Avaliação I - Individual - Biologia Molecular

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27/06/2023, 20:17 Avaliação I - Individual
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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:823741)
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Prova 65698439
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 7/3
Nota 7,00
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o sumário da aula prática, a hibridização é uma técnica 
que tem o princípio da complementariedade das bases nitrogenadas dos ácidos nucleicos como base 
(adenina com timina e citosina com guanina). Essa técnica consiste, de forma básica, em localizar 
sequências de interesse no genoma de quaisquer organismos, hibridizando-as ao próprio DNA da 
espécie.
Considerando a aula prática de hibridização, assinale a alternativa CORRETA:
A O reagente DAPI é adicionado logo no início da reação, junto à sonda na técnica de FISH, sem
necessidade de incubação.
B A técnica de FISH utiliza a marcação de vários genes.
C Ao final da reação é possível visualizar as células marcadas com pontos verdes e vermelho.
D A técnica de CGH array é avaliada diretamente no microscópio, sem o uso de scanner.
A hibridização in situ foi elaborada com o objetivo de isolar e identificar fragmentos, através do 
anelamento entre duas fitas simples de origens distintas, sejam elas DNA ou RNA. Sobre essa 
técnica, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Northen-blotting.
II- Southern-blotting.
III- Hibridização in situ.
( ) Técnica que utiliza sondas de ácidos nucleicos, com marcação química, no local em que a 
molécula de interesse deve ser encontrada (RNA dentro da célula, DNA específico em cromossomos). 
( ) Técnica que avalia padrões de sequências de nucleotídeos de genes do DNA e utiliza sondas de 
DNA molde, os quais são marcados com radiação ou quimicamente. 
( ) Nesta técnica, o RNA mensageiro (mRNA) é utilizado a fim de buscar comparar situações 
distintas, como, por exemplo, utilizar amostras controle como padrão para expressão do gene de 
interesse e, assim, comparar com a amostra de interesse. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
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A I - II - III.
B II - I - III.
C I - III - II.
D III - II - I.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Conforme o sumário da prática, os 
ácidos nucleicos apresentam características estruturais específicas, que permitem que sejam isolados 
e manipulados para diversos tipos de aplicações. A técnica de hibridização in situ, por exemplo, 
baseia-se na complementaridade das fitas de DNA ou RNA, utilizando sondas fluorescentes para a 
detecção da fita complementar em uma determinada amostra. Essa técnica permite o estudo da 
expressão gênica. Outra técnica, que também tem o mesmo princípio e finalidade, é a reação em 
cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR), muito utilizada no diagnóstico de algumas 
infecções e doenças. Considerando esses aspectos, o primeiro passo para a maioria das técnicas 
citadas é o isolamento e a purificação das moléculas de DNA e RNA. O processo de extração do 
DNA pode ser dividido em etapas. 
Com relação às etapas visualizadas na aula prática, assinale a alternativa CORRETA:
A A primeira etapa é a Etapa de Ligação, em que adicionamos 250 µl de Proteinase K, 20 µl da
amostra e 20 µl do tampão de lise S.
B A segunda etapa é denominada como Etapa de Ligação, em que é adicionado álcool 96% no
eppendorf, homogeneizado, e 640 µl são transferidos para o tubo spin. 
C O principal composto adicionado na Etapa de Ligação é a Proteinase K.
D Na Etapa de Lavagem, são adicionados 210 µl de álcool 96%.
Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar o gene de um 
organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica possíveis mutações, cadeias de 
transmissão e origem da chegada do vírus a uma região específica. De acordo com as técnicas 
empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as 
falsas:
( ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizados para o sequenciamento com o método de 
Sanger, em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência com eletroforese. 
( ) O pirosequenciamento tem como base a formação de pirofosfato a cada novo nucleotídeo 
adicionado à nova fita. 
( ) O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos testes de 
sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de sequenciamento de DNA.
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Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - V - F.
B F - F - V.
C V - F - F.
D V - F - V.
As bibliotecas de DNA e cDNA são essenciais para manter e replicar um fragmento clonado por 
tempo indeterminado. Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Biblioteca de cDNA.
II- Biblioteca de DNA.
III- Hibridização em colônia.
( ) Técnica que detecta os fragmentos do DNA de interesse com sondas específicas em meio de 
cultivo sólido.
( ) Clonagem de fragmentos aleatórios do DNA, permitindo a sua identificação, isolamento e 
sequenciamento do genoma. 
