SIMULADO - Plataformas Moleculares para as Atividades Biológicas

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SIMULADO - Plataformas Moleculares para as Atividades Biológicas 
AULA 01: 
 
 
 
 
1. 
 
 
(SESAU, 2010): O RNA difere quimicamente do 
DNA por apresentar: 
 
 
ribonucleotídeos e possuir a base timina. 
 
desoxirribonucleotídeos e possuir a base uracila; 
 ribonucleotídeos e por possuir a base uracila; 
 
desoxirribonucleotídeos e por possuir a base timina; 
 
ribonucleotídeos e possuir as bases timina e uracila; 
 
Explicação: 
Desoxirribonucleotídeos e a base nitrogenada timina são encontrados apenas no 
DNA. 
 
 
2. 
 
 
São exemplos de ácidos nucleicos: 
 
 
Monossacarídeos e dissacarídeos; 
 
Proteínas e lipídios; 
 
Timina e uracila. 
 
Adenina e guanina; 
 DNA e RNA; 
 
Explicação: 
As demais alternativas fornecem exemplos de outras macromoléculas ou bases 
nitrogenadas. 
 
 
 
 
3. 
 
 
Identifique as principais etapas do protocolo de 
extração de ácidos nucleicos: 
 
 
Hidratação, Purificação, Lise celular e Precipitação. 
 
Hidratação, Lise celular, Purificação e Precipitação; 
 
Lise celular, Hidratação, Precipitação e Purificação; 
 Lise celular, Purificação, Precipitação e Hidratação; 
 
Precipitação, lise celular, purificação e Hidratação. 
 
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Explicação: 
A extração de ácidos nucleicos envolve etapas sequenciais de ruptura celular e 
exposição do ácido nucleico, seguida da purificação do material de interesse com a 
remoção de contaminantes. Em seguida, realiza-se a precipitação do alvo 
e consequente hidratação do mesmo. 
 
 
4. 
 
 
(IFF, Farroupilha-RS, 2016): O processo de extração e a 
purificação do DNA genômico compreende vários 
passos: 
 
 
Lise das células, extração de lipídeos e desoxiribonucleicos e precipitação 
do DNA. 
 
Lise das células, extração de ácidos desoxiribonucleicos e precipitação do 
RNA; 
 
Lise das células, centrifugação e ressuspensão do DNA; 
 Lise das células, extração das proteínas mais RNA e precipitação do DNA; 
 
Quebra de lipídeos, precipitação do RNA e lise das proteínas; 
 
Explicação: 
O processo de extração de DNA envolve etapas sequenciais de rompimento celular 
e exposição do ácido nucleico, remoção dos contaminantes de proteínas e RNA, 
culminando com a precipitação final do DNA de interesse. 
 
 
5. 
 
 
Na técnica de extração de ácidos nucleicos (DNA/RNA), 
quais os reagentes que podem ser utilizados? 
 
 Todas as alternativas estão corretas; 
 
Etanol 70% e isopropanol; 
 
Fenol e clorofórmio; 
 
Partículas de sílica e tiocianato de guanidina; 
 
Todas as alternativas estão erradas. 
 
 
Explicação: 
Todos os ítens listados podem ser utilizados para viabilizar a técnica de extração de 
acidos nucleicos. 
 
 
6. 
 
(IGP, 2008): Analise as afirmações abaixo sobre a 
estrutura e composição dos ácidos nucléicos. 
I Quatro aspectos principais definem a estrutura da 
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molécula de DNA: a dupla-hélice, o diâmetro uniforme, o 
giro para a direita e o antiparalelismo. 
II Considerando a regra de Chargaff, A+G = T+C; já a 
razão A+T para G+C varia entre as espécies. 
III As ligações químicas existentes entre as bases 
nitrogenadas são de hidrogênio, já as ligações entre o 
açúcar e a base nitrogenada são do tipo fosfodiéster. 
IV Um nucleosídeo é composto por um açúcar e uma base 
nitrogenada, já um nucleotídeo é composto por um açúcar, 
uma base nitrogenada e um grupamento fosfato. 
 Quais estão corretas? 
 
 Apenas a I, a II e a IV; 
 
A I, a II, a III e a IV. 
 
Apenas a I e a II; 
 
Apenas a I, a II e a III; 
 
Apenas a III e a IV; 
 
Explicação: 
As ligações químicas estabelecidas entre as bases nitrogenadas de ambas as fitas de 
DNA são do tipo pontes de hidrogênio, enquanto as ligações químicas estabelecidas 
entre o açúcar e a base nitrogenada são as ligações n-glicosídicas.. 
 
AULA 02: 
 
 
 
 
1. 
 
 
(UFRJ, 2012): Para uma reação de PCR ocorrer 
corretamente, são necessários os seguintes 
componentes: 
 
 
uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribonucleotídeos trifosfatados, 
um par de iniciadores e um molde de ácido nucleico; 
 
uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos 
trifosfatados, dois pares de iniciadores e um molde de ácido nucleico; 
 
uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleosídeos, um par de 
iniciadores e um molde de DNA; 
 
uma polimerase de DNA termoestável, desoxirribonucleotídeos 
trifosfatados, um par de iniciadores e um molde de DNA. 
 
uma polimerase de DNA termolábil, desoxirribo-nucleotídeos trifosfatados, 
um iniciador e um molde de RNA; 
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Explicação: 
A polimerase deve ser termoestável para aguentar as oscilações de temperatura a 
que será submetida no termociclador. Desoxirribonucleosídeos não possuem 
grupamento fosfato, e portanto, não são considerados monômeros úteis para a 
polimerização. Apenas um iniciador não será capaz de delimitar a região de 
amplificação. Um molde de RNA só é utilizado em reações de RT-PCR, ou seja, 
reações de transcrição reversa acopladas à PCR. 
 
 
2. 
 
 
(PC, PI, 2018) - Em investigações criminais, alguns fios 
de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos 
corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido 
a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a 
solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA 
disponível para análise é limitada, contudo com a técnica 
de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor 
vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, 
aumentando a quantidade de material e proporcionando o 
suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a 
análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção 
correta: 
 
 
A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de 
fluorescência; 
 
Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, 
Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs); 
 
Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de 
desnaturação. 
 
Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma 
eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida; 
 
As etapas utilizadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq 
polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem; 
 
Explicação: 
A Taq polimerase só pode realizar a extensão da nova fita de DNA se houver o 
anelamento prévio dos primers na fita molde. Uma solução tampão contendo íons e 
o par de iniciadores também são necessários para a viabilização da reação de PCR. 
A PCR convencional em si não permite a quantificação dos produtos por 
fluorescência como a PCR em tempo real, embora indiretamente possamos alcançar 
uma quantificação indireta por meio de gel de agarose, reagente Low mass, e 
sistemas de coloração para a análise dos amplicons. 
 
 
3. 
 
 
(INMETRO, 2010): A técnica de PCR (reação em 
cadeia de polimerase), a mais utilizada para 
amplificação (clonagem) do DNA in vitro, 
revolucionou o acesso a informações genéticas. Com 
relação a essa técnica, assinale a opção correta: 
 
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A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para 
separar o fragmento amplificado do restante do genoma. 
 
Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade 
mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de 
DNA; 
 
Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser 
executada; 
 
A PCR também pode seraplicada na análise de proteínas; 
 
Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita 
dupla; 
 
Explicação: 
Os primers só são capazes de hibridizar na molécula de DNA após a sua 
desnaturação. A PCR é utilizada apenas para análise de ácidos nucleicos. É 
executada em 2h aproximadamente. Não é necessário purificar o fragmento 
amplificado do resto do genoma. 
 
 
4. 
 
