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Biotecnologia 🔬 1 Biotecnologia 🔬 Procedimentos que envolvem organismos que visam resolver algum problema Tradicional - fermentação (vários produtos) Moderna Engenharia genetica Fertilização in vitro Transgênicos - Os modernos apresentam limitações devido a Bioética (deve ser justificado) Inóculo = Fermentação Leveduras Reino: Fungi Domínio: Eukarya Pluricelular e eucarionte Composição: plasmidios (em algumas, complexo de golgi, núcleo, mitocôndria, ribossomo, retículo endoplasmatico Saccharomyces cerevice (S. Cerevisice) resistente ao álcool e elevadas concentrações de açúcar e pH acido Bacterias Reino: Monera Domínio: Bacteria Biotecnologia 🔬 2 Unicelular e procarionte (nucleoide → DNA, ribossomo → síntese proteica, parede celular, membrana plasmática, plasmódio → genes de resistencia (não são essenciais ao crescimento), DNA extraciomossonico) Formatos: bastonetes/bacillus, cocos, espiralado, vibrião Escherichia coil. (E. Colei) bacteria mais usada em biotecnologia Fáceis de cultivar (se adaptam rapido) - dobra de população em 20 min Aeróbias facultativas Atua como “reserva” de material genético Biotecnologia 🔬 3 Modificações genéticas em MO DNA —transcrição → RNA —Tradução → ptns → fenótipo Repressão: impede que o DNA seja transcrito. Efeito Crab tree - presença de oxigênio intensifica Modelo de operan lac Indução gênica: Formas de alterar geneticamente 1. Crossing over: pedaço de DNA exógeno se liga ao DNA celular 2. Transferência vertical (que passa de pai pra filho), células da msm geração trocando genes 3. Transferência horizontal: ocorre em biofilmes 4. Assimilação de plasmídeo: associado a fatores de virulência; o plasmídeo e capaz de se multiplicar e passar para outra bacteria (uma troca de DNA plasmideal) 5. Transdução: bacteriófagos Biotecnologia 🔬 4 [S} + X → [P] + nX S = substrato X = células Biotecnologia 🔬 5 P = produto esperado nX = crescimento de células Fermentação Alcóolica Reação: Glicose → etanol + CO2 + energia Microorganismo: S. Cerevisae Substratos: Glicose Sacarose (hidrólise enzimática → inverta Amido (amilase) Frutose Celulose Vantagens da fermentação para S. Ceereviase: Energia para sobrevivência e crescimento Competição Aplicações: Bebidas alcoólicas, combustíveis, panificação (CO2) Condições: Processo anaeróbio, mas e bom aerar um pouco o meio para a célula sintetize alguns nutrientes e compostos que favorecem seu crescimento Fermentação Lática Microrganismos: Lactobacillus spp., Streptococcus spp (bactérias de acido lático (BAL)) Reação: Piruvato + NADH ↔ Ácido Lático + NAD+ Caracterização: aerotolerantes Estritamente fermentativas Biotecnologia 🔬 6 Substratos: Lactose Glicose Galactose Produtos lácteos → ácido lático Condição: abaixa o pH → 4,6 - 4,7 (ponto isoeletrico) → gera uma condição desagradável para vários micro-organismos Aplicação: iogurte, queijos; salame e presunto Parma, conservas vegetais Fermentação Acética Reação ocorre em 2 estágios: 1) fermentação alcoólica → etanol + CO2 2) fermentação acética: Etanol + O2 → ac. Acético + H2O Produtos: Ácido Acético Microrganismos (bactérias acéticas): Acetobacter spp., Gluconobacter spp Aplicação: produção de vinagre, produção de bebidas alcoólicas como vinho e sidra, onde a fermentação alcoólica inicial é seguida pela oxidação do álcool etílico para produzir ácido acético Biotecnologia 🔬 7 Fermentação cítrica Condição: aeróbia Microorganismo: Fungo Aspergillus niger Substrato: sacarose (açúcar purificado, para que a via do fungo seja atingida) Nitrogênio (peptona/ureia) Sulfatos Fermentação Propiônica Reação: Ácido Lático + CO2 ↔ Ácido Propiônico + H2O Produtos: Ácido Propiônico Micro-organismos: bactérias propionicas (Propionibacterium) → esse e bom Clostridium Aplicação: ácido propiônico contribui para a formação de olhaduras lisas em alguns queijos Síntese de bioativos Bioativos = composto natural que tem uma atividade de interesse pigmentos, aromas, conservantes, antixoxidantes etc Pluralidade de MO (esses MO tem que ser GRAS) Produto direto da fermentação ou molécula biossintetizada Produção de proteínas Inserir plasmídeo na célula hospedeira Biotecnologia 🔬 8 são pequenos segmentos de DNA circular encontrados em muitas bactérias e outros microrganismos (ex. leveduras) podem conter genes que conferem vantagens adaptativas às células hospedeiras, como resistência a antibióticos, capacidade de degradar certos compostos, produção de toxinas ou enzimas específicas, entre outros Vantagens: Manipula o MO para que ela produza ptns de interessa podem conferir mais resistência a antibióticos MO de fácil reprodução genética Produtos: protease Amilase celulase Renina Proteínas medicinais: hormônio de crescimentos, insulina Produtos de interesse para a indústria de alimentos que podem ser produzidos por E. Coli: 1. Aminoácidos e vitaminas: treonina, lisina e metionina, e vitaminas, como a vitamina C. 2. Enzimas: proteases, amilases e lipases, que desempenham um papel importante na produção de alimentos processados. 3. Edulcorantes: aspartame, um adoçante artificial amplamente utilizado na indústria de alimentos e bebidas. 4. Ácidos orgânicos: o ácido cítrico e o ácido láctico, que são amplamente utilizados na indústria alimentícia como aditivos e acidulantes. Quais as vantagens desse tipo de produção? 1. Eficiência: As bactérias E. coli têm uma taxa de crescimento rápida e são capazes de produzir grandes quantidades de compostos desejados em um curto período de Biotecnologia 🔬 9 tempo, tornando o processo de produção mais eficiente. 2. Controle e personalização: A engenharia genética permite um controle preciso sobre os genes inseridos nas E. coli, permitindo a produção de compostos específicos de interesse e personalizados de acordo com as necessidades da indústria alimentícia. 3. Redução de custos: A produção de compostos de interesse utilizando E. coli geneticamente modificadas pode ser mais econômica do que os métodos tradicionais de produção, uma vez que as bactérias podem utilizar matérias-primas mais simples e acessíveis. 4. Sustentabilidade: A produção de compostos de interesse através de bactérias geneticamente modificadas pode ter um menor impacto ambiental em comparação com os métodos convencionais de produção, pois pode envolver processos mais eficientes e sustentáveis.