QUESTIONÁRIO UNIDADE I - Biotecnologia e bioengenharia

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BIOENGENHARIA E BIOTECNOLOGIA APLICADA A BIOMEDICINA 7373-30_44801_R_F1_20221 CONTEÚDO
Usuário karisa.deliberali @aluno.unip.br
Curso BIOENGENHARIA E BIOTECNOLOGIA APLICADA A BIOMEDICINA
Teste QUESTIONÁRIO UNIDADE I
Iniciado 27/06/22 14:29
Enviado 27/06/22 14:33
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5 em 5 pontos  
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Todas as respostas, Respostas enviadas, Respostas corretas, Comentários, Perguntas
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Pergunta 1
UNIP EAD BIBLIOTECAS MURAL DO ALUNO TUTORIAISCONTEÚDOS ACADÊMICOS
0,5 em 0,5 pontos
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https://ava.ead.unip.br/webapps/blackboard/execute/courseMain?course_id=_226558_1
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https://ava.ead.unip.br/webapps/portal/execute/tabs/tabAction?tab_tab_group_id=_10_1
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Você deseja clonar um segmento de DNA recém-puri�cado de uma PCR, em um vetor
especí�co – ambos representados na imagem a seguir. As sequências das extremidades do
segmento puri�cado da PCR estão representadas pelas letras que constituem as bases dos
nucleotídeos do DNA. Assim, é possível analisar qual enzima de restrição é a mais adequada
para dar continuidade com o processo de clonagem. Admita que em seu laboratório você
possui disponível apenas as enzimas de restrição listadas: BamHI, EcoRI, EcoRV, SmaI e
XmaI. 
 
A partir das informações e do seu conhecimento sobre o assunto, determine qual
Resposta Selecionada: d. 
Respostas: a. 
b. 
c. 
d. 
e. 
Comentário
da
resposta:
alternativa apresenta a enzima de restrição adequada para você dar segmento com seu
experimento de clonagem, considerando que você deseja controlar a posição de inserção
do fragmento, respeitando o sentido de leitura do gene e que você irá utilizar a mesma
enzima de restrição para digerir o inserto e o vetor. Nas alternativas estão apontados os
sítios de reconhecimento de cada enzima de restrição.
XmaI.
BamHI.
EcoRI.
SmaI.
XmaI.
EcoRV.
Alternativa: D 
Comentário: a enzima de restrição XmaI reconhece a mesma sequência da
enzima SmaI (presente no vetor), porém cliva em sítio diferente. A clivagem
mediada por XmaI deixa extremidades coesivas e garante a posição de
inserção do segmento de interesse, garantido que o sentido de leitura do
gene será respeitado. A utilização das enzimas SmaI ou EcoRV, as únicas
cujos sítios de reconhecimento são encontrados tanto no inserto quanto no
vetor, não seriam adequadas, pois deixam extremidades cegas e não
garantem o sentido de inserção do segmento de interesse. As enzimas EcoRI
e BanHI não apresentam sítio de reconhecimento na sequência de interesse,
apenas no vetor, desta  forma, ambas não poderiam ser usadas para deixar
extremidades coesivas no inserto.
Pergunta 2
Resposta Selecionada: c. 
Respostas: a. 
b. 
c. 
d. 
e. 
Comentário
da
resposta:
Qual das seguintes estratégias seria a mais adequada para puri�cação de uma mistura
contendo proteínas de tamanhos 
distintos?
Cromatogra�a em gel �ltração.
Cromatogra�a de a�nidade.
Cromatogra�a de troca catiônica.
Cromatogra�a em gel �ltração.
Cromatogra�a de troca aniônica.
Cromatogra�a por interação hidrofóbica.  
Alternativa: C 
Comentário: considerando que as proteínas da mistura apresentam
tamanhos diferentes, a cromatogra�a em gel �ltração é a alternativa mais
adequada. Nela, a fase estacionária é constituída por resina contendo
0,5 em 0,5 pontos
esferas com orifícios. As proteínas de menor tamanho (menor massa)
penetram dentro dos orifícios das esferas que funcionam como obstáculos.
