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FARMÁCIA INTRODUÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS(ICF) POSTAGEM 2 ATIVIDADE 2 – RELATÓRIO Diego Godoy Ramire Ra: 2323384 Polo: Foz Do Iguaçu Idenir Ivete Bertotti Ra: 2231226 Polo: Medianeira Medianeira,12 de novembro de 2023 RESUMO A validação de métodos na área farmacêutica é crucial para assegurar a confiabilidade das análises de produtos medicinais. Envolve a minuciosa avaliação e documentação dos métodos usados para determinar componentes de interesse, como a dosagem de substâncias ativas em medicamentos. Este estudo se baseia na importância da validação de métodos na indústria farmacêutica, que é fundamental para garantir a qualidade e a segurança dos medicamentos fornecidos aos pacientes. O objetivo principal deste trabalho é validar os métodos analíticos usados para determinar o teor de paracetamol em comprimidos, garantindo que cumpram os padrões de qualidade estabelecidos pela Farmacopeia Brasileira e pela RDC n. 166/2017 da Anvisa. O processo envolveu testes e cálculos para atingir esse fim. Na avaliação, notou-se que as amostras atenderam aos critérios de repetibilidade (CV ≤ 2,0), porém, os valores de % Rec ficaram fora da faixa aceitável (98-120%), apesar da precisão do método. O Limite de Quantificação, com valor de 6,8, não possui critérios de avaliação. A validação de métodos é crucial para garantir a qualidade dos produtos farmacêuticos, envolvendo precisão, complexidade e o uso adequado de ferramentas estatísticas. Palavras-chave: Paracetamol. Eficácia. Precisão. Qualidade. INTRODUÇÃO A validação de métodos é um procedimento fundamental na área farmacêutica, garantindo a confiabilidade e precisão das análises de produtos farmacêuticos. Envolve a avaliação criteriosa e documentada dos métodos analíticos empregados para a determinação de componentes de interesse, como no caso da dosagem de substâncias ativas em medicamentos. A validação assegura que os métodos sejam apropriados, precisos, exatos, reprodutíveis e sensíveis o suficiente para fornecer resultados confiáveis, atendendo aos mais rigorosos padrões de qualidade (ICTQ, 2020). Para a realização da validação de métodos na área farmacêutica, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa) estabelece diretrizes claras e normas que devem ser rigorosamente seguidas. Dentre essas diretrizes, destaca-se a Resolução da Diretoria Colegiada (RDC) n. 166, de 24 de julho de 2017, que estabelece as Boas Práticas de Fabricação de Medicamentos (BRASIL, 2023). Este relatório tem como objetivo descrever o processo de validação de métodos analíticos aplicado à determinação do teor de paracetamol em comprimidos, seguindo estritamente as diretrizes estabelecidas na Farmacopeia Brasileira - 6ª edição e a mencionada RDC n. 166/2017 da Anvisa. A validação dos métodos assegurará a integridade e qualidade dos resultados, contribuindo para a segurança e eficácia dos produtos farmacêuticos que chegam às mãos dos pacientes (BRASIL, 2022). . JUSTIFICATIVA A justificativa para este trabalho é fundamentada na importância da validação de métodos analíticos na indústria farmacêutica, onde ela é essencial para garantir a qualidade e a segurança dos produtos farmacêuticos que chegam aos pacientes. Além disso, a conformidade com as regulamentações da Anvisa é obrigatória e vital para a fabricação e comercialização de medicamentos no Brasil. A determinação do teor de paracetamol é crucial, pois o paracetamol é amplamente utilizado como analgésico e antipirético. Garantir a precisão e a exatidão dessa determinação é de grande importância para a saúde pública. Portanto, este trabalho visa cumprir os requisitos regulatórios, atender às boas práticas de fabricação e assegurar que os pacientes recebam produtos farmacêuticos de alta qualidade e eficácia. OBJETIVO O principal objetivo deste trabalho é realizar a validação dos métodos analíticos empregados na determinação do teor de paracetamol em comprimidos, garantindo que esses métodos atendam aos requisitos de qualidade estabelecidos