 
(POLÍCIA CIENTÍFICA, PE, 2016) - Acerca da reação 
em cadeia da polimerase (PCR), assinale a opção correta: 
 
 
O último passo da PCR, a polimerização, é a excisão da fita de DNA no 
sentido 3'→5', começando no primeiro nucleotídeo do primer iniciador 
incorporado; 
 
Os iniciadores são pequenos fragmentos sintéticos de DNA de fita dupla, 
usualmente com extremidade 3'-OH, e complementares à sequência do 
segmento de DNA de interesse; 
 
A reação de PCR é dependente da atividade de cópia de fragmentos de 
DNA, catalisada pela enzima DNA sintetase; 
 
PCR é a tecnologia por meio da qual são produzidos bilhões de cópias de 
fragmentos de DNA. Os fragmentos do DNA amplificado pela PCR são 
chamados amplicons e podem ser tipificados usando-se diferentes 
métodos. 
 
A enzima termoestável direciona o posicionamento dos precursores de 
DNA ― dNTP ― iniciando a síntese de novas fitas de DNA. A 
temperatura ideal para a polimerização varia entre 25 ºC e 45 ºC; 
 
Explicação: 
A enzima é chamada DNA polimerase. Os iniciadores são moléculas fita-simples 
com a extremidade 3´OH livre, complementares às bordas do fragmento de interesse. 
A fita de DNA molde lida no sentido 3´--> 5´ não é removida após a 
polimerização/extensão da fita nascente no sentido 5´ --> 3´ na última etapa de um 
ciclo de PCR. Na ciclagem subsequente, esse DNA hídrido será desnaturado, 
disponibilizando ambas as fitas como molde para novas reações de polimerização. O 
estabelecimento dos dNTPs a serem incorporados pela enzima termoestável se dá 
pela fita de DNA molde, em função da complementariedade de bases. A temperatura 
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ideal de polimerização varia entre 50-55°C. 
 
 
 
5. 
 
 
(Fiocruz, 2010): A retrotranscrição de RNA 
genômico viral em moléculas de DNA 
complementar para a sua detecção por técnica 
de PCR é denominada: 
 
 
Imunoperoxidase; 
 
PCR em tempo real; 
 
microscopia ótica; 
 RT-PCR; 
 
sequenciamento. 
 
Explicação: 
Do inglês: Reverse transcription polymerase chain reaction. 
 
 
 
6. 
 
 
(Fiocruz, 2010): Sobre a utilização da técnica de 
PCR com a finalidade de diagnóstico molecular, 
analise as afirmativas a seguir. 
I. Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma 
DNA Polimerase dependente de DNA, somente os 
vírus cujo genoma é constituído por DNA podem 
ser detectados pela técnica de PCR. 
II. É possível detectar microorganismos diferentes 
em uma mesma reação de PCR, desde que se utilize 
na reação pares de iniciadores específicos para cada 
microorganismo que se queira detectar. 
III. A utilização da técnica de PCR para diagnóstico 
molecular terá sempre e somente caráter qualitativo. 
Assinale: 
 
 
se somente a afirmativa III estiver correta; 
 
se somente as afirmativas I e II estiverem corretas; 
 
se todas as afirmativas estiverem corretas. 
 se somente a afirmativa II estiver correta; 
 
se somente a afirmativa I estiver correta; 
 
 
 
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Explicação: 
É possível detectarmos patógenos cujo genoma seja RNA através de RT-PCR, ou 
seja, transcrição reversa acoplada à PCR. Também podemos quantificar o nosso 
alvo através da PCR em tempo real ou, indiretamente, mensurar aproximadamente 
a sua quantidade através de gel de agarose, reagente Low mass e sistema de 
coloração adequado para análise dos amplicons. 
 
AULA 03: 
 
 
 
 
1. 
 
 
(Adaptada de UFMG, 2013) - Em relação à 
espectrofotometria, é incorreto afirmar que: 
 
 
a energia é transmitida por ondas eletromagnéticas que são caracterizadas 
pela frequência e comprimento de onda; 
 
a espectrofotometria permite estimar a concentração de soluções. 
 
a espectrofotometria é a medida da intensidade da luz em comprimentos de 
onda selecionados; 
 
a absorvância é a capacidade de uma substância em absorver ou transmitir 
radiação; 
 
a luz visível para o olho humano é a região do espectro eletromagnético 
com comprimento de onda entre 390 e 780 nm; 
 
Explicação: 
Absorbância e transmitância são conceitos não sinônimos e inversamente 
proporcionais; isto é, quanto maior a absorbância, menor a transmitância, e vice-
versa. 
 
 
2. 
 
 
(SESAU, RO, 2017) - Técnica baseada na 
separação de partículas em um determinado gel 
de acordo com sua massa e carga. Pode ser 
utilizada para separação de diversas moléculas 
orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e 
DNA. A técnica de separação descrita no texto é 
denominada: 
 
 
cromatografia. 
 
centrifugação; 
 eletroforese; 
 
floculação; 
 
filtração; 
 
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Explicação: 
As demais técnicas citadas não envolvem a utilização de campo elétrico para a 
separação das partículas em função de seus respectivos pesos moleculares. 
 
 
3. 
 
 
(Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, 
uma metodologia amplamente empregada para 
separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos 
nucleicos, assinale a opção correta: 
 
 
A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser 
realizada em gel de poliacrilamida; 
 
Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus 
grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados 
em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. 
 
A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de 
tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; 
 
A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal 
sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as 
moléculas; 
 
A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor 
precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como 
instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração; 
 
Explicação: 
A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a 
eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e 
proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as 
partículas são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é 
determinado em função da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos 
seus respectivos grupamentos fosfato, o DNA possui cargas semelhante. 
 
 
4. 
 
 
(Prefeitura de Barra Mansa, RJ, 2010) - Eletroforese em 
gel é uma técnica de separação de moléculas que 
envolve a migração de partículas em um determinado 
gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. 
Em relação à eletroforese em gel é correto afirmar que: 
 
 
na migração do DNA em um gel de agarose, sendo o DNA positivamente 
carregado, ele é atraído pelo eletrodo negativo; 
 
Na migração do DNA em um gel de agarose, sendo o DNA negativamente 
carregado, ele é atraído pelo eletrodo negativo; 
 
após a eletroforese em gel, os fragmentos de DNA normalmente são 
corados com brometo de etídeo, que possui afinidade pelo DNA e fluoresce 
(torna-se visível) vivamente em contato com a luz infra-vermelha. 
 
as moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, as de maior 
massa situam-se na porção superior do gel e as de menor massa na região 
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inferior; 
 
as moléculassão separadas de acordo com o seu tamanho, as de menor 
massa situam-se na porção superior do gel e as de maior massa na porção 
inferior; 
 
 
Explicação: 
O DNA possui carga negativa, o que faz com que a migração ocorra do polo 
negativo (repulsão) em direção ao polo positivo (atração). A facilidade com que isso 
ocorre depende do tamanho das partículas. As maiores ficam atrasadas na trama do 
polímero, e são retardadas na migração, fazendo com que ocupem 
posições superiores no gel. Para a revelação do resultado, é necessário excitar o 
brometo de etídeo com luz UV. 
 
5. 
 
 
(FIOCRUZ, 2010) - Analise as afirmativas a 
seguir: 
I. A eletroforese em gel é uma técnica de 
separação de moléculas que envolve a migração 
de partículas em um determinado gel durante a 
aplicação de uma diferença de potencial. 
II. A eletroforese em gel é utilizada para separar 
proteínas e moléculas de DNA e RNA. 
III. Existem vários tipos de eletroforese em gel 
para analisar proteínas durante o processo de 
purificação. Entre elas, estão a eletroforese em 
gel de poliacrilamida contendo dodecil de sódio 
sulfatado (SDS-PAGE), a eletroforese em gel 
de poliacrilamida não desnaturante (Native 
PAGE) e o gel em duas dimensões. 
Assinale: 
 
 se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas; 
 
se apenas a afirmativa I estiver correta; 
 
se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas. 
 
se apenas a afirmativa II estiver correta; 
 
se apenas a afirmativa III estiver correta; 
 
Explicação: 
A eletroforese bidimensional não é utilizada para avaliação do grau de pureza, mas 
sim para a separação simultânea de um conjunto de proteínas presentes em uma 
amostra, através da diferença entre seus pesos moleculares e pontos isoelétricos. 
 
