamento de terceira geração.
( ) Método de primeira geração, mais conhecido por utilizar nucleotídeos terminados de cadeia 
(ddNTP).
( ) Método que permite a análise da sequência de nucleotídeos em uma única molécula de DNA, 
sem a necessidade de amplificação dessa molécula, em tempo real.
( ) São métodos de nova geração, que não utilizam nucleotídeos terminadores de cadeia para o 
processamento das amostras.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
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A II - I - III.
B III - II - I.
C I - III - II.
D I - II - III.
A hibridização in situ foi elaborada com o objetivo de isolar e identificar fragmentos, através do 
anelamento entre duas fitas simples de origens distintas, sejam elas DNA ou RNA. Sobre essa 
técnica, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Northen-blotting.
II- Southern-blotting.
III- Hibridização in situ.
( ) Técnica que utiliza sondas de ácidos nucleicos, com marcação química, no local em que a 
molécula de interesse deve ser encontrada (RNA dentro da célula, DNA específico em cromossomos). 
( ) Técnica que avalia padrões de sequências de nucleotídeos de genes do DNA e utiliza sondas de 
DNA molde, os quais são marcados com radiação ou quimicamente. 
( ) Nesta técnica, o RNA mensageiro (mRNA) é utilizado a fim de buscar comparar situações 
distintas, como, por exemplo, utilizar amostras controle como padrão para expressão do gene de 
interesse e, assim, comparar com a amostra de interesse. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - III - II.
B I - II - III.
C III - II - I.
D II - I - III.
O advento das técnicas de biologia molecular possibilitou o estudo genético de diversos 
organismos, incluindo os seres humanos. Esses estudos têm trazido ganhos significativos no 
entendimento de doenças, síndromes e mecanismos de ação de substâncias. De acordo com a 
importância das técnicas de clonagem do DNA e construção de bibliotecas genômicas, classifique V 
para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) As enzimas de restrição são utilizadas na construção de bibliotecas de DNA, com o objetivo de 
fragmentar o DNA genômico, já que podem ser conhecidas como tesouras moleculares. 
( ) Os vetores são essenciais na técnica de clonagem e são utilizados tanto na construção de 
bibliotecas de DNA, quanto de cDNA, uma vez que carregam os fragmentos de DNA ou o cDNA 
extraído.
( ) As bibliotecas de cDNA são construídas a partir da extração do DNA de células ou tecidos, que 
posteriormente é submetido à clonagem do DNA.
( ) O mRNA é convertido em cDNA pela transcrição reversa, para então serem introduzidos em 
vetores e submetidos ao processo de clonagem para originar as bibliotecas de cDNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
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A V - V - F - V.
B V - F - V - V.
C F - F - V - F.
D V - F - F - V.
Com o desenvolvimento das técnicas de clonagem de DNA, tornou-se possível a construção de 
bibliotecas de DNA e cDNA. Sobre as bibliotecas, assinale a alternativa CORRETA:
A As bibliotecas de cDNA contêm somente os éxons de uma molécula de mRNA, que
posteriormente é convertido em cDNA pela técnica de transcrição reversa.
B As bibliotecas de mRNA são originadas a partir da fragmentação do DNA com enzimas de
restrição e, posteriormente, da clonagem do DNA.
C A biblioteca de cDNA contém éxons e íntrons, já que são clonados todos os fragmentos de
DNA, incluindo o não codificante.
D Uma biblioteca de DNA contém somente os íntrons de uma molécula de DNA, sendo
extremamente específico para identificar o conteúdo expresso em uma célula ou tecido.
Os ciclos do PCR (reação em cadeia da polimerase) são críticos para o sucesso da técnica. Em 
torno de 20-40 ciclos são programados no termociclador, a fim de se obter milhares de cópias de 
DNA. Sobre os ciclos do PCR associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Desnaturação.
II- Anelamento.
III- Extensão.
( ) Estágio em que os primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar.
( ) Estágio inicial, em que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos de cada uma das 
fitas simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em cerca de 95º C.
( ) Estágio correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA polimerase específica, denominada 
como Taq DNA polimerase, em uma temperatura de 72º C.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - III - II.
B II - I - III.
C I - II - III.
D III - II - I.
A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as 
sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de amplificar a 
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molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA:
A
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o DNA a ser
sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a uma placa de vidro
por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca de DNA, que será submetida ao PCR.
B
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado em fragmentos
de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada novo nucleotídeo
adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção ocorre em tempo real.
C
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas sólidas, nas
quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, formando uma
biblioteca de DNA.
D
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA de forma
portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos,
semelhantes a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada.
Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar o gene de um 
organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica possíveis mutações, cadeias de 
transmissão e origem da chegada do vírus a uma região específica. De acordo com as técnicas 
empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as 
falsas:
( ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizadospara o sequenciamento com o método de 
Sanger, em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência com eletroforese. 
( ) O pirosequenciamento tem como base a formação de pirofosfato a cada novo nucleotídeo 
adicionado à nova fita. 
( ) O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos testes de 
sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de sequenciamento de DNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A F - F - V.
B V - F - V.
C V - V - F.
D V - F - F.
A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da molécula a ser 
isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e poliacrilamida para a 
técnica de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:
I- A poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base nitrogenada de 
diferença. 
II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda presente no gel, representa um 
agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes. 
III- No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se movimentar, 
enquanto fragmentos maiores de DNA podem migrar facilmente no gel de agarose.
 
Assinale a alternativa CORRETA:
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A As sentenças I, II e III estão corretas.
B Somente a sentença III está correta.
C Somente a sentença II está correta.
D Somente a sentença I está correta.
O processo de replicação do DNA é relativamente simples, envolvendo diversas enzimas para 
que a síntese de uma nova fita de DNA seja realizada. Com base nas enzimas envolvidas no processo 
de replicação in vivo, analise as sentenças a seguir:
I- A enzima DNA polimerase realiza a adição de novos nucleotídeos à nova fita do DNA que está 
sendo sintetizada, podendo atuar de modo independente do sentido da fita (3'-5' ou 5'-3'), já que não 
necessitam de iniciadores.
II- As primases são enzimas responsáveis por adicionar primers (iniciadores) à fita de DNA que está 
sendo sintetizada, pois a DNA polimerase necessita de uma extremidade 3' disponível para a inserção 
do novo nucleotídeo. 
III- As enzimas, DNA girase e helicase, são as responsáveis por abrir a dupla fita de DNA, e cortar as 
pontes de hidrogênio entre os nucleotídeos, permitindo, assim, a separação da fita e síntese de uma 
nova fita.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As sentenças I e II estão corretas.
B Somente a sentença III está correta.
C Somente a sentença II está correta.
D As sentenças II e III estão corretas.
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