pela Farmacopeia Brasileira e pela RDC n. 166/2017 da Anvisa. Mostrar que assegurar a qualidade do produto, visa garantir que os produtos farmacêuticos contendo paracetamol estejam de acordo com os padrões de qualidade estabelecidos, garantindo sua segurança e eficácia para os pacientes. Outro objetivo importante é garantir a conformidade com as regulamentações da Anvisa, em particular a RDC n. 166/2017, que estabelece as Boas Práticas de Fabricação de Medicamentos. Isso é fundamental para atender às diretrizes regulatórias. Também documentar e relatar o processo de validação de métodos analíticos para a determinação do teor de paracetamol em comprimidos, envolvendo a descrição detalhada da metodologia, a apresentação de resultados, a análise crítica dos dados e a conclusão sobre se os métodos são apropriados para garantir a qualidade do produto farmacêutico 1 MATERIAL, MÉTODOS E RESULTADOS OBTIDOS 1.2 Propriedades físico-químicas do Paracetamol: Nome Químico: O paracetamol é também conhecido como acetaminofeno. Sua fórmula química é C8H9NO2 (INDICE.EU, 2021). Solubilidade: O paracetamol é moderadamente solúvel em água, o que o torna adequado para a formulação de comprimidos e soluções orais (INDICE.EU, 2021). Ponto de Fusão: O ponto de fusão do paracetamol é de aproximadamente 169-170°C (INDICE.EU, 2021). Aparência: O paracetamol é um sólido branco, cristalino e inodoro (INDICE.EU, 2021). 1.3 Formas de Apresentação do Paracetamol: Segundo o BULASMED, o paracetamol está disponível em várias formas de apresentação, incluindo: Comprimidos: Uma das formas mais comuns é na forma de comprimidos orais. Estes comprimidos podem variar em dose, geralmente 500mg a 1g. Solução Oral: O paracetamol também é disponibilizado em soluções orais, muitas vezes destinadas a crianças ou pacientes que têm dificuldade em engolir comprimidos. Supositórios: Para pacientes que não podem tomar medicamentos oralmente, existem supositórios de paracetamol disponíveis. Pó Efervescente: Algumas formulações de paracetamol vêm na forma de pó efervescente que pode ser dissolvido em água antes de ser consumido . 1.4 Possíveis Interações Medicamentosas Relacionadas ao Paracetamol: O paracetamol é geralmente considerado um medicamento seguro quando usado adequadamente. No entanto, é importante estar ciente das possíveis interações medicamentosas. Segundo o site BULASMED, algumas interações a serem consideradas incluem: Álcool: O consumo de álcool em combinação com paracetamol pode aumentar o risco de lesão hepática. Medicamentos que afetam o fígado: Alguns medicamentos que afetam o fígado, como certos medicamentos para epilepsia ou medicamentos antivirais, podem interagir com o paracetamol e aumentar o risco de toxicidade hepática. Outros analgésicos: O uso concomitante de outros analgésicos, como antiinflamatórios não esteroides (AINEs) ou opioides, deve ser feito com cautela, uma vez quepode aumentar o risco de efeitos colaterais. O projeto de pesquisa aqui em andamento exigiu a análise do material teórico disponibilizado no Manual de Introdução em Ciências Farmacêuticas, e, ademais, demandou a realização de extensas pesquisas para aprofundar o conhecimento e aprimorar o desenvolvimento das técnicas propostas. Para permitir a avaliação dos requisitos de Limite de Quantificação, Precisão e Exatidão na validação do método espectrofotométrico de dosagem de Paracetamol 500 mg, recorreu-se à utilização de dados tabulados que simularam cada ensaio, além de empregar as equações e critérios de aceitação correspondentes a esses parâmetros. 