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6. 
 
 
(Adaptada de IF, RN, 2017) - Entre as técnicas usadas na 
biotecnologia: 
 
 
na técnica do DNA recombinante, utilizam-se as endonucleases e a Taq 
polimerase para unir as duas fitas de DNA; 
 
a biobalística usa microprojéteis revestidos com DNA para identificar 
trechos que se repetem no DNA; 
 
na reação em cadeia da polimerase (PCR), utiliza-se a DNA helicase para 
separar as fitas de DNA a 94° C; 
 
Nenhuma das alternativas acima. 
 
a eletroforese é usada para separar fragmentos de DNA de tamanhos 
diferentes a partir de corrente elétrica; 
 
Explicação: 
Na técnica de PCR, promovemos a desnaturação das fitas de DNA através de 
processo térmico, e não enzimático. Na técnica de DNA recombinante, além de 
endonucleases, utilizamos as DNA ligases para promover o restabelecimento das 
ligações químicas. A biobalística corresponde a uma estratégia de transferência 
gênica/transformação de organismos. 
 
AULA 04: 
 
 
 
1. 
 
 
(INCA, 2014): Um oligonucleotídeo de DNA curto 
utilizado para amplificação por PCR é 
adequadamente chamado de: 
 
 primer; 
 
inserto; 
 
polimerase; 
 
vetor. 
 
sonda; 
 
 
 
Explicação: 
As sondas são utilizadas para a detecção de ácidos nucleicos. Insertos 
correspondem a pequenos fragmentos de DNA os quais são clonados em 
plasmídeos ou vetores, utilizados para a transferência de material genético. A 
polimerase é a enzima responsável pela amplificação do ácido nucleico. 
 
 
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2. 
 
 
(Fiocruz, 2010) - Assinale a afirmativa incorreta: 
 
 
A metodologia de PCR em Tempo - Real é a única metodologia de PCR 
quantitativo existente; 
 
Na metodologia de PCR em Tempo - Real, quanto maior for a quantidade 
de DNA alvo presente em uma dada amostra um menor número de ciclos de 
PCR será necessário para se obter uma quantidade de fluorescência a partir 
desta dada amostra acima do ruído de fundo do aparelho (Ct); 
 
Na metodologia de PCR em Tempo - Real, a utilização de sondas marcadas 
com fluoróforos permite a realização de reações multiplex; 
 
A técnica de PCR em Tempo - Real é mais sensível que a técnica de PCR 
convencional. 
 
É a curva de dissociação obtida ao final da corrida de PCR em Tempo - 
Real que permite a verificação da especificidade da amplificação obtida; 
 
 
 
Explicação: 
A metodologia de PCR digital corresponde a um avanço da metodologia de PCR 
em tempo real, permitindo a quantificação de ácidos nucleicos com grande 
sensibilidade e dispensando a necessidade de curva-padrão. 
 
 
 
 
 
3. 
 
 
(Fiocruz, 2010): A técnica de PCR em tempo real 
permite ao usuário detectar, diferenciar variantes 
virais e quantificar ácidos nucléicos provenientes de 
uma infecção viral em uma única reação em tempo 
real, enquanto o PCR convencional basicamente 
permite apenas a detecção de ácidos nucléicos em 
uma única reação. De acordo com a frase acima, 
assinale a afirmativa correta: 
 
 
Está parcialmente errada, uma vez que é possível quantificar em tempo real 
o PCR convencional; 
 
Está parcialmente errada, uma vez que não é possível quantificar ácidos 
nucléicos por PCR em tempo real. 
 
Está totalmente correta; 
 
Está parcialmente errada, uma vez que não é possível diferenciar ácidos 
nucléicos no PCR em tempo real; 
 
Está parcialmente errada, uma vez que também é possível distinguir 
diferentes variantes virais no PCR convencional em uma única reação (por 
exemplo, PCR multiplex); 
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Explicação: 
O PCR multiplex permite a amplificação de dois ou mais alvos genômicos na 
mesma reação de PCR. 
 
 
 
 
 
4. 
 
 
(UFES, 2015): Considere as seguintes afirmações 
sobre a reação em cadeia da DNA polimerase 
(PCR): 
 
I. Segmentos específicos de DNA podem ser 
facilmente amplificados a milhões de cópias. 
II. A PCR pode ser utilizada em medicina forense e 
diagnósticos clínicos. Produtos da reação de PCR 
podem ser usados em clonagem. 
III. A PCR utiliza uma DNA-polimerase 
termoestável, porque, para cada etapa de 
amplificação, o DNA de fita dupla deve ser 
desnaturado pelo calor. 
 
É correto o que se afirma em: 
 
 
I apenas; 
 
II e III apenas; 
 I, II e III. 
 
II apenas; 
 
I e II apenas; 
 
 
 
Explicação: 
Todas as afirmativas estão corretas. 
 
 
 
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5. 
 
 
(INCA, 2014): Qual afirmação descreve com 
precisão o processo de PCR? 
 
 
Os produtos de PCR são inibidores da reação em cadeia da polimerase; 
 
A reação de PCR amplifica geometricamente um fragmento de DNA. 
 
O peso molecular do fragmento de DNA não é diagnóstico de 
especificidade de um PCR; 
 
É necessário um par de primers para a amplificação de um fragmento de 
DNA; 
 
A reação de PCR requer um tipo especial de enzima de restrição; 
 
 
 
Explicação: 
Os produtos de uma etapa da reação de PCR servem como substrato para as etapas 
subsequentes. Não é necessário utilizar enzima de restrição para essa metodologia. 
O uso de pesos moleculares auxilia na deteção de amplificações inespecíficas. A 
amplificação é considerada exponencial. 
 
 
 
 
 
6. 
 
 
(PC, DF, 2012) - O propósito da PCR é fazer um 
número imenso de cópias de um determinado 
fragmento gênico, cujo tamanho pode variar de 
poucos pares de base até milhares de pares de base. 
A PCR é constituída de três ciclos. Assinale a 
alternativa que apresenta esses ciclos: 
 
 
fase de desnaturação, fase de captação e fase de extensão. 
 
fase de desnaturação, fase de fixação e fase de hibridização ou anelamento; 
 
fase de desnaturação, fase de hibridização ou anelamento e fase de 
extensão; 
 
fase de desnaturação, fase de extensão ou anelamento e fase de fixação; 
 
fase de desnaturação, fase de hibridização e fase de fixação ou anelamento; 
 
 
 
Explicação: 
As fases de fixação e captaçãonão fazem parte da reação de PCR. Além disso, só é 
possível a fase de extensão se, na fase imediatamente anterior, houver a 
hibridização ou anelamento dors primers com a fita molde. 
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AULA 05: 
 
 
 
1. 
 
 
(IF, TO, 2016): As técnicas de hibridação Northern 
Blotting, Southern Blotting e Western Blotting 
permitem estudar respectivamente: 
 
 
DNA, proteínas e RNA; 
 RNA, DNA e proteínas; 
 
Proteínas, RNA e DNA. 
 
DNA, RNA e proteínas; 
 
RNA, proteínas e DNA; 
 
 
 
Explicação: 
Blotting significa a transferência de macromoléculas, sejam elas ácidos nucleicos ou proteínas, de um gel de 
eletroforese para a superfície de uma membrana. Em função das moléculas de interesse, existem três variações 
de técnicas blotting: Southern Blot (DNA), Northern Blot (RNA) e Western Blot (proteínas). 
 
 
 
 
 
2. 
 
