Avaliacao I - BIOLOGIA MOLECULAR

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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:823741)
Peso da Avaliação 1,50
Prova 67095937
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00
Existem diferentes formas de sequenciar um genoma, sendo que cada uma se aplica dependendo 
da realidade do pesquisador em questão, podendo ser técnicas recentes, que são mais robustas e 
sofisticadas, ou então, técnicas mais antigas, que, ainda assim, demonstram um excelente resultado, 
apesar de serem mais complicadas e menos automatizadas. Sobre essas técnicas, associe os itens, 
utilizando o código a seguir:
I- Sequenciamento de Sanger. 
II- Next Generation Sequencing. 
III- Sequenciamento de terceira geração.
( ) Método de primeira geração, mais conhecido por utilizar nucleotídeos terminados de cadeia 
(ddNTP).
( ) Método que permite a análise da sequência de nucleotídeos em uma única molécula de DNA, 
sem a necessidade de amplificação dessa molécula, em tempo real.
( ) São métodos de nova geração, que não utilizam nucleotídeos terminadores de cadeia para o 
processamento das amostras.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - III - II.
B II - I - III.
C III - II - I.
D I - II - III.
O sequenciamento de DNA permite a identificação de qual nucleotídeo ocupa cada posição na 
fita de uma molécula ou fragmento de DNA. As primeiras técnicas que permitiram sequenciar o DNA 
começaram a ser desenvolvidas na década de 70, com o método desenvolvido por Sanger. Sobre o 
método de Sanger, assinale a alternativa CORRETA:
A Os didesoxinucleotídeos são ineficazes para a técnicas de Sanger, sendo utilizados somente os
primers e diversas fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, com a mesma extremidade 5'.
B A técnica de Sanger, utiliza terminadores de sequência em réplicas de DNA de uma fita molde
diferenciada.
C Os didesoxinucleotídeos são similares aos primers ou iniciadores, já que iniciam a reação em
diferentes terminações 3'.
 VOLTAR
A+ Alterar modo de visualização
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D
São utilizados iniciadores (primers), fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, ou seja, com a
mesma extremidade 5' e diferentes terminações 3', devido à inserção dos didesoxinucleotídeos,
que são nucleotídeos terminadores de cadeia (ddNTP: ddATP, ddTTP, ddCTP e ddGTP).
Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com enzimas de restrição 
e clonagem em vetor. Com base nas etapas para construção de uma biblioteca de DNA, ordene os 
itens a seguir:
I- Fragmentos de DNA são inseridos em vetores idênticos e ligados através da DNA ligase. 
II- Clivado do DNA com uma enzima de restrição, formando centenas a milhares de fragmentos de 
DNA.
III- Inserção do vetor em células hospedeiras, produzindo a clonagem dos diferentes fragmentos. 
IV- Extrair e isolar o DNA genômico de uma célula, tecido ou até mesmo de um organismo.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - IV - III - II.
B I - III - II - IV.
C IV - II - I - III.
D IV - II - III - I.
O advento das técnicas de biologia molecular possibilitou o estudo genético de diversos 
organismos, incluindo os seres humanos. Esses estudos têm trazido ganhos significativos no 
entendimento de doenças, síndromes e mecanismos de ação de substâncias. De acordo com a 
importância das técnicas de clonagem do DNA e construção de bibliotecas genômicas, classifique V 
para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) As enzimas de restrição são utilizadas na construção de bibliotecas de DNA, com o objetivo de 
fragmentar o DNA genômico, já que podem ser conhecidas como tesouras moleculares. 
( ) Os vetores são essenciais na técnica de clonagem e são utilizados tanto na construção de 
bibliotecas de DNA, quanto de cDNA, uma vez que carregam os fragmentos de DNA ou o cDNA 
extraído.
( ) As bibliotecas de cDNA são construídas a partir da extração do DNA de células ou tecidos, que 
posteriormente é submetido à clonagem do DNA.
( ) O mRNA é convertido em cDNA pela transcrição reversa, para então serem introduzidos em 
vetores e submetidos ao processo de clonagem para originar as bibliotecas de cDNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - F - V - V.
B V - F - F - V.
C F - F - V - F.
D V - V - F - V.
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As endonucleases de restrição são produzidas naturalmente por diversas bactérias. De acordo 
com essas enzimas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) As enzimas de restrição são utilizadas para fragmentar o DNA em regiões específicas, 
permitindo a manipulação do DNA.
