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Aula Prática 5 – FUNGOS PATOGÊNICOS (Respostas) EXERCÍCIO 1 (metodologia aplicada): Pesquisa de Malassezia sp. por cultura em meio Sabouraud adicionado de Cloranfenicol, Cicloheximida e 1% v/v de Azeite de Oliva. Macroscopia: Colônias de aspecto leveduriforme, liso e cremosas, com perfil lipofílico, de cor branca a creme. Microscopia: Leveduras únicas ou com brotamento simples, marcados por colarete, agrupadas. EXERCÍCIO 2: Observação de Culturas e Lâminas de fungos causadores de Micoses. 2.1. Examinar ao microscópio material raspado de pele de pacientes com Pitiriase versicolor: Desenhar as estruturas observadas. Microscopia: Leveduras únicas ou com brotamento simples, podendo estar agrupadas, origirando pseudo-hifas e hifas curtas. 2.2. Buscar on-line e/ou observar e descrever as características coloniais, observar e desenhar as estruturas microscópicas dos seguintes fungos: Microsporum canis Macroscopia: Colônias com aspecto algodonoso ou velutíneo, de cor branca a creme, podendo apresentar pigmento difusível no meio de cultura de cor amarelo-acastanhada, o reverso apresenta a mesma coloração do pigmento; Microscopia: Hifas hialinas septadas, com presença de macroconídeos fusiformes, de parede espessa e grande número de septações (acima de 5), em alguns casos, podemos também observar microconídeos diminutos fixadas perpendicularmente as hifas (em menor número em comparação aos macroconídeos). Epidermophyton floccosum Macroscopia: Colônias com aspecto algodonoso ou velutíneo, de cor branca a creme, o reverso pode apresentar cor acastanhada clara. Microscopia: Hifas hialinas septadas, com presença de células conidiogênicas carregando ao menos dois conídios com duas a três células (aspecto de raquete de tênis). Conídios de parede espessa, septados, e ápice claviforme. Sporothrix schenckii (Fase M) Macroscopia: (25-28°C) – Colônias (miceliais) de início algodonoso que evoluem para velutíneo, de cor branca, que transitam para pigmentação preta ou castanha no centro e bordas acinzentadas, reverso acastanhado; (35-37°C) Colônias de cor branca a creme, aspecto liso/cremoso e aderido ao meio de cultura (colônias leveduriformes); Microscopia: (25-28°C) Hifas hialinas, septadas, de parede fina, delicadas e conídios ovais ou piriformes dispostos em forma de margaridana extremidade do conidióforo; (35-37°C) Leveduras em formato de charuto ou garrafas de boliche, podendo apresentar brotamentos ao redor da célula mãe. Histoplasma capsulatum (Fase M) Macroscopia: (25-28°C) – Colônias (miceliais) de início algodonoso que evoluem para velutíneo, de cor branca a cinza, que transitam para pigmentação castanha no centro e bordas brancas, reverso acastanhado ou preto; (35-37°C) Colônias de cor branca a creme, aspecto liso e aderido ao meio de cultura; Microscopia: (25-28°C) Hifas hialinas, septadas, de parede fina, delicadas, com microconídios piriformes aderidos as hifas ou soltos, presença em maior número de macroconídeos arredondados, de parede espessa e com espículas (aspecto genérico de “fruto da mamona”); (35-37°C) Células leveduriformes podendo apresentar brotamento simples ou raramente múltiplo. Cryptococcus neoformans Macroscopia: Colônias com aspecto mucoide de cor branca a creme, lisos e podendo apresentar pigmentação acastanhada (substrato diferencial em diagnóstico); Microscopia: Leveduras encapsuladas (cápsula grande), podendo apresentar brotamento simples.