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Thaís Regina Lemfers Medicina Veterinária, 3º semestre – 2013/01 Controle de Micro-organismos Controle: manuseio correto de micro-organismos Aplicação: • manutenção a níveis aceitáveis; • destruição ou remoção (total/parcial); • destruição “seletiva”; • fins profiláticos (prevenção). Agentes de controle: produtos químicos e fatores físicos. E qual é o meio adequado? Isto irá depender da natureza do agente e do material infectado. Técnicas: ⱡ Temperatura: Alta e baixa ⱡ Produtos químicos: tóxicos (-cidas e –státicos), modificam as condições ambientais ⱡ Separação física de organismos ⱡ Radiação: Ionizante e não ionizante Mecanismo de Inativação de micro-organismos: Desnaturação de proteínas: calor e álcool Inativação de proteínas através da ação de oxidantes: oxidantes químicos: cloro, ozônio, etc. E radiação ionizante Destruição do gradiente de prótons na membrana: acidos orgânicos utilizados na conservação de alimentos Alteração da permeabilidade da membrana: amônias quaternárias - CONCEITOS: ANTIMICROBIANOS: Determinam a morte de micro-organismos ou previnem seu crescimento. Antibacterianos, antivirais, antifúngicos, antiprotozoários Bactericida, viricida, fungicida ->> MORTE Bacteriostático, fungistático ->> INIBIÇÃO DE CRESCIMENTO ESTERILIZAÇÃO (esterilizante): • Processo de destruição de todos os micro-organismos presentes em um material (esporos); É o processo que promove completa eliminação ou destruição de todas as formas de microrganismos DESINFECÇÃO (desinfetante): o Processo de redução da carga microbiana presente em um objeto inanimado (bancadas, vidrarias, ambiente). AGENTE GERMICIDA: Agente químico que mata as formas vegetativas, mas não necessariamente suas formas esporuladas. Sinônimo de desinfetante; não são necessariamente patógenos. ANTI-SEPSIA (anti-séptico): Processo de redução da carga microbiana presente em um tecido vivo (pele, olhos, mucosas). SANITIZANTE (saneador): Processo de redução de 99,9% da carga microbiana infectante em objetos inanimados (equip. laticínio). Ex: cloro, ácido peracético. Thaís Regina Lemfers Medicina Veterinária, 3º semestre – 2013/01 MORTE MICROBIANA: • Incapacidade de se reproduzir. Atividade antimicrobiana: Influências: - população microbiana; - concentração da população microbiana; - tempo de exposição ao antimicrobiano; - temperatura de exposição; - natureza do antimicrobiano; - natureza do micro-organismo MECANISMOS DE DESTRUIÇÃO: Objetivo: matar ou inibir o micro-organismo • Mecanismo ↔estrutura microbiana Local de ação: citoplasma (DNA, ribossomos) -> inibe reprodução membrana citoplasmática (integridade, passagem de subst.) e parede celular (proteção) -> morte AGENTES FÍSICOS Temperatura Calor úmido: • desnaturação e coagulação de proteínas vitais (ENZIMAS): temperatura de exposição: MENOR e tempo de exposição: MENOR Formas: a) vapor d’água: esterilização sob pressão, prático e seguro, temperaturas maiores Ex: AUTOCLAVE, p = 15 lb/pol e T = 121ºC b) água fervente: 15’ - morte de micro-organismos vegetativos, não esteriliza (endosporos 20hs, vírus 30’). Ex: recipiente com água em ebulição c) pasteurização: 1860 – Louis Pasteur, células vegetativas, não esteriliza (endosporos), 71,7ºC / 15 s. →resfriamento rápido e UHT: 140ºC / 5 s Calor seco: Formas: a) incineração: rotina laboratorial, material: alças e agulhas de semeadura bacteriológica e materiais contaminados. Baixas temperaturas: a) congelamento: importância – psicrófilas, ex: freezer (-20ºC), nitrogênio líquido (-196ºC) Radiação Consiste em expor os materiais a uma fonte de radiação Eficiência depende de fatores: comprimento de onda, intensidade, tempo e distância da fonte Pode ser de dois tipos: radiação