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Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública Estudo Dirigido – Microbiologia Básica Biomedicina –2023.2 Módulo: Virologia Discente: Jéssica Ferreira Santos - 202103647 Introdução à Virologia 1) Defina vírus: São parasitas intracelulares obrigatórios, pois necessitam estar dentro das células para se replicar e sintetizar proteínas. 2) Qual a função e constituição química dos componentes virais: Genoma, Capsídeo e Envelope? Genoma: ácido nucléico, DNA ou RNA, possui a função de codificar as informações genéticas. Capsídeo: capsômeros que se organizam em uma estrutura geométrica repetitiva, as proteínas do capsídeo são frequentemente constituídas por aminoácidos, função proteger o genoma viral. Envelope: bicamada lipídica, função de ajudar o vírus a se fundir com a membrana da célula hospedeira durante a infecção. 3) Defina cada uma das etapas que ocorrem durante o processo de biossíntese viral. Adsorção: ligação da molécula viral na superfície da célula através dos receptores específicos. Penetração: entrada do vírus na célula, podendo ser por endocitose (invaginação da membrana) ou fusão direta (injetam seu material genético na célula). Desnudamento: degradação do capsídeo/nucleocapsídeo para liberar material genético no interior da célula. Biossíntese: expressão gênica e replicação do genoma. Montagem e maturação: as proteínas virais e o material genético se juntam para formar novas partículas virais, os vírions (partícula viral completa). Liberação: as novas partículas são liberadas da célula hospedeira, podendo ser por lise celular ou uma liberação gradual. 4) defina os termos: infecção localizada, infecção disseminada e viremia. Infecção localizada: infecção vai está restrita a uma parte específica do corpo. Infecção disseminada: o patógeno se espalha para todo o corpo, afetando múltiplos sistemas ou órgãos. Viremia: presença do vírus no sangue de algum indivíduo, os vírus entram na corrente sanguínea e se espalha pelo corpo como parte de uma infecção. 5) Defina: infecção aguda, infecção assintomática, infecção latente, infecção crônica Infecção aguda: infecção que possui uma curta duração, pode ter um início súbito e se agrava rapidamente, caracterizado também por uma resposta imunológica rápida do corpo. Infecção assintomática: apresenta infecção, mas não apresenta sintomas visíveis da mesma. Infecção latente: o patógeno permanece no indivíduo de forma inativa por longos períodos não causando sintomas visíveis. Infecção crônica: infecção que permanece no organismo por longos períodos, caracterizada também por uma resposta imunológica constante. 6) Diferencie os processos de inativação viral e remoção viral. A inativação viral se diz respeito a tornar um vírus não infeccioso, envolvendo a destruição ou desativação da capacidade do vírus de se replicar e infectar células hospedeiras. A remoção viral refere-se ao processo de separar o vírus de uma solução, fluído ou material para remover de um sistema. 7) Cite e explique um método eficaz para a inativação de vírus envelopados e um método para um vírus não envelopado. Vírus envelopados: uso de desinfetantes, a ação desse agente remove o envelope, assim como desnatura os ácidos nucléicos e inativa o vírus. Vírus não envelopados: exposição à radiação ultravioleta para danificar o material genético. 8) Cite duas formas de preservação viral. Congelamento a baixas temperaturas: manter a estabilidade do material genético. Recombinantes: preservar na forma de DNA ou RNA recombinante, o que facilita o transporte e a armazenagem em longo prazo. 9) Cite e explique dois métodos de detecção viral. PCR: reação de cadeia em polimerase é técnica que amplifica o material viral detectando a presença ou não de vírus e quantificando sua carga viral. Primeiro acontece a desnaturação onde a sequência que vai ser amplificada é desnaturada a 95°C, a fita dupla abre e torna-se uma fita única. É utilizado primers para complementar a fita oposta d o moldo é determinado pela posição desses primers que se anelam a fita e essa etapa acontece a uma temperatura de 60°C. Com o molde devidamente identificado, a DNA-polimerase adiciona as bases formando uma nova fita, isso acontece em 72°C. Esse ciclo vai se repetindo até que a quantidade de amplificação seja obtida. Elisa: detecta proteínas virais específicas ou anticorpos produzidos pelo sistema imunológico em resposta a uma infecção viral. É utilizado uma placa com 96 poços, uma enzina é ligada covalentemente a um antígeno ou a um anticorpo que vai reconhecer seu alvo, se realmente reconhecer, a enzima vai reagir com o substrato que vai levar a uma coloração dependendo da concentração do antígeno ou anticorpo pesquisado. 10) Cite e explique duas abordagens para produção de vacinas virais apresentando vantagens e desvantagens. Vacina a base de vírus: o vírus vai ser isolado e caracterizado geneticamente para confirmação de sua identidade e entender sua estrutura e comportamento, o vírus é cultivado usando sistemas apropriados para aumentar a quantidade de vírus disponível, ele pode ser atenuado ou inativado para que não cause doenças em pessoas saudáveis, após o crescimento, ele é colhido e purificado para remover impurezas celulares e outros contaminantes, também vai ser formulado com a ajuda de conservantes, estabilizantes e adjuvantes, passa pelo teste de qualidade e assim produção em escala. Vacina de vetor viral: escolha de um vírus que não causa doença em humanos, os genes do vírus alvo que codificam proteínas que vão estimular uma resposta imune são inseridos no genoma do vetor, o vetor viral modificado é cultivado em cultura de células em laboratório para produzir uma grande quantidade do mesmo, após o crescimento o vírus vetor é colhido e purificado, é feita a formulação da vacina viral com o vetor e outros componentes necessários, realização dos testes de qualidade e produção de vacina em grande escala.
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