PESQUISA DE ANTÍGENO COVID-19

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PESQUISA DE ANTÍGENO COVID-19 
 
 
 
Em 11 de março de 2020, a covid-19 foi definida pela Organização Mundial da 
Saúde (OMS) como uma pandemia. Esse termo se refere à distribuição geográfica de 
uma doença, ou seja, naquele momento existiam surtos em várias regiões do mundo, e 
não à sua gravidade (HISTÓRICO..., [20--?]). 
A covid-19 é uma doença infecciosa causada por um coronavírus recentemente 
descrito, o coronavírus da síndrome respiratória aguda grave 2 (SARS-CoV-2), um β-
coronavírus com RNA envelopado. Como a maioria dos vírus de RNA, o coronavírus tem 
uma capacidade de mutação, sendo que já foram identificadas, pelo menos, oito 
variantes: Alfa, Beta, Gama, Delta, Ômicrom, Mu, Lambda e a “Deltacrom”, que seria 
uma mistura, ainda não muito descrita. 
 
 
Figura 1 - Coronavírus. Fonte: https://www.shutterstock.com/pt/image-illustration/coronavirus-covid19-under-
microscope-3d-illustration-1643947495. 
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Por se tratar de um vírus respiratório, é transmitido entre humanos ao se 
espalhar pela boca ou pelo nariz de uma pessoa infectada, em pequenas partículas 
líquidas expelidas quando elas tossem, espirram, falam, cantam ou respiram. O tamanho 
dessas partículas varia de gotas respiratórias maiores até aerossóis menores, e o vírus 
se espalha com mais facilidade em locais fechados e multidões. Estima-se que a infecção 
tenha um período de incubação médio de 6,4 dias. 
A doença afeta diferentes pessoas de maneiras diversas. A maioria dos 
infectados não apresentará sintomas, ou apresentará sintomas leves a moderados da 
doença, não precisando de hospitalização. No entanto, algumas desenvolvem um 
quadro grave, que envolve dificuldade de respirar ou falta de ar, perda de fala ou 
mobilidade, confusão mental e dor no peito, febre e perda de olfato e paladar. Em março 
de 2022 já foram contabilizadas 477 milhões de pessoas infectadas e, destas, 6,11 
milhões foram a óbito (CORONAVÍRUS..., [20--?]). 
Tanto para identificar a presença do vírus e tratar o paciente quanto para 
contribuir com estudos epidemiológicos, os testes disponíveis apresentam variados 
graus de sensibilidade e especificidade. Para relembrar: 
Sensibilidade: corresponde ao percentual de resultados positivos entre as 
pessoas que têm uma determinada doença ou condição clínica. 
Especificidade: é a capacidade do mesmo teste ser negativo nos indivíduos que 
não apresentam a doença que está sendo investigada. 
 
SENSIBILIDADE E ESPECIFICIDADE 
 
O teste ideal deveria apresentar 100% de sensibilidade e especificidade. Dessa 
forma, existiriam apenas dois resultados: negativo (a pessoa não estaria doente) ou 
positivo (o indivíduo estaria doente). Portanto, não existiria o falso-negativo, que é 
quando o teste não consegue detectar o vírus mesmo a pessoa estando infectada, ou o 
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falso-positivo, que é quando o teste indica a presença do vírus na pessoa que não está 
infectada. 
Atualmente, apesar de toda a tecnologia existente, nenhum exame laboratorial 
oferece resultados 100% precisos. A seguir são apresentadas as metodologias mais 
utilizadas para o diagnóstico da doença. 
 
RT-PCR 
 
Considerado o padrão-ouro no diagnóstico da covid-19, o teste detecta a 
presença do material genético do SARS-CoV-2 na amostra analisada. O ideal é que seja 
realizado na primeira semana de sintomas, não ultrapassando o décimo segundo dia, 
período em que a carga viral se encontra mais elevada, aumentando a sensibilidade do 
teste. Se realizado no período correto, tem confiabilidade de 90% e pouca frequência 
de falso-positivo. 
 
