QUEST II BIOLOGIA MOLECULAR

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Curso
	BIOLOGIA MOLECULAR APLICADA A BIOMEDICINA
	Teste
	QUESTIONÁRIO UNIDADE II
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	10/23 
	Status
	Completada
· Pergunta 1
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	
A técnica de western blotting consiste na detecção de proteínas específicas em amostras de lisados celulares ou amostras de tecidos. Com base nessa técnica, julgue as afirmativas e marque a alternativa CORRETA.
 
I- Os passos para a elaboração dessa técnica podem ser resumidos em cinco etapas: (1) extração e quantificação das proteínas; (2) fracionamento das proteínas da amostra em um gel de poliacrilamida; (3) transferências dessas proteínas para uma membrana; (4) incubação da membrana com um anticorpo para detectar a proteína específica a ser analisada; e (5) revelação dessa membrana para análise dos dados.
 
II- Diversos métodos espectroscópicos são utilizados para quantificar proteínas em uma solução. O ensaio de Bradford é o mais utilizado e apresenta diversas vantagens em relação aos demais, como a rapidez, a não exigência de aquecimento e a alta sensibilidade para baixas concentrações de proteínas. O método de Bradford se baseia na mudança de cor do corante Coomassie Blue G-250, em solução ácida (cor azulada) para cor avermelhada na presença de proteínas. As interações hidrofóbicas e iônicas estabilizam o complexo proteína-corante.
 
III- Para separar as proteínas de uma amostra homogênea, a técnica mais utilizada é a eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE). Inicialmente, prepara-se o gel de SDS-poliacrilamida, que será uma matriz inerte através da qual as proteínas poderão migrar. O gel é preparado pela polimerização de monômeros de acrilamida e o tamanho dos poros do gel pode ser ajustado variando a concentração da acrilamida adicionada para retardar a migração da sua proteína de interesse. As proteínas podem possuir cargas positivas ou negativas, dependendo das cargas dos aminoácidos que as compõem.
 
IV- Para visualizar uma proteína de interesse, é utilizado um anticorpo específico que vai reagir com um epitopo da proteína, formando um complexo anticorpo antígeno. Esse anticorpo é denominado anticorpo primário, que pode ser policlonal (reconhece mais de um epitopo) ou monoclonal (reconhece apenas um epitopo da proteína de interesse) e é geralmente obtido apenas em camundongo ou em coelho.
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	a. 
Apenas II e IV são incorretas.
	Respostas:
	a. 
Apenas II e IV são incorretas.
	
	b. 
Todas são incorretas.
	
	c. 
Apenas IV é incorreta.
	
	d. 
Apenas I e II são corretas.
	
	e. 
Todas são corretas.
	Comentário da resposta:
	Resposta: A
Comentário: A técnica de western bloting serve para a detecção de proteínas, para isso as proteínas devem ser extraídas da amostra, separadas em gel de poliacrilamida, transferidas para uma membrana e incubadas com anticorpos primários e secundários para posterior revelação.
	
	
	
· Pergunta 2
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	O cariótipo é o processo de parear e ordenar os cromossomos de um organismo, a fim de detectar e caracterizar anormalidades genômicas estruturais e numéricas. A preparação do cariótipo envolve o uso de corantes específicos que auxiliam na identificação dos cromossomos. Qual o corante padrão ouro utilizado para a preparação do bandeamento dos cromossomos?
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	b. 
Giemsa.
	Respostas:
	a. 
Brometo de etídio.
	
	b. 
Giemsa.
	
	c. 
Eosina.
	
	d. 
Hematoxilina.
	
	e. 
GFP.
	Comentário da resposta:
	Resposta: B
Comentário: O corante de Giemsa é o corante mais usado para detecção dos cromossomos.
	
	
	
· Pergunta 3
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	O exame de cariótipo é aconselhado em condições de suspeita de anormalidades cromossômicas, desordens sexuais, anormalidades congênitas múltiplas e/ou envolvendo retardo mental, infertilidade, abortos de repetição e tumores. O preparo do cariótipo envolve várias etapas, utilizando diferentes tipos de reagentes, como fito-hemaglutinina, colchicina, solução hipotônica e Giemsa. Para que serve cada reagente, respectivamente?
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	b. 
Induz a divisão celular dos linfócitos do sangue periférico / Mantém as células em metáfase / Faz com que os cromossomos fiquem separados / Cora as bandas.
	Respostas:
	a. 
Induz a divisão celular dos linfócitos do sangue periférico / Divide os cromossomos / Cora as bandas dos cromossomos / Fixa na lâmina.
	
	b. 
Induz a divisão celular dos linfócitos do sangue periférico / Mantém as células em metáfase / Faz com que os cromossomos fiquem separados / Cora as bandas.
	
	c. 
Induz a divisão celular dos linfócitos do sangue periférico / Induz crossing over / Mantém as células em anáfase/ Cora as bandas.
	
