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Microbiologia Clínica Comissão de controle de infecção hospitalar (CCIH): prevenir e controlar as infecções hospitalares entre outras coisas. Oque é infecção hospitalar? É toda infecção adquirida durante a internação hospitalar ou a algum procedimento realizado no hospital como cirurgias. Capela – utilizada para manipulação de agentes químicos, preparo de reagente. Fluxo laminar – utilizado no preparo de medicamentos ou qualquer atividade onde o material deve estar livre de contaminação. Cabine de segurança biológica classe I – utilizada par micro-organismos do grupo 1,2 e 3 de risco e moderado risco. Cabine de segurança biológica classe II - utilizada par micro-organismos de risco moderado, protege o operador, produto e o ambiente. Cabine de segurança biológica classe III – oferece o mais alto grau de proteção ao operador e ao meio ambiente, o trabalho é realizado com luvas de borracha que estão presas à câmara. EPIS – cabine de segurança + EPI (luva, jaleco, óculos, máscara, pró-pés). Níveis de segurança 1. Não causam doença ao homem e animais; 2. Associados a doença (Salmonella sp); 3. Associados a danos potencialmente letais (microbacterias); 4. Associados a alto risco de transmissão por aerossóis ou riscos de transmissão desconhecida (Ebola). Exemplo: Máscara N95 – nível de segurança 3 – Cultura de microbactérias; Meio de culturas – Técnicas de Semeaduras Semeadura quantitativa com alça calibrada Urina TRI trato respiratorio inferior Contagem de UFC/MI Ponta de cateter (técinca de rolamento feito no ágar sangue, descoberto por MAKI). Esgotamento (qualitativa) Swabs (ferida de ouvidos, vagial, etc) Obtenção de colônias isoladas Crescimento microbiano = associação ao crescimento de uma população de células (uma célula dará origem a duas ao fim de um certo tempo, tempo de geração ou de duplicação) Colônias = grupo de células que podem ser visualizadas sem o microscópio. Transporte de materiais Stuart e amies Secreção ouvido, ferida, vaginal Cary blair fezes Líquor – temperatura ambiente Urina – gelado Fatores químicos Oxigênio extremamente importantes no desenvolvimento microbiano. Os organismos são classificados em: Aeróbio: (necessitam de O2); Microaerófilo (crescimento somente aeróbico, necessitam de O2 mas em níveis menores); Anaeróbios: Aerotolerantes (não necessitam de O2, mas crescem melhor sem ele); Facultativos (não necessitam de O2, mas crescem melhor sem ele); Meios de cultura: Material nutriente preparado em laboratório para o crescimento de MO. Cultura: crescimento e multiplicação dos MO em um meio de cultura. Critérios utilizados para crescimento de MO em meio de cultura: Conter nutrientes corretos pra que o MO possa crescer; Conter quantidade de água necessária; Ter PH ajustado; Ser estéril; Conter quantidade específica de oxigênio; Ser incubado em temperatura ideal de crescimento da cultura. Quanto a consistência ou estado físico do meio de cultura: Meios líquidos – são aqueles que os nutrientes acham-se dissolvidos em solução aquosa Meios sólidos: estes possuem na sua composição, nutrientes e ágar na concentração 1,0 a 2,0%. Ágar é uma substância polissacarídea extraída de algas marinhas e não é degradado pelos MO. Bactérias quanto sua moroflogia. Coloração de gram – permite identificar grupos bacterianos com base na estrutura da parede celular. Através da coloração é possível identificar e diferenciar os dois principais grupos de bactérias, sejam Gram-positivas (parede celular espessa, com coloração arroxeada) ou Gram-negativas (parede celular mais delgada, com coloração avermelhada). Quais são os corantes que semeam a coloraçao de gram ? Violeta genciana – lugol – álcool – fucsina. Meios de cultura diferencial x seletivo Seletivo – elaborados para impedir o crescimento de bactérias indesejáveis e favorecer o crescimemto do M.O. de interesse. Ex: ágar SS. Diferencial – promove uma mudança na coloração das colônias de bactérias, possibilitando a distinção de vários gêneros e espécies de microrganismos. Meio de Coprocultura- S.S , MacCONKEY , Selenito. Quais são as Bacterias que temos que pesquisar na coprocultura convencional ? Escherichia Coli patogenica para paciente imunocompromeitos; Salmonella; Arminia. Caracteritisca morfotintorial Bactérias Escherichia coli Bacilo gram – Estreptococcus Cocos gram + em cadeias Staphilococcus cocos gram + em caixo Neisseria Diplococo Gram – (meio intra e extra celular) Exemplo de enterobacteria : Enterobacter, Klebsiella. Líquidos nobres qual a sequência de semeadura ? Chocolate, sangue e MacKonkey. Qual a Técnica utilizada? Esgotamento. Outro exame que faz fora a cultura para esse líquidos nobres? Bacterioscopio, através da coloração de Gram. Qual exame bioquímico pedido no líquor? Proteína e glicose. Infecção por meningite bacteriana – glicose abaixa e a proteína aumenta Parte Hematologia pro liquor - (é feito a contagem global) para ver o quanto de hemácia e o tanto de leucócito – acima do valor de referência tem que fazer análise de sedimento (contagem diferencial). Bactérias mais frequentes no liquor de um adulto Streptoccocus pneumoniae; Neisseria meningitidis; Haemophilus influenzae. Quadro de meningite de recém nascido – Streptoccous agalact (agar sangue -beta hemolítico), E.coli o Bactérias prováveis desses meios: Liquido ascético -Enterobacterias Liquido pleural – Estreptoccous pneumoniae. Liquido sinovial – Streptoccos aureus. Infecção vaginal – Lactobacilos Infecções + comum vaginal = Candida albicans e trichomonas. Candida – é uma levedura oportunista que causa infecção. Caracteristica da secreção vaginal da Candida – espessa, branca. Como é feito o diagnóstico? Bacterioscopia (coloração de gram) e exame direto a fresco (cresce tanto no sangue quanto no chocolate), mas se o médico pedir cultura para fungo tem que semear no sabouraud. Tricomonas – prozoario; Diagnostico – exame direto a fresco (soro = secreção). Gardnerella vaginalis Característica: coco bacilo gram variável. Característica no gram: não tem microbiota e não tem leococito). Diagnostico: através da coloração de gram (bacterocopio). Ela não cresce em cultura (clue cells formato). Chamydia: Particularidade: intra celular, ela é gram – , e não cresce em meios convencionais só cresce em cultura de células. Como é feito o diagnóstico ? imunocromatográfico ou teste de biologia molecular. Relaciona a infertilidade. Neisseira gonorreia Diagnostico: bactereocopio e cultura. Característica morfotintorial: diplococos gram - . Não cresce no MacConkey pois é fastidiosa. (intra e extracelular). Espiroquetas Treponema pallidum: são bactérias espirais. Não cora pelo gram, ele cora pelo fontana tribondeau, e também tem um exame direto do material feito por microscopia de campo escuro. Qual é o diagnostico ? VDRL (teste de triagem). Se o VDRL der positivo preciso fazer o teste de FTA- ABS.