SOROLOGIA 
 
Essa técnica não detecta o vírus, e sim a presença de anticorpos produzidos pelo 
corpo humano após ser infectado. Esse exame deve ser realizado somente após 7 ou 10 
dias dos sintomas. 
Os anticorpos são proteínas produzidas pelo sistema imune para reconhecer e 
barrar microrganismos nocivos. Os testes sorológicos para covid-19 detectam os 
anticorpos da classe das imunoglobulinas – IgA, IgM (que surgem mais precocemente, 
em torno de 10 dias após a infecção) e IgG (também chamado de memória tardia, pois 
aparece quando a exposição ao patógeno ocorreu há mais tempo, normalmente, após 
15 dias). Uma característica interessante da covid-19 é que essas classes de anticorpos 
têm sido detectadas ao mesmo tempo, fenômeno chamado de sincronismo. Essa 
característica tem gerado um grande desafio na interpretação dos exames. 
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A sorologia é realizada a partir de diferentes tecnologias. O imunoensaio 
enzimático (Elisa) revela a presença de IgA e IgG; já a quimioluminescência (Clia) é 
baseada na emissão de luz produzida por reações químicas, detectando IgM (fase aguda 
da doença) e IgG (memória). A eletroquimioluminescência (Eclia), por outro lado, 
identifica os anticorpos totais, sem fazer diferenciação entre eles, enquanto os testes 
rápidos utilizam imunocromatografia e identificam, porém sem quantificar 
(qualitativamente) IgG e IgM. 
A sorologia apresenta menor sensibilidade no diagnóstico da doença quando 
comparada ao RT-PCR, ou seja, não é recomendada para este fim. Se realizados no início 
dos sintomas, há risco maior de resultado falso-negativo, uma vez que a produção de 
anticorpos pode ainda não ser suficiente. São testes úteis para a avaliação da exposição 
prévia ao vírus ou assintomáticos, além de contribuírem em estudos epidemiológicos e 
na tomada de decisão sobre medidas de controle da doença por autoridades sanitárias. 
 
TESTES RÁPIDOS 
 
O teste rápido é, de acordo com a Resolução da Diretoria Colegiada – RDC n° 
302, de 13 de outubro de 2005, um teste realizado em um dispositivo laboratorial que 
pode ser utilizado fora da área de um laboratório clínico. Esses testes, muitas vezes, são 
chamados de point of care testing (PoCT) (BRASIL, 2005). 
Segundo a RDC n° 36, de 26 de agosto de 2015, que regulamenta esses testes, 
trata-se de um procedimento que pode ser realizado próximo ao local de cuidado ao 
paciente, incluindo consultórios e locais fora de um laboratório, por profissionais de 
saúde ou por pessoa capacitada por órgãos de saúde (BRASIL, 2015). 
Testes rápidos são todos os testes cuja execução, leitura e interpretação do 
resultado são feitas em, no máximo, 30 minutos, sem a necessidade de estrutura 
laboratorial. A leitura dos resultados é feita a olho nu (SBPC, 2004). 
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Os testes rápidos mais comumente utilizados são os imunocromatográficos, que 
passaram a ser comercializados amplamente na década de 1980. Podem ser de dois 
tipos: sorológicos, ou seja, detectam qualitativamente a presença de anticorpos e, mais 
recentemente, estão disponíveis os testes de antígeno, que detectam a presença de 
antígeno do vírus, utilizando uma membrana impregnada de anticorpos. 
Essestestes, geralmente, se apresentam como um dispositivo plástico (cassete), 
contendo uma fita reativa, na qual os reagentes são fixados; o material necessário para 
a coleta da amostra e o diluente acompanham os testes. As amostras analisadas podem 
ser: sangue de punção digital, sangue total, soro ou plasma venosos, fluido oral, 
secreções em geral, urina, entre outros, dependendo do objetivo do teste. 
 
 
Figura 2 – Dispositivo de teste rápido Abbott. Fonte: Panbio..., [20--?]. 
 
