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Disciplina: BIOLOGIA MOLECULAR AV Aluno: MARINIZ BAPTISTA DA COSTA ALBUQUERQUE 202208993877 Turma: 9004 DGT0998_AV_202208993877 (AG) 02/05/2023 15:35:56 (F) Avaliação: 9,00 pts Nota SIA: 10,00 pts ENSINEME: AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 1. Ref.: 4125263 Pontos: 1,00 / 1,00 A reação em cadeia da polimerase (PCR) tem sido usada frequentemente para a ampli�cação de ácidos nucleicos desde a década de 1980. Desde então, diversas variações da PCR foram feitas para melhorar sua capacidade de detecção e quanti�cação de DNA. Com relação à técnica de PCR em tempo real, assinale a alternativa correta: Não permite, por meio do uso do Sybergreen®, veri�car a curva de dissociação, mesmo em termocicladores modernos. Depende do uso de �uorescência, que é medida ao �nal da reação, tal como o produto de PCR comum é corrido em gel de agarose, geralmente visualizado em luz UV. Não pode ser aplicada na detecção de mutações, apesar de sua alta sensibilidade. Requer a otimização de um importante parâmetro que é a temperatura de desnaturação. Tem como parâmetro importante o Ct (cycle threshold), que indica o ciclo da reação no qual a ampli�cação começa a ser detectada a níveis superiores ao ruído (background) e passa a acontecer de forma exponencial. 2. Ref.: 4119324 Pontos: 1,00 / 1,00 A PCR é uma reação cíclica que depende de diversos fatores e reagentes, e pode ser aplicada em diversos contextos. Acerca da reação em cadeia da polimerase (PCR), assinale a opção correta: PCR é a tecnologia por meio da qual são produzidas bilhões de cópias de fragmentos de DNA. Os fragmentos do DNA ampli�cado pela PCR são chamados amplicons e podem ser tipi�cados usando- se diferentes métodos. Os iniciadores são pequenos fragmentos sintéticos de DNA de �ta dupla, usualmente com extremidade 3'-OH, e complementares à sequência do segmento de DNA de interesse. A reação de PCR é dependente da atividade de cópia de fragmentos de DNA, catalisada pela enzima DNA sintetase. A enzima termoestável direciona o posicionamento dos precursores de DNA - dNTP - iniciando a síntese de novas �tas de DNA. A temperatura ideal para a polimerização varia entre 25 °C e 45 °C. O último passo da PCR, a polimerização, é a excisão da �ta de DNA no sentido 3' 5', começando no primeiro nucleotídio do primer iniciador incorporado. ENSINEME: INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 3. Ref.: 7694403 Pontos: 1,00 / 1,00 Para uma célula funcionar adequadamente, as proteínas necessárias devem ser sintetizadas no momento adequado. Todos os organismos e células controlam ou regulam a transcrição e tradução do seu DNA em → javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4125263.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4119324.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 7694403.'); proteína.Seja em um organismo unicelular simples ou em um organismo multicelular complexo, cada célula controla quando e como seus genes são expressos. (Regulação da expressão gênica: como o genes são regulados. Disponivel em:https://planetabiologico.com.br/genetica/regulacao-da-expressao-genica-como-o-genes-sao-regulados/. Acessado em 21/09/2022). Sobre o mecanismo de regulação gênica dos procariotos, avalie as a�rmativas a seguir. I. A regulação da expressão em procariotos ocorre com menor custo energético, durante a estabilização da proteína, que é o produto da fase de tradução. II. A transcrição ocorre a partir do acoplamento da RNA polimerase em uma sequência de DNA, chamada de região promotora. III. Os fatores transcricionais, apenas inibem a expressão gênica. Em face do exposto, assinale a opção correta. Somente a a�rmativa III está correta. Somente as a�rmativas II e III estão corretas. Somente a a�rmativa II está correta. Somente a a�rmativa I está correta. Somente as a�rmativas I e II estão corretas. 4. Ref.: 7694758 Pontos: 0,00 / 1,00 No século XIX o Bioquímico Johannes F Miescher estudando os leucócitos encontrou um composto no interior do núcleo, formado por átomos de nitrogênio e fósforo. Assinale a opção que indica o nome dado a esse composto. Ácido nucléico. Adenina. Guanina. Nucleína. Bases pirimídicas. ENSINEME: ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS 5. Ref.: 4134260 Pontos: 1,00 / 1,00 Todas as alternativas abaixo são consideradas etapas do desenho experimental, exceto: De�nir a relação causa-efeito Execução Planejamento Formular as conclusões Divulgação cientí�ca 6. Ref.: 4131264 Pontos: 1,00 / 1,00 Considerando a sequência de RNAm abaixo, qual dos primers especí�cos para esta sequência deve ser utilizado? 