 
(FGV, 2010): Num estudo para verificar se a 
espécie "A" de bactéria apresenta e expressa um 
gene similar ao gene tox da espécie "B", seria 
correto afirmar que: 
 
 
uma hibridação tipo Southern-blot com sonda tox marcada com DNA total, 
indicaria que um DNA similar a este gene está presente em "A" sem 
informação sobre transcrição ou tradução do mesmo; 
 
uma hibridação tipo Northern-blot com sonda tox marcada empregando 
amostras de RNA total da espécie "A", indicaria que de fato este gene é 
traduzido na espécie "A"; 
 
a obtenção de um produto de PCR amplificado a partir de iniciadores 
para tox da espécie "B" comprova a presença de um gene tox sendo 
expresso na espécie "A"; 
 
uma hibridação tipo Southern-blot com sonda tox marcada empregando 
amostras de DNA total da espécie "A", indicaria que de fato este gene é 
expresso na espécie "A"; 
 
uma hibridação tipo Western-blot com sonda tox marcada empregando 
amostras de DNA total da espécie "A", indicaria que um DNA similar a este 
gene está presente no genoma da espécie "A". 
 
 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
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Explicação: 
A obtenção de produtos de PCR amplificados utilizando-se iniciadores para tox 
apenas detecta a presença do gene, assim como a hibridização por Southern 
Blot. Para avaliação da expressão gênica por hibridização, seria necessário realizar 
a técnica de Northern Blot. Para avaliação da tradução do gene por técnica de 
hibridização, seria necessária a realização de Western Blot. 
 
 
 
 
 
3. 
 
 
(Adaptada de INCA, 2010): A respeito dos testes 
sorológicos, complete a lacuna a seguir: 
 
"_______________ é uma técnica sorológica que 
detecta a presença de anticorpos específicos contra o 
HIV." 
 
 
Northern Blot; 
 Western Blot. 
 
Clonagem; 
 
Southern Blot; 
 
PCR; 
 
 
 
Explicação: 
Western blot é a técnica de hibridização utilizada para a detecção de proteínas. 
 
 
 
 
 
4. 
 
 
(UFRJ, 2013): Selecione a opção que contém as 
etapas necessárias para execução do protocolo de 
Western blotting: 
 
 
Transferência do DNA do gel para membrana; incubação com sonda 
hibridizadora radioativa; revelação. 
 
Transferência de proteínas do gel para membrana; bloqueio da membrana; 
incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; 
revelação. 
 
Cromatografia de afinidade; incubação com anticorpo primário; incubação 
com anticorpo secundário; revelação. 
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Desnaturação de proteínas; incubação com anticorpo primário; incubação 
com anticorpo secundário; revelação. 
 
Imobilização em coluna de afinidade, eluição com tampão glicina, 
neutralização do eluato, dot blot. 
 
 
 
Explicação: 
É necessária a transferência das proteínas para uma membrana, onde as reações 
antígeno x anticorpo se processarão. Colunas de afinidade não são necessárias 
nesse procedimento. 
 
 
 
 
 
5. 
 
 
(Adaptada de UFG, 2017): A identificação e 
quantificação de moléculas específicas em células e 
tecidos pode ser realizada pela interação antígeno-
anticorpo. Qual metodologia utiliza dessa interação 
para identificação molecular? 
 
 
qRT-PCR; 
 
espectrometria de massa; 
 
Nenhuma das alternativas acima. 
 
espectrofotometria; 
 Western Blot; 
 
 
 
Explicação: 
As demais metodologias citadas não envolvem interação antígeno x anticorpo. 
 
 
 
 
 
6. 
 
 
Considerando os princípios das técnicas de 
hibridização e suas aplicações dentro da biologia 
molecular, assinale a alternativa correta: 
 
 
Southern, Northern e Western Blotting podem ser utilizadas para estudos 
envolvendo expressão gênica; 
 
A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é 
o Southern Blotting; 
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A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é 
o Northern Blotting; 
 
Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. 
 
A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é 
o Western Blotting; 
 
 
 
Explicação: 
A técnica de Northern blot corresponde a uma técnica de hibridização de moléculas 
de RNA com sondas de oligonucleotídeos marcadas. Trata-se de uma metodologia 
útil, portanto, na detecção de RNA mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão 
gênica, na avaliação da degradação de RNA e splicing, por exemplo. 
 
AULA 06: 
 
 
 
 
1. 
 
 
(Adaptada de UERJ, 2015): A eletroforese foi 
realizada pela primeira vez em 1937, por Arne 
Tiselius, trabalho que lhe rendeu um prêmio Nobel. 
Desde então, variações dessa técnica têm sido 
usadas na prática analítica. A técnica que separa 
proteínas de acordo com seus pontos isoelétricos e 
suas massas moleculares é conhecida como: 
 
 
Nenhuma das alternativas acima. 
 eletroforese bidimensional; 
 
eletroforese capilar; 
 
zimografia; 
 
cromatografia líquida; 
 
Explicação: 
A corrida eletroforética tem duas dimensões, por isso, é chamada bidimensional. 
Na primeira dimensão, as proteínas são separadas de acordo com seus pontos 
isoelétricos. Na segunda dimensão, as mesmas são separadas de acordo com as suas 
massas moleculares. 
 
 
2. 
 
(Adaptada de UFTM, 2016): A eletroforese é uma 
técnica muito utilizada nos laboratórios de bioquímica, 
com a finalidade de acompanhar a purificação, a 
expressão e isolamento de proteínas para análise por 
espectrometria de massa ou determinar a massa 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
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molecular (Mr) da proteína. Analise as afirmações abaixo 
e escolha a alternativa correta: 
 
 
Nenhuma das alternativas acima. 
 
Em um gel SDS-PAGE as proteínas com maior massa molecular (Mr) 
são encontradas na parte inferior do gel. 
 
Eletroforese descreve a migração de uma partícula carregada sob 
influência de um campo elétrico. 
 
A separação eletroforética de proteínas é comumente realizada 
empregando-se géis de agarose, os quais possuem alta capacidade de 
resolução. 
 
A eletroforese desnaturante separa as proteínas com relação à sua carga 
e forma. 
 
Explicação: 
Os géis de agarose são preferencialmente utilizados para análises de ácidos 
nucleicos. A eletroforese desnaturante confere às proteínas carga negativa, fazendo 
com que a separação ocorra apenas pela diferença de peso molecular. As proteínas 
de maior peso molecular ficam atrasadas na trama do gel, ocupando posições 
superiores. 
 
3. 
 
 
(Policia Cientifica, PR, 2017): A espectrometria 
de massa é uma técnica utilizada para o estudo 
de massas de átomos, moléculas ou fragmentos 
de moléculas, desde que estes estejam 
eletricamente carregados.A respeito desse 
assunto, julgue as afirmações. 
 
I. Um espectrômetro de massas determina a 
massa de uma molécula ou átomo medindo a 
razão massa/carga dos íons gerados; 
II. Os íons são gerados pela indução, perda ou 
ganho de carga por uma espécie eletricamente 
neutra; 
III. Uma vez formados, os íons são 
direcionados, por forças eletrostáticas, para 
dentro do analisador de massas, separados de 
acordo com suas razões massa/carga e 
finalmente detectados. 
 
Assinale a alternativa correta: 
 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
Estão corretas apenas as afirmativas I e III; 
 
Está correta apenas a afirmativa I. 
 Estão corretas todas as afirmativas; 
 
Estão corretas apenas as afirmativas II e III; 
 
Estão corretas apenas as afirmativas I e II; 
Explicação: 
Todas as alternativas estão corretas. 
 
 
4. 
 
 
(Fiocruz, 2010): Com relação aos métodos de 
coloração de proteínas em gel, assinale a 
alternativa correta: 
 
 
A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações 
onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do 
sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta 
técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de 
proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais 
sensíveis. 
 
A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de 
eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade; 
 
A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de 
eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez 
que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel; 
 
A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as 
proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de 
massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o 
tratamento com nitrato de prata; 
 
A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese 
bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto 
grau de sensibilidade; 
 
Explicação: 
A coloração por prata é mais sensível que a coloração por Coomassie 
blue; entretanto, seu emprego em espectrometria de massa requer cautela, em 
função da ligação cruzada de proteínas. 
 