O teste usado nesta prática é o teste rápido de antígeno. Deve ser realizado, de 
preferência, entre o segundo ao décimo dia de sintomas. O dispositivo de teste contém 
uma tira de membrana com anticorpo antiSARS-CoV-2 imobilizado na linha de teste e 
IgY monoclonal de camundongo antigalinha na linha de controle (o objetivo deste é 
verificar se o teste está funcionando). Os dois tipos de conjugados (IgG humana 
específica para conjugado de ouro SARS-CoV-2 Ag e conjugado de ouro IgY de galinha) 
movem-se para cima na membrana cromatograficamente, reagindo com o anticorpo 
antiSARS-CoV-2 e IgY monoclonal de camundongo antigalinha, respectivamente. Em um 
resultado positivo, a IgG humana específica para o conjugado de ouro SARS-CoV-2 Ag e 
o anticorpo antiSARS-CoV-2 formarão uma linha de teste na janela de resultados. 
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Nenhuma das linhas é visível antes da aplicação da amostra do paciente. Uma linha de 
controle visível é necessária para indicar que o resultado do teste é válido (PANBIO..., 
[20--?]). 
O teste vem acompanhado de swab estéril para a coleta, tubo plástico para 
extração, suporte para tubos e tampão de extração composto por tricina, cloreto de 
sódio, Tween 20, azida de sódio (< 0,1%) e ProClin 300. O kit de teste deve ser 
armazenado a uma temperatura entre 2 e 30°C, não podendo ser congelado. Caso seja 
armazenado em geladeira, deve ser colocado em temperatura ambiente 30 minutos 
antes da realização do teste (PANBIO..., [20--?]). 
Ao final do tempo indicado de teste, a linha de controle deve estar marcada, e a 
linha teste, se marcada, indica teste positivo; se não marcada, indica teste negativo. 
Os exames qualitativos (caso dos testes rápidos) que geram resultados do tipo 
reagente ou não reagente, ou seja, positivo ou negativo, sofrem influência de erros pré-
analíticos (identificação, coleta, preparo do paciente, tempo de infecção, etc.) que 
ocorrem antes da fase analítica. Dessa forma, não devem ser utilizados para diagnóstico 
definitivo, mas como uma forma de triagem e acompanhamento da infecção. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
 
 
 
ALISSON, E. Novo coronavírus infecta e se replica em células das glândulas salivares. 
Veja Saúde, 2021. Disponível em: https://saude.abril.com.br/medicina/novo-
coronavirus-infecta-e-se-replica-em-celulas-das-glandulas-salivares. Acesso em: 13 abr. 
2022. 
 
BRASIL. Ministério da Saúde. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução da 
Diretoria Colegiada – RDC n° 36, de 26 de agosto de 2015. Dispõe sobre a classificação 
de risco, os regimes de controle de cadastro e registro e os requisitos de rotulagem e 
instruções de uso de produtos para diagnóstico in vitro, inclusive seus instrumentos e 
dá outras providências. Diário Oficial da União, Brasília, DF, 2015. 
 
BRASIL. Ministério da Saúde. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução da 
Diretoria Colegiada – RDC n° 302, de 13 de outubro de 2005. Dispõe sobre Regulamento 
Técnico para funcionamento de Laboratórios Clínicos. Diário Oficial da União, Brasília, 
DF, 2005. 
 
CORONAVÍRUS (covid-19). Google Notícias, [20--?]. Disponível em: 
https://news.google.com/covid19/map?hl=pt-
BR&mid=%2Fm%2F02j71&gl=BR&ceid=BR%3Apt-419. Acesso em: 13 abr. 2022. 
 
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FONTINELLE, D. Covid-19: método diagnóstico padrão-ouro. Sanar, 2020. Disponível em: 
https://www.sanarmed.com/covid-19-metodo-diagnostico-padrao-ouro-colunistas. 
Acesso em: 13 abr. 2022. 
 
HISTÓRICO da pandemia de covid-19. Organização Pan-Americana da Saúde, [20--?]. 
Disponível em: https://www.paho.org/pt/covid19/historico-da-pandemia-covid-
19#:~:text=Em%2011%20de%20mar%C3%A7o%20de,pa%C3%ADses%20e%20regi%C3
%B5es%20do%20mundo. Acesso em: 13 abr. 2022. 
 
PANBIO covid-19 Ag Rapid Test Device (Nasopharyngeal). Abbott, [20--?]. Disponível 
em: https://dislabparana.com.br/wp-content/uploads/2021/01/ABBOUT.pdf. Acesso 
em: 13 abr. 2022. 
 
SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOLOGIA CLÍNICA (SBPC). Posicionamento oficial 2004: 
diretrizes para gestão e garantia da qualidade de testes laboratoriais remotos (POCT), 
2004. Disponível em: 
http://www.sbpc.org.br/upload/conteudo/320070131095543.pdf. Acesso em: 13 abr. 
2022. 
 
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