5' AUGCAAUUGGUCCAGUCGAUGCAGUCAGAACCAUG 3' javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 7694758.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4134260.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4131264.'); 5' GACCUGGTTAACGTA 3' 5' TTTTTTTTTTTTTTT 3' 5' CGTCAGTCTTGGTAC 3' 5' CATGGTTCTGACTGC 3' 5' ATGCTTUUGGUCCAG 3' 7. Ref.: 4134265 Pontos: 1,00 / 1,00 A clonagem molecular tem demonstrado ser uma técnica excepcional para o isolamento de fragmentos de DNA especí�cos de um organismo. Os processos de clonagem e isolamento de tais fragmentos começam com a construção de bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma biblioteca de cDNA não apresenta íntrons porque: Não podem ser construídas a partir de genes. Os íntrons são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de nucleases. Os íntrons são degradados pela transcriptase reversa. É construída a partir de mRNA maduro. É construída a partir de DNA genômico. ENSINEME: SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 8. Ref.: 4122295 Pontos: 1,00 / 1,00 Sequenciamento de nova geração, conhecido também como NGS ou sequenciamento profundo de ácidos nucleicos, é um termo geral utilizado para descrever uma série de tecnologias modernas de sequenciamento. Sobre esta tecnologia é correto a�rmar que: As tecnologias recentes de sequenciamento de ácidos nucleicos permitem sequenciar tanto DNA como RNA de forma mais rápida e barata do que anteriormente era conseguido com o sequenciamento de Sanger e, por conta disto, estão revolucionando os estudos de genomas e a biologia molecular. Uma das maiores vantagens das tecnologias de sequenciamento de nova geração é o fato de que as sequências obtidas geralmente são longas, contendo, ao menos, 1 Kpb. Illumina (Solexa) e 454 (Roche) são sequenciadores de nova geração que realizam o sequenciamento direto tanto de DNA quanto de RNA. Apesar dos inúmeros avanços gerados pelas técnicas de sequenciamento de nova geração, ainda é tecnicamente impossível utilizá-las para analisar os genes que estão sendo expressos em um determinado tecido ou condição. Uma das restrições ao uso do sequenciamento de nova geração é a necessidade de serem utilizadas amostras grandes com alta concentração de ácidos nucleicos. 9. Ref.: 4116462 Pontos: 1,00 / 1,00 A biotecnologia trabalha predominantemente manipulando material genético de seres vivos; para a maioria dos organismos, o material genético é a molécula de DNA. Considerando as metodologias de biologia molecular, assinale a opção correta. A técnica de Northern blotting é utilizada para analisar DNA por meio de uma sonda. Ao se cortar o DNA genômico aleatoriamente, serão observados genes em todos os fragmentos. javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4134265.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4122295.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4116462.'); A endonuclease de restrição, uma das principais ferramentas da tecnologia do DNA recombinante, corta a molécula de DNA em sequências especí�cas. O termo clonagem de DNA se refere ao ato de produzir várias cópias exatas de uma molécula, não sendo utilizado na ampli�cação de sequências. O método Southern blotting é utilizado para a análise de mRNAs transferido de um gel para um suporte especí�co. 10. Ref.: 4116461 Pontos: 1,00 / 1,00 É de conhecimento mundial que o desa�o centralda moderna biologia celular é entender o funcionamento das células em seus detalhes moleculares. Esse objetivo requer técnicas que viabilizem a análise das moléculas envolvidas no processo de �uxo de informação do DNA para proteína e no controle desse �uxo. Muitas técnicas são baseadas em hibridização (ou hibridação). Em relação à hibridização in situ, é CORRETO a�rmar: O resultado do experimento de hibridização in situ �uorescente deve ser analisado em microscópio eletrônico com �uorescência. A hibridização in situ não pode ser aplicada em preparações para avaliações dos cromossomos. As sondas utilizadas correspondem a segmentos de ácido nucleico no qual são incorporados nucleotídeos modi�cados. Os nucleotídeos marcados sempre apresentam um isótopo radioativo, que é detectado através de impressão em �lme de raio-X. O DNA é retirado de uma amostra tecidual, e passa por uma reação de PCR para incorporação de nucleotídeos marcados; javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4116461.');
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