 
 
 
 
5. 
 
(UnB, Cespe): Em um experimento de proteômica, 
ao se analisar géis de eletroforese bidimensional 
provenientes de amostras de eritrócitos humanos, 
comparando-se duas situações diferentes (exposto 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
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versus não exposto a um medicamento), foram 
analisadas amostras de 3 indivíduos em cada 
condição, sendo cada amostra analisada em 
triplicata, em um total de 18 géis. Para que seja 
possível determinar quais proteínas devem ser 
identificadas como presentes em quantidades 
distintas nas duas condições, é necessário realizar 
determinadas etapas. Assinale opção que apresenta a 
ordem correta de realização dessas etapas: 
 
 
pareamento dos spots entre todos os grupos; análise estatística 
comparando as coordenadas cartesianas dos spots; detecção, para 
delimitação das áreas dos spots; 
 
detecção, para delimitação das áreas dos spots; pareamento dos spots 
em cada grupo e, a seguir, entre os grupos; análise estatística 
comparando as intensidades dos spots; 
 
pareamento, para delimitação das coordenadas e da intensidade de cada 
spot; detecção, para a comparação entre os grupos; análise estatística 
para validação dos dados de detecção; 
 
detecção, para determinação das coordenadas cartesianas dos spots; 
análise estatística da variação de massa molecular de cada spot; 
pareamento com base nas intensidades de cada spot. 
 
análise estatística comparando massa molecular e pI dos spots; 
detecção, para delimitação das coordenadas cartesianas de cada spot; 
pareamento entre os spots de cada grupo; 
Explicação: 
Existem softwares que comparam os géis bidimensionais permitindo a contagem do 
número de spots, a caracterização automática dos valores de pI e massa molecular, 
análise de níveis de expressão e etc, validando os dados estatisticamente ao final. 
 
6. 
 
 
(Fiocruz, 2010): Nas análises rotineiras de 
eletroforese bidimensional, após a ruptura dos 
tecidos e/ou das células, as proteínas são 
solubilizadas e desnaturadas em soluções 
contendo detergentes não iônicos ou 
zwiteriônicos, agentes caotrópicos e pequenas 
quantidades de agentes redutores, para posterior 
análise em gel. Assinale abaixo a única 
alternativa que não descreve exemplos, 
respectivamente, destas três classes de 
substâncias: 
 
 
sulfobetaínas, tiouréia e β-mercaptoetanol. 
 
CHAPS (3-[(3-Cloroamidopropil)dimetilamônio]-1 propanosulfonato), 
uréia e iodoacetamida; 
 Duodecil sulfato de sódio, uréia e Ditiotreitol; 
 
Triton-X100, tiouréia e β-mercaptoetanol; 
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Triton X-100, hidrocloreto de guanidina e Ditiotreitol; 
Explicação: 
O duodecil sulfato de sódio (SDS) é um agente caotrópico. 
 
AULA 07: 
 
 
 
 
1. 
 
 
(Adaptado de CESPE, 2017): O projeto genoma, 
que tratou do sequenciamento das bases que 
compõem o genoma humano e da variação entre os 
indivíduos da espécie, trouxe benefícios diretos à 
saúde humana e de outros organismos vivos, além 
de melhorias na agropecuária, indústria 
farmacêutica, ciência forense, metodologia 
científica e no desenvolvimento de instrumentos de 
análise laboratorial e computacional, entre outros. 
Portanto, o projeto genoma humano não se 
restringiu apenas ao genoma humano. Acerca desse 
assunto, complete as lacunas do texto a seguir: 
 "O conhecimento do genoma humano ajudou a 
consolidar a ideia da importância das 
____________________ gênicas, que é a origem 
dos alelos, na promoção de 
____________________ genéticas entre indivíduos 
de uma mesma espécie e na busca de homologias 
entre o genoma humano e os de outros organismos." 
 
 Mutações/ variações; 
 
Frequências/ variações; 
 
Frequências/ trocas; 
 
Mutações/ trocas; 
 
Nenhuma das alternativas acima. 
Explicação: 
O conhecimento das sequências nucleotídicas em uma amostra permitiu estudos 
subsequentes sobre a diversidade populacional, frequência das mutações, estudo 
das relações entre grupos de indivíduos através de estudos filogenéticos e etc. 
 
 
2. 
 
 
(INSTITUTO AOCP, 2018): Considerando as técnicas de 
sequenciamento do DNA, a respeito das características 
desse tipo de procedimento, assinale a alternativa correta: 
 
 
O método de dideoxinucleotídeos utiliza o grupo 3-hidroxila; 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
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A presença de ddNTPs na reação dispensa a adição de desoxinucleotídeos 
trifosfato normais; 
 
Os fragmentos resultantes são separados eletroforeticamente e submetidos à 
autorradiografia; 
 
O método Sanger também é conhecido como sequenciamento de nova 
geração; 
 
A utilização de vetores plasmidiais, em técnicas de subclonagem de 
fragmentos de DNA, é denominada "pirossequenciamento". 
Explicação: 
Devido à ausência do grupamento hidroxila no carbono 3´ da pentose, os 
nucleotídeos modificados não possuem capacidade de fazer ligação química com 
um próximo nucleotídeo. O sequenciamento de nova geração corresponde a uma 
metodologia mais moderna de sequenciamento genômico, de alta vazão, ao 
contrário do método de Sanger. A presença de ddNTPs não dispensa a necessidade 
de dNTPs, uma vez que, é necessário produzir moléculas de DNA com diferentes 
extensões para se elucidar a ordem das bases nitrogenadas. Se apenas ddNTPs 
estivessem presentes, as moléculas seriam abortadas precocemente, tão logo um 
ddNTP fosse incorporado. As reações de pirosequenciamentodispensam a 
necessidade de clonagem molecular. 
 
 
3. 
 
 
(Adaptada de CESPE, 2013): Considerando que o esquema 
abaixo apresenta o sequenciamento de DNA, processo 
responsável por uma verdadeira revolução nas ciências 
biológicas, avalie o gel abaixo: 
 
Pelo perfil apresentado no gel, a ordem correta de bases 
nitrogenadas do fragmento sequenciado é: 
 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
5´-TGCCAT-3´ 
 
5´-TACCGT-3´ 
 
Nenhuma das alternativas acima. 
 
5´-ATGGCA-3´ 
 
 
5´-ACGGTA-3´ 
 
Explicação: 
Para elucidar a ordem das bases nitrogenadas, o gel deve ser lido de baixo para 
cima, ou seja, do menor fragmento para o maior fragmento. Além disso, o resultado 
respeita o sentido 5´-3´ de polimerização. 
 
 
4. 
 
 
(Adaptada de CESPE, 2018): Complete as lacunas do 
texto a seguir, a respeito do projeto genoma (humano e 
outros) e às estratégias de sequenciamento disponíveis: 
"As técnicas de sequenciamento genômico se baseiam na 
_______________ da dupla fita de 
_______________ em moléculas de fita simples." 
 
 
Transcrição/RNA; 
 
Tradução/RNA; 
 
Tradução/ DNA; 
 
Transcrição/ DNA; 
 Nenhuma das alternativas acima. 
Explicação: 
As técnicas de sequenciamento visam elucidar a ordem das bases nitrogenadas que 
compõem as moléculas de DNA. 
 
 
5. 
 
 
(Adaptado de CESPE, 2018): Complete as lacunas do texto a 
seguir, a respeito do projeto genoma (humano e outros) e às 
estratégias de sequenciamento disponíveis: 
"No projeto genoma humano, foi empregado o método de 
Sanger, que adicionava 
____________________ modificados, os 
didesoxirribonucleotídeos, para ____________________ o 
crescimento de um fragmento de DNA em replicação pela 
____________________." 
 
