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Fecundação Fecundação é o processo de fusão dos gametas fenimino (ovócito) e masculino (espermatóziode) para a geração de um indivíduo novo Ovócito secundário em metáfase II Espermatozóide Onde ocorre a fecundação? Fecundação ocorre geralmente na ampola da tuba uterina Trato reprodutor feminino Tecido que regula o transporte e a maturidade de ambos gametas 1. Maturação epididimária No epidídimo: Túbulos seminíferos Epidídimo Armazenamento e maturação - Potencialização da motilidade; - Aquisição de sítios de reconhecimento ao oócito = capacidade fertilizante; - Estoque de espermatozóides; Homem: espermatozóide fica 12 dias no epidídimo! 2. Capacitação 2. Capacitação Normal = espermatozóide ficar até 3 dias no trato reprodutor feminimo; Cavalos e cachorros = até uma semana Nas aves = até 1 mês! 3. Como passar pela corona radiata? Hiperativação + Enzima hialuronidase Digerir a matriz extracelular das células da corona radiata 4. Como passar pela zona pelúcida? - Z. pelúcida: barreira para fertilização entre espécies; - Composta por 3 glicoproteínas: ZP1, ZP2 e ZP3 Ligação do espermatozóide à ZP3 Indução da reação acrossômica exocitose da vesícula dependente de (Ca2+) Liberação de enzimas proteolíticas que abrem um “buraco” na zona pelúcida para a passagem do espermatozóide Kierszenbaum, 2004 4. Como passar pela zona pelúcida? 5. Fusão de membranas plasmáticas Espaço perivitelino Zona pelúcida Ovócito em metáfase II 6. Bloqueio à polispermia = reação cortical Liberação de enzimas pelos grânulos corticais no espaço perivitelino ovócito impenetrável a outros espermatozóides! bloqueio mecânico a polispermia Onda de Ca2+: disparada por uma enzima (fosfolipase C -> IP3) presente no citoplasma espermatozóide 7. Onda de Ca2+ promove a ativação do zigoto 1. Reação cortical: liberação do conteúdo dos grânulos corticais bloqueio à poliespermia; 2. Conclusão da 2a divisão meiótica pelo ovócito = 2o. corpúsculo polar + ovócito definitivo ou óvulo; 3. Recrutamento de RNAm maternos para polissomos = início da tradução; Passos pós-entrada do espermatozóide em mamíferos: 1. Migração dos pronúleos: ~12h 2. Descompactação do prónucleo masculino: DNA + protaminas = compactação por pontes de dissulfeto = Glutationa no citoplasma do ovócito promove a descompactação da cromatina por redução dessas pontes de dissulfeto; 3. Centríolo do espermatozóide sofre duplicação = forma o 1o. fuso mitótico -> 2 núcleos se encontram -> cromatina condensa em cromossomo. Portanto, núcleo diplóide verdadeiro apenas no embrião de 2 células! 4. Mitocôndrias paternas são degradadas: todas de origem materna! 8. Fusão do material genético 8. Fusão do material genético Pergunta valendo 1 ponto na nota final! Os 2 núcleos haplóides são equivalentes? Clivagem Clivagem Divisões mitóticas que dividem o volume citoplasmático em várias células uninucleadas = BLASTÔMEROS Clivagem Mitose típica Não há aumento do volume citoplasmático = divisão em células cada vez menores Ciclo celular modificado = bifásico (fases M e S) Não ocorre fases G1 e G2 (de crescimento celular) Clivagem Mas até quando…? Ciclo celular bifásico: - 15 a 20 divisões; - Produz blastômeros idênticos e de forma exponencial; -Divisões rápidas e sincronizadas! “Estágio de meia-blástula” (mid-blastula stage): 1. As fases G1 e G2 são adicionadas ao ciclo celular (componenes citoplasmáticos estão esgotados, é hora de começar a produzi-los!); 2. Perde a sincronicidade nas divisões! 3. O embrião inicia a transcrição de novos RNA mensageiros -> necessários para a gastrulação; Mas até quando…? Padrões de clivagem Determinado por: 1.Quantidade de proteína de vitelo no citoplasma; vitelo inibe clivagem! Pólo vegetal = rico em vitelo Pólo animal = pobre em vitelo 2.Fatores do citoplasma que influenciam o ângulo do fuso mitótico; 1. Holoblástica (completa) Padrões de clivagem Possuem pouco vitelo! Desenvolvem… um estágio larval voraz! ou placenta Padrões de clivagem 2. Meroblástica (incompleta) Possuem muito vitelo! clivagem dos mamíferos Particularidades das clivagens em mamíferos: 1. Inicia 1 dia após a fertilização; 2. Divisões mais lentas (12 a 24h); 3. Rotacional: -1a divisão: meridional -2a divisão: 1 blastômero = meridional 1 blastômero = equatorial 4. Falta de sincronização nas divisões precoces. Não dividem ao mesmo tempo e pode haver números ímpares de células! 5. Genoma do embrião é ativado no estágio de clivagem; 6. Compactação; Compactação Ocorre na transição do estágio de 8 células para a 3ª divisão; As células ficam mais “amontoadas” = bola compactada de células; MÓRULA 1. Estágio do embrião de 16 células idênticas! 2. Último estágio antes de iniciar a diferenciação celular!! Primeira diferenciação celular no embrião Blastocisto inicial Blastocisto final Embrioblasto (massa interna de células) Zona pelúcida degenerando Cavidade blastocistica Trofoblasto 1. TROFOBLASTO -> dará origem ao córion (porção embrionária da placenta); 2. EMBRIOBLASTO (ou Massa Celular Interna) -> dará origem ao embrião + saco vitelino + âmnio + alantóide; Cavitação Células do trofoblasto -> fluído dentro da mórula -> CAVIDADE BLASTOCÍSTICA Blastocisto inicial Blastocisto final Embrioblasto (massa interna de células) Zona pelúcida degenerando Cavidade blastocistica Trofoblasto Compactação Blastocisto A perda da zona pelúcida… A perda da zona pelúcida… Massa Celular Interna (MCI) Trofoblasto* Blastocela Figura do embrião humano na fase de blastocisto EMBRIOBLASTO TROFOBLASTO CAVIDADE BLASTOCÍSTICA Formamos o BLASTOCISTO! 1a semana de gestação Fecundação Primeira Clivagem Estágio Estágio Estágio Mórula Blastocisto Implantação e formação da placenta Ovário Oviduto Compactação “Cavitação” Eclosão Útero 1a semana de gestação
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