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Tópicos:
- Importância do isolamento de microrganismos em meio de
cultura;
- Classificação dos microrganismos em relação ao oxigênio;
- Técnicas de isolamento de microrganismos aeróbios e
anaeróbios.
Isolamento de microrganismos anaeróbios 
e aeróbios em meio de cultura. 
Importância do Isolamento Microbiano
Crescimento em 
caldo
?
?
?
?
?
?
Obtenção de colônias isoladas (cultura pura) de bactérias e fungos
Importância do Isolamento Microbiano
Fungos filamentosos
Fungos 
Leveduriformes
Bactérias
1. Esgotamento do inóculo por estrias;
2. Método “spread plate”;
3. Método “pour plate”.
3
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS
1. Esgotamento do inóculo por estrias;
2. Método “spread plate”;
3. Método “pour plate”.
3
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS
Função da alça de platina (alça de inoculação)
Esgotamento do inóculo por estrias
Estrutura Esterilização
Semeadura na superfície
Ao inocular a amostra com auxílio da alça de platina em um ponto do ágar, quanto maior o
número de estrias, mais os microrganismos são espalhados. Nas últimas estrias, menos
microrganismos serão depositados na superfície do ágar gerando colônias isoladas.
Esgotamento do inóculo por estrias
(1) Estria simples (2) Estria composta
Colônias
1. Esgotamento do inóculo por estrias;
2. Método “spread plate”;
3. Método “pour plate”.
3
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS
Spread plate colônias crescem 
somente na superfície do Agar. 
Incubação
Plaqueamento :Método de semeadura por espalhamento – “Spread plate”. 
Spread plate com alça de Drigalski
1. Esgotamento do inóculo por estrias;
2. Método “spread plate”;
3. Método “pour plate”.
3
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS
Pour plate: Colônias crescem 
na superfície e no interior do 
Agar.
Incubação
Plaqueamento: Método de semeadura em profundidade – “Pour plate”. 
Isolamento pelo método de 
Pour plate.
Técnica de “spread plate”
Técnica de “pour plate”
Técnicas de “spread plate” e “pour plate”
Aerobiose
X
Anaerobiose
Métodos de Isolamento Microbiano
1 2 3 4 5
Classificação dos microrganismos em relação ao oxigênio
1- Aeróbios estritos
2- Anaeróbios estritos
3- Aeróbios Facultativos
4- Microaerófilos
5- Anaeróbios aerotolerantesT
e
n
s
ã
o
 d
e
 O
2
Alta
Baixa
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS AERÓBIOS
01. Meios de cultura redutores
02. Técnica de Zeissler
03. Técnica de Gaspak
3
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS ANERÓBIOS
01. Meios de cultura redutores
02. Técnica de Zeissler
03. Técnica de Gaspak
3
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS ANERÓBIOS
Meios de cultura redutores
Meios contendo agentes redutores que proporcionam ambiente anaeróbico.
Exemplos:
-Meio Tioglicolato (tioglicolato sódico e cisteína)
-Ágar Azida ou ágar azida sangue (azida sódica)
-Ágar para anaeróbios seg. Brewer (tioglicolato sódico, sulfoxilatoformaldeído e cistina)
Enterococcus 
faecalis em ágar 
azida
01. Meios de cultura redutores
02. Técnica de Zeissler
03. Técnica de Gaspak
3
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS ANERÓBIOS
Isolamento de microrganismos anaeróbios
Técnica ZEISSLER.
01. Meios de cultura redutores
02. Técnica de Zeissler
03. Técnica de Gaspak
3
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS ANERÓBIOS
Isolamento de microrganismos anaeróbios
Técnica GASPAK.
18
Manutenção de bactérias 
anaeróbias
16

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