 
Primers/ impedir/ DNA polimerase; 
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Primers/ estimular/ RNA polimerase; 
 
Nucleotídeos/ estimular/ RNA polimerase; 
 
Nucleotídeos/ delimitar/ DNA ligase. 
 Nucleotídeos/ impedir/ DNA polimerase; 
 
Explicação: 
O método de Sanger se baseia na interrupção da cadeia nucleotídica em 
crescimento pela DNA polimerase, através da incorporação de nucleotídeos 
modificados, os quais não permitem ligações químicas. 
 
 
6. 
 
 
(INSTITUTO AOCP, 2018): Preencha as lacunas e assinale 
a alternativa correta: 
"As duas técnicas mais importantes para o sequenciamento 
de DNA são o método ____________________ 
desenvolvido por Allan Maxam e Walter Gilbert, em 1977, e 
o método ____________________ de Fred Sanger e 
colaboradores, de 1978. Os dois métodos são baseados na 
produção de um conjunto de fitas simples de DNA que são 
separadas pelo princípio de eletroforese." 
 
 
físico de degradação / desoxi ou terminação de cadeia; 
 
químico de depleção de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; 
 químico de degradação de bases / didesoxi ou terminação de cadeia; 
 
físico de depleção de bases / desoxi ou terminação de cadeia; 
 
físico de depleção de bases / didesoxi de iniciação de cadeia. 
 
Explicação: 
O procedimento de Maxam e Gilbert determina a sequência das bases através 
da clivagem química da terminação 5¿ dos fragmentos de DNA marcados 
radioativamente. Em contrapartida, o método de Sanger envolve a síntese de uma 
fita simples de DNA utilizando a DNA polimerase e didesoxinucleotídeos 
(ddNTPs). O uso da DNA polimerase é a principal diferença entre os métodos. 
 
AULA 08: 
 
 
 
 
1. 
 
(UFC, 2015): Classicamente, a clonagem de 
segmentos DNA a partir de qualquer organismo 
envolve cinco processos gerais. Assinale a 
alternativa que lista corretamente esses cinco 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
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processos: 
 
 
Seleção do DNA a ser clonado, transporte do DNA recombinante para a 
célula hospedeira, extração de DNA, Eletroforese em gel de agarose e 
identificação da célula hospedeira que contém o DNA recombinante; 
 
Clivagem do DNA, eletroforese em gel de agarose, ligação do DNA 
recombinante em um vetor de clonagem, transporte do DNA recombinante 
para uma célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o 
DNA recombinante; 
 
Clivagem do DNA, seleção de vetores de clonagem, produção de uma 
molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante para a 
célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA 
recombinante; 
 
Extração e eletroforese de DNA, seleção de vetores de expressão, produção 
de uma molécula de DNA recombinante, transporte do DNA recombinante 
para a célula hospedeira, seleção da célula hospedeira que contém o DNA 
recombinante. 
 
Seleção do DNA recombinante, uso de vetores de clonagem, transformação 
da célula hospedeira, eletroforese de DNA e seleção da célula hospedeira 
que contém o DNA recombinante; 
 
Explicação: 
O processo de clonagem molecular se inicia com o isolamento do gene de interesse, 
o qual deve ser transferido para o vetor adequado, e inserido dentro do organismo 
aceptor compatível, que irá multiplicá-lo in vitro. Em seguida, devemos ser capazes 
de identificar os clones recombinantes através do uso de marcadores de seleção, 
associados ao vetor de clonagem previamente selecionado. 
 
2. 
 
 
(UFAM, 2016): Quando comparada com a 
clonagem molecular em células hospedeiras, 
a PCR possui muitas vantagens. Sob essa 
perspectiva, qual das alternativas a seguir é 
incorreta? 
 
 
Por ser um processo automatizado, a PCR é mais simples de ser conduzida; 
 
Velocidade do procedimento: a PCR pode durar algumas horas, enquanto o 
procedimento de clonagem molecular é realizado em um ou mais dias; 
 
A PCR gera fragmentos de DNA bem maiores que na clonagem molecular, 
além de possuir uma fidelidade mais alta no processo; 
 
A PCR pode ser utilizada para amplificar DNA de material degradado, 
muito útil em investigações forenses. 
 
A PCR é uma técnica muito versátil e, atualmente, proporciona a 
amplificação de até 20 Kb de DNA. Na clonagem, utilizando-se vetores 
plasmidiais, pode haver limitações quanto ao tamanho do inserto a ser 
clonado; 
 
 
 
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Explicação: 
Um produto de PCR, após amplificação, pode ser clonado em vetor. O parâmetro 
"tamanho do inserto" pode ser ajustado de acordo com os diferentes vetores de 
clonagem possíveis, adequados para menores ou maiores extensões. O ensaio da 
PCR não está livre de incorporação de erros, uma vez que a enzima está submetida a 
vários ciclos de oscilação de temperatura em um curto espaço de tempo. 
 
3. 
 
 
(FIOCRUZ, 2010): São características de um 
bom vetor de clonagem, um plasmídeo que 
contém as seguintes características, exceto: 
 
 
possuir replicação independente do DNA genômico da célula. Alem disso, 
eles devem ser facilmente introduzidos em bactérias que não os contenham 
por meio de métodos químicos ou métodos físicos de transformação. 
 
presença de uma origem de replicação, ou seja, uma seqüência de DNA que 
permita que o vetor seja replicado na célula hospedeira; 
 
presença dos mesmos sinais de início de transcrição e de tradução entre 
procariotos e eucariotos; 
 
presença de um gene que codifica um produto que permita a distinção entre 
a célula com plasmídio de uma célula sem plasmídio, como por exemplo, 
um gene para resistência a antibióticos; 
 
presença de sítios únicos de clivagem para enzimas de restrição. O conjunto 
destes sítios é denominado de Sítio Múltiplo de Clonagem (SMC) e é o 
local onde o inserto é incorporado ao vetor de clonagem; 
 
Explicação: 
Os sinais de início de transcrição e tradução são diferentes entre procariotos e 
eucariotos. 
 
4. 
 
(UFAM, 2016): A clonagem molecular é 
caracterizada pela produção de muitas cópias de 
um fragmento de DNA alvo (amplificação), por 
meioda tecnologia do DNA recombinante. 
Sobre essa técnica, são feitas as seguintes 
afirmativas: 
 
I. Um vetor de clonagem molecular pode conter 
mais de um marcador de seleção; 
II. A região do gene repórter deve conter sítios 
de restrição enzimática para clonagem; 
III. Em uma placa de Petri, o número de clones 
recombinantes não excede o número de clones 
não recombinantes; 
IV. Uma das características exigidas para a 
clonagem molecular é que as células utilizadas 
como hospedeiras sejam organismos não 
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patogênicos; 
 
Assinale a alternativa correta: 
 
 
Somente as afirmativas II e III estão corretas; 
 
Somente as afirmativas I, II e III estão corretas; 
 Somente as afirmativas I,II e IV estão corretas; 
 
Somente as afirmativas I e III estão corretas; 
 
Todas as afirmativas estão corretas. 
 
Explicação: 
O processo de clonagem pressupõe a existência de falhas nos processos de clonagem 
em vetor e transformação em organismos competentes. Dessa forma, as 
concentrações de vetor com inserto e bactéria são otimizadas de forma a otimizar a 
produção de clones recombinantes. 
 
5. 
 
 
(Adaptada de TJMA, 2004): A clonagem 
molecular tem demonstrado ser uma técnica 
excepcional para o isolamento de fragmentos de 
DNA específicos de um organismo. Os 
processos de clonagem e isolamento de tais 
fragmentos começam com a construção de 
bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma 
biblioteca de cDNA não apresenta íntrons 
porque: 
 
 
É construída a partir de DNA genômico; 
 É construída a partir do mRNA maduro; 
 
Os introns são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de 
exonucleases; 
 
Não podem ser construídas a partir de genes; 
 
Nenhuma das alternativas acima. 
 