	d. 
Induz a divisão celular dos linfócitos do sangue periférico / Mantém as células em telófase / Mantém os cromossomos separados / Cora as bandas.
	
	e. 
Induz a divisão celular das hemácias do sangue periférico / Mantém as células em telófase / Mantém os cromossomos separados / Cora as bandas.
	Comentário da resposta:
	Resposta: B
Comentário: Fito-hemaglutinina, colchicina, solução hipotônica e Giemsa são reagentes utilizados no processo de preparo de cariótipo. Esses reagentes têm as seguintes funções: Induz a divisão celular dos linfócitos do sangue periférico, mantém as células em metáfase, faz com que os cromossomos fiquem separados, cora as bandas.
	
	
	
· Pergunta 4
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	As técnicas de biologia molecular têm sido muito úteis no diagnóstico de vírus e bactérias. Em relação a essas técnicas, leia as afirmativas:
 
I – O PCR multiplex representa uma abordagem recente no diagnóstico de vírus respiratórios.
II – O PCR em tempo real é muito utilizado na quantificação de carga viral do HIV (vírus da imunodeficiência humana).
III – Os métodos moleculares não são frequentemente utilizados para diagnóstico de infecções causadas por eucariotos.
IV – O diagnóstico laboratorial rápido e específico é muito útil para o rápido diagnóstico e a Biologia Molecular não é uma ferramenta muito útil nesse sentido.
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	b. 
Somente as alternativas I, II e III estão corretas.
	Respostas:
	a. 
Somente as alternativas I e II estão corretas.
	
	b. 
Somente as alternativas I, II e III estão corretas.
	
	c. 
Somente as alternativas I e IV estão corretas.
	
	d. 
Todas as alternativas estão corretas.
	
	e. 
Todas as alternativas estão erradas.
	Comentário da resposta:
	Resposta: B
Comentário: O diagnóstico laboratorial rápido e específico é muito útil para o rápido diagnóstico e a Biologia Molecular é uma ferramenta muito útil, pois é rápida e fácil.
	
	
	
· Pergunta 5
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	A eletroforese em gel é uma técnica muito eficiente para separar, identificar e purificar diferentes fragmentos de moléculas. A migração das partículas no gel tamponado ocorrerá pela formação de um campo elétrico formado pelos dois polos da técnica, indo do polo negativo para o positivo. Diferentes tipos de géis podem ser utilizados para a confecção da técnica. O tamanho dos poros formados por cada um deles será o ponto chave para a análise de diferentes tamanhos das partículas. Um corante intercalante de DNA muito utilizado para visualização das bandas de eletroforese é:
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	d. 
Brometo de etídio.
	Respostas:
	a. 
Fucsina.
	
	b. 
Hematoxilina.
	
	c. 
Eosina.
	
	d. 
Brometo de etídio.
	
	e. 
Giemsa.
	Comentário da resposta:
	Resposta: D
Comentário: O Brometo de etídio é um corante intercalante usado frequentemente como marcador de DNA em processos como a eletroforese em gel de agarose. Quando essa substância é exposta à luz ultravioleta, emite uma luz vermelho-alaranjada e isso torna possível a visualização da banda de DNA.
	
	
	
· Pergunta 6
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	Sobre o processo de extração de DNA do sangue periférico, assinale a alternativa que representa a ordem correta:
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	d. 
Coleta do sangue/hemólise/lavagem/lise/precipitação.
	Respostas:
	a. 
Coleta do sangue/lavagem/lise/hemólise/precipitação.b. 
Lavagem/coleta do sangue/hemólise/lise/precipitação.
	
	c. 
Coleta do sangue/hemólise/lavagem/precipitação/lise.
	
	d. 
Coleta do sangue/hemólise/lavagem/lise/precipitação.
	
	e. 
Coleta do sangue/lavagem/lise/precipitação/hemólise.
	Comentário da resposta:
	Resposta: D
Comentário: O sangue deve ser coletado do sangue periférico, posteriormente as hemácias devem ser hemolisadas, a amostra é lavada e ocorre a lise. No final, a amostra de DNA é precipitada.
	
	
	
· Pergunta 7
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	Qual o papel da proteinase K no processo de extração do DNA e em que etapa ela é usada?
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	e. 
A proteinase K é uma enzima que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lise do DNA.
	Respostas:
	a. 
A proteinase K é uma nuclease que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lise do DNA.
	
	b. 
A proteinase K é um ácido nucleico que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lise do DNA.
	
	c. 
A proteinase K é uma enzima que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lavagem do DNA.
	
	d. 
A proteinase K é uma enzima que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de precipitação do DNA.
	
	e. 
A proteinase K é uma enzima que digere as proteínas da amostra e é adicionada na etapa de lise do DNA.
	Comentário da resposta:
	Resposta: E
Comentário: A proteinase K é adicionada na etapa de lise e tem o papel de digerir as proteínas presentes na amostra.
	