( ) Clonagem de mRNAs, em que cada célula/tecido pode originar uma biblioteca diferente, 
considerando o padrão de expressão gênica específico, relacionado sempre a sua função.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - I - III.
B III - II - I.
C I - II - III.
D I - III - II.
Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com enzimas de restrição 
e clonagem em vetor. Com base nas etapas para construção de uma biblioteca de DNA, ordene os 
itens a seguir:
I- Fragmentos de DNA são inseridos em vetores idênticos e ligados através da DNA ligase. 
II- Clivado do DNA com uma enzima de restrição, formando centenas a milhares de fragmentos de 
DNA.
III- Inserção do vetor em células hospedeiras, produzindo a clonagem dos diferentes fragmentos. 
IV- Extrair e isolar o DNA genômico de uma célula, tecido ou até mesmo de um organismo.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - IV - III - II.
B I - III - II - IV.
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C IV - II - III - I.
D IV - II - I - III.
O qPCR (PCR em tempo real) utiliza corantes fluorescentes ou sondas específicas, que emitem 
fluorescência quando se encontram ligados ou intercalados à fita de DNA no meio de reação da PCR. 
Considerando esse fator, a fluorescência, é proporcional à quantidade de material disponível para 
iniciar a amplificação. Sobre os parâmetros para quantificação do qPCR, avalie as asserções a seguir 
e a relação proposta entre elas:
I- O threshold, também conhecido como linha de corte, demonstra o momento em que a fluorescência 
apresentada está livre de ruídos, sendo essencialmente a representação da amplificação da amostra 
teste.
PORQUE
II- O equipamento é capaz de determinar em que momento a fluorescência detectada é proveniente 
apenas das amostras que estão sendo amplificadas e, assim, determinar a linha de corte.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
D As asserções I e II são proposições falsas.
As endonucleases de restrição são produzidas naturalmente por diversas bactérias. De acordo 
com essas enzimas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) As enzimas de restrição são utilizadas para fragmentar o DNA em regiões específicas, 
permitindo a manipulação do DNA.
( ) Cada bactéria produz uma enzima de restrição específica, que pode ser isolada e purificada a 
partir de colônias dessas bactérias.
( ) As enzimas de restrição não reconhecem sequências específicas, apresentando regiões de 
clivagem aleatórias de 4 a 8 nucleotídeos.
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Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A F - V - F.
B F - F - V.
C V - F - F.
D V - V - F.
O advento das técnicas de biologia molecular possibilitou o estudo genético de diversos 
organismos, incluindo os seres humanos. Esses estudos têm trazido ganhos significativos no 
entendimento de doenças, síndromes e mecanismos de ação de substâncias. De acordo com a 
importância das técnicas de clonagem do DNA e construção de bibliotecas genômicas, classifique V 
para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) As enzimas de restrição são utilizadas na construção de bibliotecas de DNA, com o objetivo de 
fragmentar o DNA genômico, já que podem ser conhecidas como tesouras moleculares. 
( ) Os vetores são essenciais na técnica de clonagem e são utilizados tanto na construção de 
bibliotecas de DNA, quanto de cDNA, uma vez que carregam os fragmentos de DNA ou o cDNA 
extraído.
( ) As bibliotecas de cDNA são construídas a partir da extração do DNA de células ou tecidos, que 
posteriormente é submetido à clonagem do DNA.
( ) O mRNA é convertido em cDNA pela transcrição reversa, para então serem introduzidos em 
vetores e submetidos ao processo de clonagem para originar as bibliotecas de cDNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - V - F - V.
B V - F - F - V.
C V - F - V - V.
D F - F - V - F.
O mais recente avanço no campo de sequenciamento de DNA foi o desenvolvimento de 
plataformas portáteis capazes de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos. 
Um exemplo dessas plataformas é a MinION. Sobre a plataforma MinION, avalie as asserções a 
seguir e a relação proposta entre elas:
I- Para que seja realizado o sequenciamento por meio da plataforma MinION, as amostras a serem 
sequenciadas são ligadas a enzimas de processamento. Essas enzimas induzem o fragmento de DNA 
a passar pelo nano poro, onde as variações da corrente elétrica são detectadas.
PORQUE
II- Sendo conhecidas as variações características de cada nucleotídeo, a sequência de nucleotídeos é 
formada rapidamente.
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Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições falsas.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
C As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
D A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
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