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QUESTÕES DE APROFUNDAMENTO DE CONTEÚDO AULA COCOS GRAM POSITIVOS – IDENTIFICAÇÃO DOS GÊNEROS STAPHYLOCOCCUS E MICROCOCCUS 1. Quais as características gerais do gênero Staphylococcus (família, coloração de Gram, arranjos, motilidade, tamanho, crescimento e cor)? Família Staphylococcaceae Gram positivo Arranjados em cachos Motilidade negativa Cor branca a amarelo dourado 2. Staphylococcus aureus é um microrganismo presente em várias manifestações clinicas. Determine: Quais as doenças que pode produzir, os sítios de infecção que pode acometer, o seu habitat normal e as principais via de transmissão? Doenças: produz pústulas, abscessos, furúnculos; Causa: impetigo, artrite, cistite, osteomielite, meningite, intoxicação alimentar, etc Sítios de infecção: orofaringe, urina, sangue, feridas cirúrgicas, ponta de cateter, dreno, abscessos, furúnculos, etc. Habitat normal: pele, principalmente nariz e períneo Principais vias de transmissão: contato e vias aéreas 3. Quais as enzimas extracelulares que o Staphylococcus aureus pode possuir? Detalhe cada uma delas. Beta-lactamase: hidrolisa o anel beta-lactâmico de penicilinas Catalase: conversão do peróxido de hidrogênio em água e oxigênio. Coagulase: capaz de transformar o fibrinogênio em fibrina; resistência a opsonização e a fagocitose. DNAse: hidrólise do DNA Nucleases: hidrólise do DNA e RNA. Estafiloquinase: quebram o coágulo; facilitam a disseminação da infecção para os tecidos adjacentes. Hialuronidase: despolimeriza o ácido hialurônico existente nos espaços intercelulares, condicionando uma diminuição de viscosidade e propiciando a difusão do microrganismo ou de suas toxinas. 4. Qual a principal característica da enterotoxina que provoca a Intoxicação Alimentar Estafilocócica? Termoresistente a 100ºC por 30 minutos e resistente à hidrólise de enzimas gástricas. 5. O que é a síndrome do choque tóxico? Quais os seus sinais e sintomas? Única PTSAGs (pirogênicas toxina superantígenos) capaz de passar através de mucosas; síndrome do choque tóxico afeta 3 sistemas ou mais. - Gastrointestinal: vômitos e diarreia (no início da doença) - Muscular: mialgia severa, CPK ≥ 2X o valor normal - “Mucosas”: hiperemia vaginal, orofaringe e conjuntival - Renal: ureia ≥ 2X o valor normal; piúria sem ITU - Hepático: bilirrubuna e TGO TGP ≥ 2X o valor normal - Hematológico: plaquetopenia - Sistema Nervoso Central: desorientação 6. Quais as doenças que a toxina esfoliativa pode provocar? Impetigo bolhoso e síndrome da pele escaldada. 7. Como é feito o teste da catalase e qual a sua importância? Pingar peroxido de hidrogênio em lâmina com a bactéria. - Formação de bolhas indica ser a família Staphylococcaceae (Ex.: Staphylococcus spp., Micrococcus spp.) - Sem formação de bolhas indica ser a família Streptococcaceae (Ex.: Enterococcus spp., Streptococcus spp.). 8. Como Staphylococcus aureus é identificado laboratorialmente? Cocos Gram positivos Cachos Amarelo dourado Coagulase positiva Catalase positiva DNAse positiva Manitol positivo Novobiocinasensível Polimixina sensível Hemolisina positiva em algumas cepas (pode ter beta-hemólise) 9. Explique o fundamento do teste do Manitol e da DNase? Meio ágar manitol salgado - uma viragem do vermelho original do meio para amarelo indica degradação do manitol com formação de ácido. Tem como indicador de ácido o vermelho de fenol. Meio ágar Dnase - a enzima desoxiribonuclease irá degradar o ácido nucléico (DNA). Prova positiva - zona clara ao redor do crescimento bacteriano (revelador o ácido clorídrico 1N). Prova positiva - coloração róseo claro acrescentando ao meio original azul de ortoluidina a 0,1%. 10. São dois tipos de coagulase que o Staphylococcus aureus pode promover. Quais são essas coagulases e como são feitas a sua determinação? - Coagulase livre: é secretada extracelularmente e reage com uma substância presente no plasma (Fator de reação da coagulase-CRF) para formar um complexo que reage com o fibrinogênio, formando fibrina. Uma reação positiva é representada pela formação de um coágulo de qualquer intensidade. A leitura do teste após um tempo mais prolongado de incubação pode levar a resultados falsos negativos devido à presença de fibrinolisina ou estafiloquinase. - Coagulase fixa/conjugada/ligada: Clumping fator: verifica se o microrganismo possui a coagulase na superfície da parede celular. Positivo: aparecimento de grumos O teste positivo ocorre dentro de 15-20 segundos, e deve ser considerado negativo após 2-3 minutos. 11. Qual a Identificação laboratorial do Staphylococcus epidermidis? Cocos Gram positivo Cachos DNAse negativa Coagulase negativa Catalase positiva Manitol negativo Branco Sensível a novobiocina Sensível a polimixina 12. Qual a sua associação como patógeno oportunista? Associado com sepse de dispositivos (cateteres e prótese) 13. Qual a identificação laboratorial do Staphylococcus saprophyticcus? Cocos gram positivo Cachos DNAse negativa Coagulase negativa Catalase positiva Manitol negativo Branco Resistente a novobiocina Resistente a polimixina 14. Como é realizado e qual a interpretação o teste da Novobiocina? São utilizados discos padronizados contendo 5µg de novobiocina. A leitura é feita medindo-se o diâmetro do halo de inibição ao redor do disco após incubação de 18-24 horas. Prova positiva (resistência) – Halo menor ou igual a 14mm. 15. Qual o principal sitio de infecção relacionado com Staphylococcus saprophyticcus? Trato urinário 16. Como se comporta os gêneros Micrococcus e Staphylococccus frente aos discos de Furazolidona e bacitracina? Micrococcus: Furazolidona resistente Bacitracina sensível Staphylococcus: Furazolidona sensível Bacitracina resistente 17. Cocos Gram positivos em tétrade, catalase positiva, oxidase positiva devem ser testados com discos de furazolidona para identificar Micrococcus.
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