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Bases Biológicas Raira Machado Rodrigues 1 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal OBJETIVO O objetivo dessa atividade prática é a identificação do DNA extraído a partir de material vegetal em solução de lise. METODOLOGIA De inicio picamos a cebola em pedaços bem pequenos. Coloquei ¾ de água ( natural) em um copo, depois acrescentei uma colher (sopa) de detergente incolor e uma colher de chá de sal de cozinha, depois misturei bem com auxilio de uma colher. Depois a cebola já picada em pedaços pequenos, colocamos dentro do copo com a solução de lise. Após Retiramos do banho-maria e resfriamos rapidamente , colocando o copo num vasilhame com o gelo durante 5 minutos. Filtramos a mistura com a peneira, recolhendo o filtrado em um copo limpo. Adicionamos ao filtrado cerca de 100mL de álcool gelado, deixando-o escorrer vagarosamente pela borda. Foi formando duas fases. Materiais utilizados 2 Raira Rodrigues (RR) - De inicio picamos a cebola em pedaços bem pequenos. Coloquei ¾ de água ( natural) em um copo, depois acrescentei uma colher (sopa) de detergente incolor e uma colher de chá de sal de cozinha, depois misturei bem com auxilio de uma colher. Depois a cebola já picada em pedaços pequenos, colocamos dentro do copo com a solução de lise. Após Retiramos do banho-maria e resfriamos rapidamente , colocando o copo num vasilhame com o gelo durante 5 minutos. Filtramos a mistura com a peneira, recolhendo o filtrado em um copo limpo. Adicionamos ao filtrado cerca de 100mL de álcool gelado, deixando-o escorrer vagarosamente pela borda. Foi formando duas fases. PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal RESULTADOS E DISCUSSÃO Depois que o procedimento é realizado é possível visualizar facilmente pequenos grumos esbranquiçados que são os filamentos de DNA. Figura 3, procedimento no gelo. Figura 1, preparando o procedimento. Figura 2, em banho maria em água quente. Figura 4, extração do DNA. Figura 2, procedimento em banho Maria em água quente. 3 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal Conclusões Bulbo Da cebola foi usado por apresentar células grandes, que se rompem quando a cebola é picada. Além do DNA ser mais ampliado. Detergente Dissolve as membranas lipídicas além de desintegrar os núcleos e os cromossomos das células da cebola, liberando o DNA. Com a ruptura das membranas, o conteúdo celular, incluindo DNA e proteínas, soltam-se e dispersam- se na solução. Um dos componentes do detergente, o lalril sulfato de sódio, desnatura as proteínas, separando-as do DNA cromossômico. A adição de sal No início da experiência, proporcionou ao DNA um ambiente favorável. O sal contribui com íons positivos Na+ que neutralizam a carga negativa do DNA. Nessa forma, O DNA precipita na solução aquosa. O álcool gelado além de proporcionar uma mistura heterogenia (duas fases), em ambiente salino, faz com que as moléculas de DNA se aglutinem, formando uma massa filamentosa e esbranquiçada. O DNA não se dissolve no álcool, na concentração e na temperatura que se usou neste experimento. Pelo fato do DNA ser menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares, ele se localiza na interface da fase alcoólica e aquosa. PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas OBJETIVO O objetivo dessa atividade prática é observar as alterações sofridas nas proteínas do ovo (albumina) e do leite (caseína) submetendo elas a diferentes tratamentos para que o processo de desnaturação aconteça, ou seja, a estrutura de uma proteína sendo mudada. METODOLOGIA Desnaturação da proteína da clara do ovo. • Peguei 3 ovos, separei a clara da gema, Coloquei uma gema em cada copo . • No primeiro copo Já com a clara no copo adicionei 2 colheres de água fervente. • No segundo copo com a clara adicionei 2 colheres de vinagre. • E no terceiro copo com a clara adicionei 2 colheres de Álcool. Após alguns minutos da para observar a diferença na textura e vai ficando esbranquiçada, a clara do ovo sofre uma alteração que é visível. Desnaturação da Caseína ( proteínas do leite) • coloquei 50ml de Leite integral em 2 copos ( recipientes transparente) • coloquei 50ml de leite, adicionei 20 gotas do suco limão. • No segundo copo já com o 50ml de leite adicione 1 colher de vinagre. Aguardei alguns minutos, observei que o leite coalhou. 5 PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas Ingredientes • 6 copos ou recipientes de vidro transparente • 3 ovos • Álcool • Vinagre • Água fervente • 100 ml leite integral • 1 limão • 1 copo medidor • 1 colher de sopa • 30cm de fio barbante • 1 pedaço de pano 20x20 • 1 par de luvas de procedimento 1 Figura do leite em preparação. 2 Figura do leite coalhado. 2 figura do procedimento finalizado. 1 figura do procedimento em preparação PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas RESULTADOS E DISCUSSÃO A desnaturação é um processo no qual moléculas biológicas perdem suas funções, devido a alguma mudança no meio, seja em altas temperaturas, variações de PH, entre outras. Ela acontece comumente com proteínas. Figura 1 Resultado final. Figura 2 Resultado final. PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas CONCLUSÕES Aprendi que a desnaturação proteica é a perda da estrutura tridimensional da proteína, ou seja, ela perde a sua forma original. Aprendi na prática formas de desnaturação, por meio da alteração de PH, temperatura e hidrofóbia.
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