ionizante (Raios X e gama, são radiações de pequeno comprimento de onda e alta penetração - na presença de oxigênio geram radicais hidroxila livres, altamente tóxicos para as células. Aplicações: Esterilização de utensílios hospitalares e laboratoriais, esterilização de alimentos – Raios X e gama podem penetrar pacotes de produtos e esterilizar o seu interior) e radiação não ionizante (Raios UV, é bastante letal, porém tem baixo poder de penetração, não atravessa vidros, filmes sujos e outros materiais, sua maior eficiência se dá em um comprimento de onda de 260 nm e altera o DNA pela formação de dímeros de timina. Aplicações: Esterilização de ar, água, filmes plásticos e ambientes de trabalho e possui limitações de uso devido à baixa penetrabilidade). Filtração Consiste na remoção/retenção mecânica de microrganismos Emprega filtros com poros extremamente pequenos (0,2 a 0,45 um) Filtração de soluções líquidas termolábeis e gases (ex: toxinas, vacinas, enzimas) Filtros: celulose, acetato, policarbonato, e outros materiais sintéticos; + Usados são os de 0,2 um, que removem os microrganismos de soluções e do ar (exceto vírus) Na filtração do ar utiliza-se os filtros HEPA (retém 99,97% das partículas com até 0,3µm, é muito usado em cabines de segurança biológica e hospitais) Dessecação Consiste na remoção de água dos microrganismos, interrupção do metabolismo, seu efeito é bacteriostático, utilizado na conservação de alimentos. Ex: massas, leite em pó, etc. Liofilização Remoção da água em alto vácuo e sob baixas temperaturas, os microrganismos permanecem viáveis, porém, latentes. Efetivo para conservação prolongada. Ex: alimentos, drogas, culturas Thaís Regina Lemfers Medicina Veterinária, 3º semestre – 2013/01 Microbiocida: eliminação (morte) dos micro-organismos Microbiostático: inibe o crescimento e multiplicação microbiana AGENTES QUÍMICOS: Características de um agente químico ideal: – Atividade microbiana; – Solubilidade; – Estabilidade; – Ausência de toxidade; – Homogeneidade; – Inativação mínima por material estranho. – Atividade em temperaturas ambiente ou corporal; – Poder de penetração; – Ausência de poderes corrosivos e tintoriais; – Poder desodorizante; – Capacidade detergente; – Disponibilidade e baixo custo Compostos fenólicos Álcoois É o único que sendo composto possui melhor eficiência, quando diluído em água. O álcool rompe membranas e desnatura proteínas – desnaturação depende da água. Células vegetativas morrem após cinco minutos de contato. Limitações: volatiliza rápido, inflamável. Halogênios Metais pesados Detergentes Sais de sódio ou potássio de ácidos graxos de cadeia longa solúveis em água; • Gordura + bases forte; • Pouca ação desinfetante, apenas remoção de micro-organismos da superfície Catiônicos: Desinfecção e anti-sepsias; Produtos de limpeza industrial e domiciliar; Altamente tóxicos; Afetam Gram+ e Gram-; Bactericida ou bacteriostático; Alteram a permeabilidade da membrana, pois interagem com os fosfolipídeos; Inibem a respiração e a glicólise de formas vegetativas de bactérias; Derivados de amônia são muito utilizados (compostos quaternários de amônio); Aniônicos: Detergentes comuns; Toxicidade moderada; Eliminam bactérias Gram+; Biodegradável; Não- iônico: Baixa toxicidade, levemente irritante para pele e olhos; Cosméticos, produtos de limpeza, etc; misturados com aniônicos; Óxido de etileno Propriolactona Glutaraldeído Formaldeído *Segue em branco os que foram citados no primeiro slide, mas não havia contextualização nos slides. *Esta aula foi ministrada pelos conteúdos dos seminários realizados, sendo assim não consta explicações, exemplos extras ou detalhes – apenas o que estava nos slides.
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