Explicação: 
A molécula de cDNA é produzida graças à atuação de uma enzima transcriptase 
reversa a uma molde de RNAm maduro, o qual já passou pelo processamento, que 
levou à aquisição da cauda poli-A e remoção das regiões dos íntrons. 
 
 
6. 
 
(FIOCRUZ, 2010): Plasmídeos são moléculas circulares 
de DNA encontrados em bactérias. Elas são utilizadas 
como vetores para a clonagem de genes e, portanto 
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fundamentais para o estudo de genes. 
Sobre as características típicas encontradas em 
plasmídeos utilizados para clonagem, assinale a 
alternativa incorreta: 
 
 
O plasmídeo precisa ter mais de 10.000 pb de forma que seja estável na 
bactéria; 
 
O plasmídeo precisa ter um marcador de seleção que confere resistência a 
bactéria a um antibiótico específico; 
 
O plasmídeo usualmente tem sítio múltiplo de clonagem que permite a 
utilização de várias enzimas de restrição durante a clonagem; 
 
O plasmídeo precisa ter uma origem de replicação, que permite a 
multiplicação independente do DNA bacteriano; 
 
O plasmídeo usualmente tem um sítio para anelamento de iniciadores de 
PCR para sequenciamento M13 próximo a sítio de inserção. 
Explicação: 
Os plasmídeos são vetores ideais para insertos de DNA menores. 
 
AULA 09 : 
 
1. 
 
(Instituto AOCP, 2018, ITEP, RN, Perito 
Criminal): Marido entra na justiça para pedir teste 
de paternidade para comprovar se todos os 3 filhos 
que ele tem com sua esposa são mesmo dele. A 
partir de a figura a seguir, baseada nos marcadores 
genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e 
filhos, avalie se algum dos 3 filhos realmente não é 
dele: 
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Todos são filhos dele. 
 
Filho 1 e 2 não são dele; 
 
Filho 2 e 3 não são dele; 
 
Nenhum é filho dele; 
 Filho 1 e 3 não são dele; 
 
 
Explicação: 
Após excluir as bandas que apresentam correspondência com a mãe, os filhos 1 e 3 
apresentam bandas que não apresentam correspondência com o marido. Dessa 
forma, essas bandas só podem ser originárias de outro pai, que não o marido em 
questão. 
 
 
2. 
 
(FMTM, MG): Dois homens, P-I e P-II, 
disputam a paternidade de uma criança C, filha 
da mulher M. Diante disso, foi pedido o exame 
de DNA dos envolvidos. O resultado do teste 
revelou os seguintes padrões: 
 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
 
Acerca dos resultados obtidos foram feitas as 
seguintes afirmações: 
I. P-II pode ser o pai da criança, pois há maior 
quantidade de faixas coincidentes com o padrão 
da criança; 
II. as faixas de números 3, 9, 10, 14, e 17 
correspondem ao DNA que a criança recebeu da 
mãe; 
III. não é possível excluir a possibilidade de P-I 
ser o pai da criança. 
Está correto o contido apenas em: 
 
 
II; 
 
I e III; 
 
II e III. 
 
I; 
 I e II; 
 
Explicação: 
É possível excluir a paternidade de P-I à medida em que, após excluir as bandas que 
têm correspondência com a mãe, P-I e a criança não possuem bandas compatíveis. 
 
3. 
 
 
(INEP, 2006): Testes de DNA para 
determinação de paternidade são hoje em dia 
realizados por meio da tecnologia de PCR 
(polymerase chain reaction, ou reação de 
polimerase em cadeia). Estes testes distinguem 
loci conhecidos como microssatélites. Em um 
desses testes foram observados os resultados 
ilustrados no esquema abaixo, que representa a 
migração eletroforética de uma análise de 
paternidade de uma criança ( F ), sua mãe ( M ) 
e o suposto pai (SP). 
 
 Analise as afirmações abaixo: 
 I - PCR pode ser feito a partir de amostras com 
pouco DNA dos indivíduos, já que a técnica 
possibilita a amplificação de sequências 
específicas de DNA; 
II - O resultado revela que SP não deve ser o pai 
da criança, já que uma das bandas de DNA deste 
não é encontrada no DNA da criança; 
III - Microssatélites são regiões do genoma nas 
quais ocorrem repetições de sequências 
nucleotídicas e por isso cada locus pode resultar 
em variações de tamanho nos indivíduos 
testados. 
 
Está correto o que se afirma em: 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
 
II, somente; 
 
II e III, somente; 
 
I, II e III. 
 
I e II, somente; 
 I e III, somente; 
 
 
Explicação: 
Como os pais não transferem todas as suas bandas para os seus filhos, não há 
motivo que impeça SP de ser pai de F. 
 
 
4. 
 
 
(PUC-Rio, 2015): A figura abaixo representa o resultado de um 
teste de paternidade. Este teste baseia-se na identificação de 
marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e 
filhos. 
 
Considerando a figura, não é correto afirmar que: 
 
 
II não é filho deste pai; 
 V não pode ser filho biológico deste casal; 
 
IV e I são irmãos gêmeos monozigóticos. 
 
III é irmão biológico de I; 
 
I é filho biológico do casal; 
 
Explicação: 
V pode ser filho biológico do casal, dado que metade das suas bandas apresentam 
compatibilidade com a mãe e, a outra metade, compatibilidade com o pai. 
 
 
 
 
 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
5. 
 
 
(FUVEST, SP): "Teste de DNA confirma paternidade 
de bebê perdido no tsunami. Um casal do Sri Lanka 
que alegava ser os pais de um bebê encontrado após o 
tsunami que atingiu a Ásia, em dezembro, obteve a 
confirmação do fato através de um exame de DNA. O 
menino, que ficou conhecido como "Bebê 81" por ser o 
81º sobrevivente a dar entrada no hospital de 
Kalmunai, era reivindicado por nove casais 
diferentes." Folha online, 14/02/2005 (adaptado). 
 Algumas regiões do DNA são seqüências curtas de 
bases nitrogenadas que se repetem no genoma, e o 
número de repetições dessas regiões varia entre as 
pessoas. Existem procedimentos que permitem 
visualizar essa variabilidade, revelando padrões de 
fragmentos de DNA que são ¿uma impressão digital 
molecular¿. Não existem duas pessoas com o mesmo 
padrão de fragmentos com exceção dos gêmeos 
monozigóticos. Metadedos fragmentos de DNA de 
uma pessoa é herdada de sua mãe e metade, de seu pai. 
 Com base nos padrões de fragmentos de DNA 
representados abaixo, qual dos casais pode ser 
considerado como pais biológicos do Bebê 81? 
 
 
 
 
Casal D; 
 
 
Casal B; 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
Casal C; 
 
 
Casal A; 
 
Casal E. 
Explicação: 
Para todos os outros supostos casais, sempre encontraremos alguma banda no bebê 
81 para a qual não haverá correspondência nem materna nem paterna. 
 
 
6. 
 
 
(UEL, 2017): O teste de DNA abaixo foi 
solicitado por uma mulher que queria 
confirmar a paternidade dos filhos. Ela 
levou ao laboratório amostras de cabelos 
dela, do marido, dos dois filhos e de um 
outro homem que poderia ser o pai. Os 
resultados obtidos estão mostrados na figura 
abaixo: 
 
 
A partir dos resultados podemos obter as 
seguintes conclusões, exceto: 
 
 
o filho 2 é do marido; 
 
o filho 1 é do outro homem; 
 
o filho 1 compartilha metade de seu material genético com a mãe; 
 o filho 2 não é dessa mãe; 
 
o marido e o outro homem não são irmãos. 
 
Explicação: 
Não podemos excluir a maternidade nesse caso, pois metade das bandas do filho 2 
apresenta compatibilidade com a mãe em questão. 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
AULA 10: 
 
 
 
1. 
 