( ) Cada bactéria produz uma enzima de restrição específica, que pode ser isolada e purificada a 
partir de colônias dessas bactérias.
( ) As enzimas de restrição não reconhecem sequências específicas, apresentando regiões de 
clivagem aleatórias de 4 a 8 nucleotídeos.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - F - F.
B F - F - V.
C F - V - F.
D V - V - F.
Para detecção do DNA em bibliotecas de DNA, uma membrana é colocada em contato com as 
colônias na placa logo após o crescimento das colônias bacterianas em placas de cultivo contendo 
meio sólido. Algumas células irão se aderir à membrana, formando uma impressão das colônias 
presentes na placa. Em seguida, as células aderidas sofrem lise celular, a fim de liberar o DNA, que 
permanece aderido à membrana. Por fim, a membrana é incubada com sondas de hibridização 
marcadas, complementares à porção do gene de interesse, permitindo a visualização da posição dos 
clones que contêm o fragmento de interesse. Sobre a técnica exposta, assinale a alternativa 
CORRETA:
A Hibridização em colônia.
B Hibridização in situ.
C Southern-blot.
D Northen-blot.
As bibliotecas de DNA e cDNA são essenciais para manter e replicar um fragmento clonado por 
tempo indeterminado. Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Biblioteca de cDNA.
II- Biblioteca de DNA.
III- Hibridização em colônia.
( ) Técnica que detecta os fragmentos do DNA de interesse com sondas específicas em meio de 
cultivo sólido.
( ) Clonagem de fragmentos aleatórios do DNA, permitindo a sua identificação, isolamento e 
sequenciamento do genoma. 
( ) Clonagem de mRNAs, em que cada célula/tecido pode originar uma biblioteca diferente, 
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considerando o padrão de expressão gênica específico, relacionado sempre a sua função.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - I - III.
B I - III - II.
C III - II - I.
D I - II - III.
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa prática 
depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares após a desnaturação 
(período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de fusão do DNA, ou seja, o 
momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e a abertura da dupla fita de DNA, varia 
de um organismo para outro. O ponto de fusão do DNA também depende da quantidade de pares de 
base G-C e A-T, sendo que, quanto mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre 
porque o par G-C é mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta 
apenas com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o padrão de 
hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de fusão, outros fatores podem 
interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses fatores, analise as opções a seguir:
I- Temperatura de fusão.
II- pH alto para produzir condições de hibridização.
III- Concentração de cátions monovalentes.
IV- Presença de solventes orgânicos.Assinale a alternativa CORRETA:
A As opções I, II, III e IV estão corretas.
B Somente a opção III está correta.
C Somente a opção I está correta.
D Somente a opção II está correta.
O uso de bibliotecas de DNA ou cDNA permitem a manutenção e replicação do material 
genético em grandes coleções mantidas em colônias de bactérias, nas quais um fragmento específico 
de DNA ou um gene podemser procurados. Sobre as bibliotecas de DNA e cDNA, avalie as 
asserções a seguir e a relação proposta entre elas:
I- A bactéria E. coli é a principal célula hospedeira utilizada no processo de clonagem em vetores, 
inclusive na construção de bibliotecas de DNA e cDNA, em que cada bactéria irá internalizar apenas 
um vetor.
 
PORQUE
II- Assim que o vetor é inserido, em condições adequadas de diluição e meio de cultivo, em poucas 
horas corre a formação de diversos clones dos fragmentos inseridos, sendo cada um encontrado em 
uma colônia diferente de crescimento bacteriano.
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Assinale a alternativa CORRETA:
A A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
C As asserções I e II são proposições falsas.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o sumário da aula prática, a hibridização é uma técnica 
que tem o princípio da complementariedade das bases nitrogenadas dos ácidos nucleicos como base 
(adenina com timina e citosina com guanina). Essa técnica consiste, de forma básica, em localizar 
sequências de interesse no genoma de quaisquer organismos, hibridizando-as ao próprio DNA da 
espécie.
Considerando a aula prática de hibridização, assinale a alternativa CORRETA:
A Ao final da reação é possível visualizar as células marcadas com pontos verdes e vermelho.
B A técnica de FISH utiliza a marcação de vários genes.
C A técnica de CGH array é avaliada diretamente no microscópio, sem o uso de scanner.
D O reagente DAPI é adicionado logo no início da reação, junto à sonda na técnica de FISH, sem
necessidade de incubação.
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