Desta forma, o �uxo dessas proteínas menores pela coluna cromatográ�ca é
mais lento, quando comparado com o �uxo de proteínas maiores, que por
sua vez não são atrasadas pelos obstáculos (são grandes demais para passar
pelos orifícios das esferas). Assim, é possível coletar em diferentes
momentos da puri�cação as proteínas de tamanhos distintos.
Pergunta 3
Um pesquisador deseja clonar a sequência codi�cante de um gene de 540 pb a jusante (
downstream) do promotor (200 pb) de um vetor, para subsequente expressão e puri�cação
da proteína de interesse. Assim, o gene foi isolado como fragmento da ação da enzima de
restrição SmaI (o sítio de reconhecimento dessa enzima é CCC↓GGG / a seta indica sítio de
clivagem) e clonado no sítio SmaI do vetor localizado imediatamente a jusante do promotor.
A sequência do gene contém um único sítio para enzima de restrição EcoRI localizada 70 pb
a jusante do códon iniciador. A representação esquemática do plasmídeo a seguir indica a
localização dos sítios de reconhecimento de algumas enzimas de restrição no vetor e a
posição de inserção do gene de interesse. 
  
0,5 em 0,5 pontos
Resposta Selecionada: a. 
Respostas: a. 
b. 
c. 
d. 
e. 
Comentário
da
resposta:
 
  
O pesquisador avaliou as colônias obtidas no processo de clonagem por meio da digestão
do material com as duas enzimas de restrição HindIII e EcoRI. Qual dos seguintes padrões
de digestão com essas duas enzimas de restrição representa o clone com per�l desejado
pelo pesquisador para os experimentos de superexpressão?
~270 pb + ~470 pb + o restante da estrutura vetor.
~270 pb + ~470 pb + o restante da estrutura vetor.
~740 pb + ~70 pb + o restante da estrutura vetor.
~200 pb + o restante da estrutura vetor.
~810 pb + o restante da estrutura vetor.
~200 pb + 540 pb + o restante da estrutura vetor.
Alternativa: A 
Comentário: ao clivar o vetor contendo o inserto com as duas enzimas de
restrição, teremos: (1) um fragmento correspondendo ao promotor (200 pb)
mais 70 pb do gene, produzido pela clivagem com a HindIII a montante (
upstream) do promotor e pela clivagem com a EcoRI presente dentro do gene
(70 pb a início do códon iniciador) e (2) outro fragmento de 470 pb
correspondente à clivagem nos sítios EcoRI dentro do gene (a 70 pb do início
da transcrição) e EcoRI a jusante �nal do gene.
Pergunta 4
Leia e analise as proposições. 
I- CRISPR é um acrônimo da língua inglesa das palavras repetições palindrômicas curtas
agrupadas e regularmente interespaçadas ( clustered regularly interspaced short palindromic
repeat). 
II- O operon CRISPR contém fragmentos de DNA viral provenientes de infecções prévias
sofridas por organismos procariontes. Os cientistas descobriram que ele faz parte de um
mecanismo de defesa de bactérias, sendo posteriormente adaptado como uma ferramenta
de edição gênica. 
III- Sequências PAM, sgRNA ( single guide), Cas são componentes importantes no processo
de edição gênica mediada pelo operon CRISPR. 
IV- A edição gênica promovida pelo sistema CRISPR/Cas pode ser realizada apenas em
éxons. 
V- A edição gênica realizada pelo sistema CRISPR/Cas permite exclusivamente a remoção de
0,5 em 0,5 pontos
Resposta Selecionada: b. 
Respostas: a. 
b. 
c. 
d. 
e. 
Comentário
da
resposta:
fragmentos do genoma (construção de knock-outs), além de ser uma técnica que pode ser
aplicada apenas em organismos mais simples, como os procariontes. 
  
Assinale a alternativa correta.
Estão corretas apenas as a�rmativas I, II e III.
Estão corretas apenas as a�rmativas I e II.
Estão corretas apenas as a�rmativas I, II e III.