	
	
· Pergunta 8
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	O gene flavonoide 3′-hidroxilase (f3′h) influencia a cor da flor em plantas comuns de ipomeia. Um pesquisador coletou DNA de plantas comuns de ipomeia e usou o sequenciamento de DNA para identificar a ordem dos nucleotídeos no gene f3′h de cada planta. Um subconjunto dos dados de sequenciamento, que mostra os resultados para duas plantas, é mostrado na Figura 1.
 
 Fonte: Adaptada de: https://www.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/e/biotechnology?modal=1. Acesso em: 13 set. 2020.
 
Qual alternativa descreve os resultados mostrados na Figura 1?
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	a. 
A planta 1 e a 2 diferem em pelo menos dois nucleotídeos para o gene f3’h.
	Respostas:
	a. 
A planta 1 e a 2 diferem em pelo menos dois nucleotídeos para o gene f3’h.
	
	b. 
A planta 1 não produz uma proteína F3’H funcional, enquanto a planta 2 sim.
	
	c. 
A planta 1 faz mais flores que a planta 2.
	
	d. 
A planta 1 e a planta 2 têm genomas idênticos.
	
	e. 
A planta 1 e a 2 diferem em somente um nucleotídeo para o gene f3’h.
	Comentário da resposta:
	Resposta: A
Comentário: Observando os dados, é possível verificar que as plantas diferem em dois nucleotídeos das posições 4 e 7.
	
	
	
· Pergunta 9
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	Um cientista usou técnicas de laboratório para mover o Gene X de um plasmídeo específico de bactéria para um plasmídeo específico de levedura. Para fazer isso, o cientista primeiro usou enzimas de restrição para digerir, ou cortar, o plasmídeo específico da bactéria em cada lado do gene, o que resultou em uma mistura de dois pedaços lineares de DNA (Figura 1).
 
Figura 1: Diagrama mostrando o plasmídeo bacteriano antes e depois da digestão com as enzimas de restrição (bp = pares de base)
 
Fonte: Adaptada de: https://www.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/e/biotechnology?modal=1. Acesso em: 13 set. 2020.
 
 
O cientista usou o gel de eletroforese para separar os fragmentos por tamanho. Então, o cientista cortou fora da área que continha o gene X para poder purificá-lo do gel. O seguinte diagrama mostra o DNA plasmidial digerido e visualizado no gel de eletroforese, com as bandas A, B e C. Qual (is) das bandas o cientista cortará para isolar o gene X?
Fonte: Adaptada de: https://www.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/e/biotechnology?modal=1. Acesso em: 13 set. 2020.
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	b. 
Banda B.
	Respostas:
	a. 
Banda A.
	
	b. 
Banda B.
	
	c. 
Banda C.
	
	d. 
Banda A e B.
	
	e. 
Todas as bandas.
	Comentário da resposta:
	Resposta: B
Comentário: O gene X tem 1890 bp, portanto a banda B, que está abaixo de 2000 bp, de acordo com o marcador, é a banda que deverá ser cortada.
	
	
	
· Pergunta 10
0,3 em 0,3 pontos
	
	
	
	Mamutes lanosos são parentes extintos dos elefantes modernos. Os cientistas descobriram uma série de espécimes de mamutes lanudos preservados no Àrtico e extraíram DNA dos fios de cabelo desses animais. Este DNA foi estudado em laboratório usando as mesmas técnicas usadas para estudar o DNA dos organismos modernos.
Por exemplo, um grupo de cientistas usou uma amostra de DNA de mamute lanoso para sequenciar o genoma nuclear do animal. Primeiro, os cientistas cortaram a amostra de DNA em fragmentos. Em seguida, os cientistas amplificaram os fragmentos para sequenciamento. Após o sequenciamento, os cientistas usaram computadores para remontar as sequências de fragmentos para determinar a ordem dos nucleotídeos no genoma do mamute.
Qual das seguintes técnicas poderia ter realizado a etapa de amplificação do processo dos cientistas?
	
	
	
	
		Resposta Selecionada:
	c. 
Reação em cadeia da polimerase (PCR).
	Respostas:
	a. 
Eletroforese de DNA.
	
	b. 
Transformação bacteriana.
	
	c. 
Reação em cadeia da polimerase (PCR).
	
	d. 
Sequenciamento de DNA.
	
	e. 
Minipreparação plasmidial.
	Comentário da resposta:
	Resposta: C
Comentário: A reação em cadeia da polimerase (PCR) deverá ser a reação de escolha para a amplificação dos fragmentos do DNA. Uma vez que através dessa técnica se utilizam primers iniciadores para amplificar a região de interesse.
	
	
	
Sábado, 14 de Outubro de 2023