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● processo que precede a divisão celular e através do qual são geradas cópias idênticas das moléculas de DNA presentes na célula-mãe obs: toda vez que uma célula divide a informação genética precisa ser transmitida às células filhas características semiconservativa semiconservativa ● cada molécula nova de DNA seria formada por uma cadeia da molécula original de um nova conservativa ● a molécula de DNA original apenas servia de molde para formação de novas, que seriam formadas por duas novas cadeias de nucleotídeos dispersiva ● cada molécula-filha seria formada por pedaços da molécula-mãe e por pedaços novos Replicação do DNA bidirecional ● DNA é aberto em locais específicos chamados origens de replicação, que formam “bolhas de replicação” e avançam para os dois lados simultaneamente ○ por isso é bidirecional ● a medida que vão avançando se encontram até duplicar o DNA inteiro semidescontínua ● a síntese do DNA ocorre no sentido 5’-->3’ e é semidescontínua ● composta por 1 fita contínua (líder) e 1 fita descontínua (retardada) ○ a formação da fita contínua ocorre no mesmo sentido do movimento da forquilha ○ a formação da fita descontínua ocorre no sentido contrário ao movimento da forquilha etapas da replicação 1. iniciação ● reconhecimento das origens de replicação ○ sequências específicas muito ricas em pares A=T ● abertura da dupla-hélice ➔ helicase ● quebra as ligações de H que unem as duas fitas da molécula de DNA ● promove a abertura da hélice de DNA, separando-o em 2 fitas simples para que possa sofrer replicação enzimas da replicação helicase; SSB primase DNA polimerase DNA ligase topoisomerase proteína cinta ● reconhece a origem de replicação e é responsável pelo movimento para frente da forquilha ● recebe ajuda da DNA topoisomerase que desenrola a cadeia diminuindo a tensão à medida que a DNA helicase avança ➔ SSB ● mantém a estabilidade da forquilha ● são proteínas que se ligam à fita simples de DNA, impedindo que estas voltem a se ligar e protegendo-as da degradação pela ação e nucleases ➔ primase ● ribonucleoproteína que sintetiza pequenos primers (iniciadores) de RNA que fornecem o terminal 3’OH necessário para a DNA polimerase iniciar a síntese ● primossomo → primase + helicase ➔ DNA polimerase ● sintetiza o DNA ● necessitam sempre de um DNA molde e uma sequência iniciadora ● a síntese de DNA ocorre pela adição de nucleotídeos a extremidade 3’OH da cadeia em crescimento ○ sentido 5’→3’ obs: propriedades das DNA polimerases ● necessita de um molde ● necessita de um iniciador ● atividade polimerásica 5’ → 3’ ● atividade exonucleásica (correção) ● síntese do iniciador (primer) ● ligação da DNA polimerase 2. extensão ou alongamento ● síntese contínua da fita líder ○ primase age uma vez ● síntese descontínua da fita retardada ○ primase age várias vezes ○ após a síntese da fita retardada, ficam pequenos espaços entre os fragmentos (primers de RNA) obs: ambas as fitas são sintetizadas simultaneamente, porém em sentidos opostos ➔ DNA polimerase ● remove o primer de RNA, substituindo por DNA ○ correção ➔ DNA ligase ● em seguida, a DNApol, se solta e a DNA ligase liga os dois fragmentos de Okazaki ○ une os fragmentos ● catalisa a formação de uma ligação fosfodiéster entre dois fragmentos de Okazaki, deixando a fita retardada contínua, e depois se solta da fita 3. finalização ● encontro de forquilhas adjacentes ● sequências específicas ○ incorporação de telômeros ➔ telomerase ● atividade varia com o tipo celular ○ células somáticas normais: diminui ○ células tumorais: aumenta ○ células tronco: aumenta ➔ DNA topoisomerase ● induz quebras na fita de DNA, permitindo o giro da cadeia quebrada sobre a cadeia intacta e, posteriormente, liga novamente
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