Estão corretas apenas as a�rmativas II, III e IV.
Estão corretas apenas as a�rmativas I, III e V.
Estão corretas apenas as a�rmativas II, III e V.
Alternativa: B 
Comentário: a edição gênica promovida pelo sistema CRISPR/Cas pode ser
realizada em qualquer lugar do genoma, desde que o sgRNA se ligue a
montante de uma sequência PAM. A alternativa V está errada,pois a edição
mediada pelo sistema CRISPR/Cas pode ser utilizada em diversas aplicações
e não apenas na construção de knock-outs, tais como ativação/repressão
gênica, substituição alélica, clivagem de DNA/RNA, deleção de genes, knock-
in/ out, inserção de transgenes, geração de variação genética, além de outras
abordagens possíveis como DNA labeling, mapeamento gênico, RNA tracking.
Essa técnica também pode ser utilizada em células eucariontes e organismos
complexos.
Pergunta 5
Resposta Selecionada: e. 
Respostas: a. 
b. 
c. 
d. 
e. 
Comentário
da
resposta:
Um dos reagentes utilizados na preparação de células competentes é:
CaCl2.
HCl.
NaCl.
Glicina.
Formamida.
CaCl2.
Alternativa: E 
Comentário: o CaCl2 é utilizado na preparação de células competentes, uma
vez que, juntamente com o choque térmico, permite a abertura de poros na
membrana plasmática facilitando a entrada do DNA exógeno na célula.
0,5 em 0,5 pontos
Pergunta 6
Resposta
Selecionada:
d.
Respostas: a.
b.
c. 
d.
e.
Eletroporação é:
Aplicação de pulsos de alta voltagem, geralmente utilizados para criação de
poros na membrana plasmática das células.
O processo de separação de moléculas carregadas, por meio de um gel
mantido em um campo elétrico.
O processo que permite a ligação do DNA exógeno a um vetor
eletricamente carregado.
O processo que estimula a multiplicação celular.
Aplicação de pulsos de alta voltagem, geralmente utilizados para criação de
poros na membrana plasmática das células.
Aplicação de pulsos de baixa voltagem, usados para fechar os poros da
membrana plasmática das células após protocolo de choque térmico.
0,5 em 0,5 pontos
Comentário
da
resposta:
Alternativa: D 
Comentário: a captação de DNA livre pode ocorrer submetendo bactérias a
um campo elétrico de alta tensão. Esse procedimento é conhecido como
eletroporação. Os protocolos de eletroporação variam entre as diferentes
espécies bacterianas. 
Pergunta 7
Resposta
Selecionada:
c.
Respostas: a. 
b. 
c.
d.
Vetores são:
Moléculas que são capazes de se ligar covalentemente a um segmento de
DNA e carregá-lo para o interior das células.
Moléculas que degradam ácidos nucleicos.
Moléculas que auxiliam na replicação.
Moléculas que são capazes de se ligar covalentemente a um segmento de
DNA e carregá-lo para o interior das células.
0,5 em 0,5 pontos
e. 
Comentário
da
resposta:
Moléculas que protegem a célula hospedeira contra a invasão de DNA
exógeno.
Moléculas que impedem a replicação do DNA endógeno da célula.
Alternativa: C 
Comentário: os vetores são capazes de carregar moléculas de DNA exógeno
para o interior das células e são frequentemente utilizados no processo de
clonagem molecular.
Pergunta 8
Resposta Selecionada: a. 
Respostas: a. 
b. 
c. 
d. 
Os cosmídeos não apresentam:
Genes que codi�cam proteínas virais.
Genes que codi�cam proteínas virais.
Origem de replicação.
Genes de resistência a antibióticos.
Sítios de reconhecimento para enzimas de restrição.
0,5 em 0,5 pontos
e. 
Comentário
da
resposta:
Sequência cos.
Alternativa: A 
Comentário: os genes virais são removidos para “abrir” espaço na
construção, permitindo a inserção de fragmentos de DNA de até 45 kb. Os
plasmídeos e os bacteriófagos permitem a inserção de fragmentos de DNA
de apenas 10 e 20 kb, respectivamente.