 
(IADES, 2018): Avanços recentes em 
engenharia genética dão início a uma revolução; 
cientistas são capazes de manipular DNA 
humano de forma prática e barata, abrindo 
portas para uma gama de novos estudos 
genéticos nas áreas de medicina e de 
biotecnologia. O sistema CRISPR-Cas9 
constitui uma maquinaria celular que é natural 
em diversos organismos vivos e oferece um 
enorme potencial, desde a cura de doenças 
causadas por mutações e danos no DNA até a 
criação de fármacos com organismos 
geneticamente modificados, entre outras 
aplicações em biotecnologia. Em relação ao 
sistema CRISPR-Cas9, é correto afirmar que: 
 
 
visualiza antígenos nos tecidos ou em suspensões celulares utilizando 
corantes fluorescentes; 
 
amplifica em milhares de vezes uma região específica da molécula de 
DNA; 
 
corresponde a pequenas moléculas de RNA associadas a uma enzima de 
restrição, com capacidade de reconhecer e clivar sequências específicas 
de DNA exógeno. 
 
isola genes individuais do DNA humano e os insere em DNA 
plasmidial; 
 
identifica e quantifica moléculas de RNA em uma amostra de interesse, 
para estudo de expressão gênica; 
Explicação: 
A técnica de CRISPR-Cas9 isoladamente não é capaz de quantificar ou amplificar 
moléculas de ácido nucleico. Além disso, não é utilizada para fins de DNA 
recombinante ou ensaios baseados em detecção de proteínas. 
 
 
 
2. 
 
(2018, UNIFOR): A CRISPR-Cas9 (sigla em 
inglês para agrupados de curtas repetições 
palindrômicas regularmente interpaçadas) é 
uma nova e revolucionária técnica para a edição 
de genomas, que permite identificar genes de 
interesse, no DNA de qualquer espécie e 
modifica-lo. É normalmente composto por uma 
molécula de RNA e uma proteína e a 
combinação dessas duas moléculas consegue 
localizar a sequência de DNA de interesse 
dentro do núcleo da célula e a modifica. 
Fonte: http://ofuturodascoisas.com/crispr-
revolucionou-edicao-dna-o-problema-e-que-
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
nao-estamos-preparados-para-consequencias. 
Acesso em 12 set. 2017 (com adaptações). 
Assim, podemos dizer que o uso dessa 
tecnologia permite: 
 
 
mudanças apenas na programação genética de um organismo, garantindo 
que não haja nenhuma alteração na expressão gênica e na produção de 
proteínas; 
 
 
 
a modificação de sequências de DNA em células diferentes de um mesmo 
organismo de forma seletiva, uma vez que cada tipo celular de um mesmo 
organismo possui diferente coleção de genes; 
 
aumentar o número de genes e, consequentemente, o número de proteínas 
produzidas por uma célula, pois o tamanho do genoma é diretamente 
proporcional ao número de proteínas do organismo. 
 
provocar mutações pontuais no genoma na tentativa de silenciar genes 
defeituosos ou consertá-los para tornar possível a cura de diversas doenças 
de origem genética; 
 
 
 
a adição de novas sequências de DNA para acarretar o ganho de novas 
características positivas, haja vista quanto maior o tamanho do genoma, 
mais complexo o organismo; 
 
 
 
Explicação: 
Em decorrência da mudança da sequência de bases do DNA, pode-se conseguir a 
inibição do funcionamento de certo gene deletério (ou de efeito indesejado), bem 
como pode-se pensar em tornar um gene defeituoso funcional e, dessa forma, curar 
determinada doença de origem genética. 
 
 
 
 
3. 
 
(INEP, 2016): Desenvolvida recentemente, a 
técnica de edição de genoma denominada 
CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas 
áreas de Biotecnologia e Medicina. Por 
engenharia genética, é possível direcionar o 
sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um 
ponto específico dos genomas de vírus, de 
plantas, de fungos e de animais, inclusive de 
embriões humanos, o que tem gerado discussões 
a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. 
(YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos 
desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
3, set. 2016 (adaptado).) 
Em relação às questões bioéticas envolvidas na 
edição genética, avalie as afirmações a seguir: 
I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas 
para a edição genética de embriões humanos; os 
estudos científicos nessa área devem ter como 
objetivo tratar e curar problemas de saúde e não 
alterar o genoma ou realizar clonagens; 
II. A despeito do caráter promissor da edição 
genética no tratamento de doenças graves, as 
intervenções feitas por meio da técnica de 
CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas 
às gerações futuras, por esse motivo, a prática é 
considerada eugenista, o que ensejou a proibição 
de estudos desse tipo em embriões humanos em 
alguns países; 
III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são 
permitidas por lei a manipulação e a modificação 
genética de embriões humanos para fins de 
pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser 
descartados dentro do prazo de duas semanas. 
 É correto o que se afirma em: 
 
 I e II, apenas; 
 
II e III, apenas; 
 
I, II e III. 
 
I, apenas; 
 
III, apenas; 
Explicação: 
No Brasil, a legislação veta qualquer experimento que envolva a manipulação 
genética de embriões humanos. 
 
 
4. 
 
(Adaptado de UNIFESP, 2017): Considere uma 
infecção hipotética de uma bactéria por um 
vírus patogênico. Supondo que no DNA viral 
exista a sequência de bases nitrogenadas 
CCCTATAGGG, qual será a sequência de 
bases no RNA-guia associado à Cas9 
bacteriana? 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
 
 
 
 
CCCUAUAGGG; 
 
GGGATATCCC; 
 GGGAUAUCCC; 
 
CCCTATAGGG; 
 
CCCTCTCGGG. 
Explicação: 
A sequência de bases do RNA-guia associado deve ser complementar ao DNA que 
será inativado. 
 
5. 
 
 
(UNIFESP, 2017): Por que a alteração na 
sequência de DNA provocada pelo CRISPR-
Cas9 pode inativar um gene? 
 
 
 
Porque o RNA transcrito tem uma meia vida menor do que o RNA original; 
 
CRISPR-Cas9 é incapaz de inativar um gene. 
 
Porque o RNA transcrito não será traduzido; 
 Porque o RNA transcrito a partir dessa sequência também será alterado; 
 
Porque o DNA alterado não será transcrito; 
Explicação: 
De acordo com o dogma da biologia molecular, a alteração na sequência de DNA 
implicará na alteração do RNA transcrito. Consequentemente, a proteína traduzida 
a partir desse RNAm pode não ser funcional, ou seja, o gene pode ser inativado. 
 
 
6. 
 
(Adaptado de UNIFESP, 2017): Complete as lacunas do 
texto a seguir, a respeitodo sistema de defesa CRISPR-
Cas9 de bactérias: 
O Sistema CRISPR-Cas9 foi desenvolvido em laboratório 
e é constituído de um RNA-guia (CRISPR) associado a 
uma enzima de restrição (Cas9). O RNA-guia é uma 
sequência curta de RNA sintético __________ à 
sequência de um determinado trecho de __________. 
Quando introduzido em células vivas, o CRISPR-Cas9 
detecta a sequência de DNA complementar e a enzima 
corta o DNA em um ponto específico. Em seguida, o 
sistema de reparo do DNA é ativado, unindo novamente 
os segmentos que foram separados. Nesse processo, 
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp
 
podem ocorrer alterações na sequência original, causando 
a __________ de um gene. Sistemas semelhantes ao 
CRISPR-Cas9 são encontrados naturalmente em bactérias 
e ativados quando estas são infectadas por vírus. 
 
 
 
Complementar/ RNA/ inativação. 
 Complementar/ DNA/ inativação; 
 
Idêntica/ DNA/ inativação; 
 
Idêntica/ RNA/ativação; 
 
Complementar/ RNA/ativação; 
Explicação: 
O sistema CRISPR-Cas9 é capaz de reconhecer sequências específicas de DNA, 
para as quais o RNA-guia é complementar. Sendo assim, caso uma sequência de 
DNA viral tenha sido inserida no cromossomo de uma bactéria, como no ciclo 
lisogênico, ela pode ser reconhecida e inativada pelo sistema CRISPR, livrando a 
bactéria da ação viral.