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Preserva o sêmen reduzindo seu metabolismo, pela diminuição da temperatura -15°C (RESFRIADO) ou 5°C (REFRIGERADO) - Permite o transporte por 24h com perda restrita da viabilidade - Exige a utilização de diluentes -[ ] 50 x 10 sptz/mL. Diluição • Dose total: 500x106 spz viáveis • Mínimo 300 milhões íntegros • 25 a 50 x106 spz/mL = diluição final Diluição > 1:3=1+2 • Volume inseminante máximo-máximo = 20- 30mL, ideal trabalhar com 15mL • Antibiótico somente se permanecer a temperatura ambiente ou a 15Cº. A 5ºC não necessita antibiótico. Sêmen refrigerado geralmente trabalha com dose total de 1x109 Sptz • IMPORTANTE: 500milhões de sptz móveis no momento da entrega. CÁLCULO • Ex1: Garanhão ejaculou 35 ml e concentração de 200 x 106 SPTZ/mL. Motilidade: 70% • Ex 2: Garanhão ejaculou 50 ml e concentração de 50 x 106 SPTZ/mL. Motilidade: 90% Princípios do resfriamento do ejaculado: A redução da temperatura do sêmen: • Auxilia na sua conservação por diminuição do crescimento bacteriano. Redução do metabolismo espermático e consequente controle da acidificação do meio diluidor. Diminuição da formação de espécies reativas de oxigênio, redução do O₂ favorecendo o metabolismo espermático anaeróbico e não aeróbico. A fertilidade é mantida por 24-48 horas, após este tempo a taxa de prenhez diminui O sêmen armazenado a 15°C: maior longevidade espermática, melhores índices de prenhez e previne danos a membrana plasmática (pelo choque frio) O armazenamento do sêmen diluído em baixas temperaturas prolonga a viabilidade espermática Manter o potencial fertilizante do sêmen por vários dias e mais tempo será o uso do sêmen transportado. O sêmen fica resfriado a 15-20ºC, ou refrigerado a 4 - 6ºC – ideal é 5°C. Curva de resfriamento • Evitar o choque térmico??? Pode ser mito Muitos garanhões toleram a diluição e ser colocado imediato na geladeira • Resfriamento 0,3-0,5C° entre 20°C e 8°C • Retirar presença de ar do frasco para não ocasionar estresse oxidativo também é mito. Os ROS se formam pelo próprio 02 no conteúdo Choque Térmico • Alterações ⇓ motilidade Danos membrana plasmática Danos membrana acrossomal Metabolismo reduzido Perda componentes celulares. Transporte de Sêmen Temperatura até destino: próxima a +5°C . Vários tipos comerciais de containers • Permanentes ou descartáveis (ambiente). Containers: Modelos nacionais: Botu-Box e Max-Semen Express: TF de 15°C e armazenamento por 24h. Botutainer: TF de 5°C e armazenamento por 48h. Transporte do ejaculado: Coleta e manipulação do ejaculado do garanhão. Transporte. _____________________________________ 18.07.22 INSEMINAÇÃO DA ÉGUA: É necessário um controle mais intenso na égua. Acompanhamento do desenvolvimento folicular, sincronização no momento mais próximo a ovulação para receber o sêmen. Recebe em 2 seringas com diluente, sêmen que foi coletado 24h antes (resfriado). Ovulação deve ocorrer no máximo 48h após a inseminação. Cérvix fica relaxada no estro de 4-8cm e fica mais curta – facilita a inseminação. Dedo indicador para auxiliar. Sêmen não precisa estar aquecido para IA. Volume: ≤20ml Região perineal limpa. Deposição: - Introduzir a pipeta na cérvix - Aplicar o sêmen no corpo do útero. Não necessita aquecer para fazer IA - Viabilidade por 24h. Momento da Inseminação: Égua com sinais externos de cio: Égua levanta a cauda, exterioriza o clitóris, afasta os membros posteriores, urina, abaixa um pouco a traseira. Folículo dominante mais de 35mm (palpação transretal e US) – consistência da cérvix e útero – tônus uterino e cervical. Tamanho do folículo, Edema uterino. Não deve apresentar corpo lúteo. hCG: 1500UI-2500 UI I.V (OV 36-40h). 1-1,5mg deslorelina IM (ov. 30-40h) – análogos de GnRH. +++ IA: 24h e 30h após o indutor. DINÂMICA FOLICULAR: ≥13mm Crescimento 22-25mm Divergência - Dominância ± 35mm pré-ovulatório.
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