Pergunta 9
Resposta
Selecionada:
b. 
Respostas: a. 
b. 
c. 
d.
Qual é o papel das enzimas de restrição nas bactérias?
Degradar o DNA de fagos invasores.
Degradar o cromossomo bacteriano durante a replicação.
Degradar o DNA de fagos invasores.
Produzir iniciadores de RNA para a replicação.
0,5 em 0,5 pontos
e. 
Comentário
da
resposta:
Degradar o DNA de outras bactérias durante o processo de
conjugação. 
Inserir o DNA de fagos invasores no DNA cromossômico.
Alternativa: B 
Comentário: as enzimas de restrição sintetizadas pelas bactérias
reconhecem sequências especí�cas do genoma dos fagos e promovem a
clivagem da ligação fosfodiéster do DNA viral nesses pontos. Assim, esse
mecanismo de defesa de bactérias as protege contra infecções pelos fagos.
Pergunta 10
“Em 1998, a equipe do biólogo James Thomson, da Universidade de Wisconsin, Estados
Unidos, isolou e desenvolveu pela primeira vez em laboratório uma linhagem de células-
tronco extraídas de embriões humanos. Foi um feito técnico e um problema ético para a
pesquisa biológica. Feito, porque os estudos com essas células podem, em teoria, levar a
melhores tratamentos ou à cura de uma lista quase interminável de doenças. Se
devidamente cultivadas, as células-tronco embrionárias, e apenas elas, podem dar origem a
todos os tecidos de um organismo, cerca de 220 tipos distintos de células que seriam a
matéria- prima de novas terapias. Problema, porque a forma de obtê-las ofende a crença de
parcelas da sociedade, em especial os religiosos, e, em alguns países, também as leis: as
células-tronco são retiradas de embriões, que, ao ceder esse material, tornam- se inviáveis.”
0,5 em 0,5 pontos
Resposta
Selecionada:
d.
Respostas: a.
b.
c.
d.
e.
(Pesquisa Fapesp, https:// revistapesquisa.fapesp.br/celulas-tronco/, 2005) 
  
Com relação às células-tronco, é incorreto a�rmar:
Quando retiradas de embriões congelados, eliminam as questões éticas e
religiosas associadas à obtenção de órgãos para transplantes,
independentemente do tempo de congelamento.
As células-tronco podem ser retiradas da massa celular interna de
blastocistos.
As células-tronco de um paciente podem ser usadas para regenerar seus
tecidos ou órgãos lesados, eliminando o risco de rejeição imunológica.
As células-tronco de adulto, caso recebam estímulo adequado, são capazes
de se diferenciar em outros tipos de célula, independentemente do seu
tecido de origem.
Quando retiradas de embriões congelados, eliminam as questões éticas e
religiosas associadas à obtenção de órgãos para transplantes,
independentemente do tempo de congelamento.
As células-tronco embrionárias são capazes de se diferenciar em outros
tipos de células, desde que cultivadas sob condições adequadas.
Segunda-feira, 27 de Junho de 2022 14h33min42s GMT-03:00
Comentário
da
resposta:
Resposta: D 
Comentário: células-tronco são células indiferenciadas, ou seja, são células
não especializadas do corpo humano. Elas são capazes de se diferenciarem
em outros tipos celulares e têm a capacidade de se autorrenovar (isso quer
dizer que elas podem se dividir e originar novas células-tronco). Células-
tronco podem ser obtidas a partir da massa celular interna do blastocisto.
Foi observado que tecidos adultos também possuem populações de células-
tronco, células que, se receberem o estímulo adequado em laboratório,
podem dar origem a diferentes tipos celulares. O uso de células-tronco
embrionárias continua sendo motivo de debate ético. No Brasil, é permitida
pesquisa com células-tronco retiradas de embriões humanos congelados.
Para isso, é necessário que o embrião seja inviável ou que tenha
permanecido congelado por mais de 3 anos. Além disso, a utilização apenas
pode ocorrer a partir do consentimento dos genitores.
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