1.5 Desenvolvimento: Para validar um método de análise de medicamentos, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa) requer a análise dos critérios estabelecidos na RDC (Resolução de Diretoria Colegiada) número 166, de 2017. Estes critérios abrangem a avaliação de seis parâmetros de validação, que incluem a seletividade, intervalo e linearidade, limite de detecção, limite de quantificação, precisão (incluindo repetibilidade, reprodutibilidade e intermediária) e exatidão (BRASIL, 2017). Seletividade: A seletividade se refere à capacidade do método de análise em distinguir e medir o analito (substância ou componente a ser analisado) de interesse em presença de outros componentes que possam estar presentes na amostra. Em outras palavras, o método deve ser específico para o analito alvo, evitando interferências de outros compostos Intervalo e Linearidade: O intervalo e linearidade são parâmetros relacionados à faixa de concentrações em que o método é aplicável. O intervalo se refere à faixa de concentrações dentro da qual o método fornece resultados precisos e confiáveis. A linearidade se relaciona à capacidade do método de produzir respostas proporcionais às concentrações do analito ao longo desse intervalo. Limite de Quantificação (LOQ): O limite de quantificação é a menor concentração do analito que pode ser quantificada com precisão e confiabilidade pelo método. Ele é mais baixo que o LOD e permite a determinação precisa das concentrações. Precisão: A precisão se refere à capacidade do método de produzir resultados consistentes e reprodutíveis em diferentes condições e ao longo do tempo. A precisão é avaliada por meio de três componentes, que são a repetibilidade (resultados próximos quando o mesmo analista e equipamento repetem o ensaio), reprodutibilidade (resultados próximos entre diferentes laboratórios, analistas e equipamentos) e precisão intermediária (variação ao longo do tempo). Exatidão: A exatidão se relaciona à capacidade do método de produzir resultados próximos do valor real ou da concentração verdadeira do analito na amostra. A exatidão é frequentemente avaliada por meio da recuperação do analito em amostras conhecidas, comparando os resultados obtidos com o valor esperado. Esses critérios são fundamentais na validação de métodos de análise de medicamentos para garantir que os resultados sejam confiáveis, precisos e adequados para o uso em questões regulatórias e de segurança dos pacientes. 1. 5.1 Para o Limite de Quantificação (LOQ): Com a análise dos resultados fornecidos pela instituição, de acordo com a Farmacopeia Brasileira, a tabela a seguir apresenta os valores de absorbância obtidos em três testes realizados em um espectrofotômetro UV/VIS com uma faixa de leitura de 257 nm. Fonte: Manual Introdução Em Ciências Farmacêuticas, Unip, 2023. Aqui está a equação da reta obtida a partir do teste de linearidade da curva. 𝑦 = 0,1029𝑥 – 0,1122 O Manual da atividade nos fornece a informação de que é necessário utilizar a seguinte equações para determinar o Limite de Quantificação. 10 𝑥 𝑑𝑒𝑠𝑣𝑖𝑜 𝐿𝑄 = 𝑐𝑜𝑒𝑓𝑖𝑐𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑎𝑛𝑔𝑢𝑙𝑎𝑟 𝑑𝑎 𝑟𝑒𝑡𝑎 10 𝑥 0,07 0,7 𝐿𝑄 = == 6,8 0,1029 0,1029 Não se pode determinar a validade do método apenas a partir do LQ; esse método tem como objetivo apenas fornecer o valor limite (MANUAL, 2023). Portanto, para essa situação, temos LQ = 6,8. 1.5.2 Para a Precisão Intracorrida (Repetibilidade): O próximo parâmetro a ser examinado é a repetibilidade, conforme estabelecido na RDC 166 de 24 de julho de 2017. A exatidão é responsável por avaliar a proximidade dos resultados obtidos nos testes com amostras preparadas de acordo com o método de análise. Ela deve ser expressa em termos de repetibilidade ou reprodutibilidade da exatidão intermediária. A repetibilidade do método é verificada por meio de, no mínimo, 9 determinações, considerando a faixa linear do método, ou seja, 3 concentrações diferentes (baixa, média e alta) com 3 repetições para cada concentração, conforme indicado nas tabelas com os dados (MANUAL, 2023). Resultados de absorbância (A) para a triplicata da concentração correspondente a 80% da concentração média da curva de calibração do método de dosagem de Paracetamol (4,8 mg/L). Leitura realizada em espectrofotômetro UV/Vis no comprimento de onda (l) = 257 nm (MANUAL, 2023): Fonte: Manual Introdução Em Ciências Farmacêuticas, Unip, 2023. Resultados de absorbância (A) para a triplicata da concentração correspondente a 100% da concentração média da curva de calibração do método de dosagem de Paracetamol (6 mg/L). Leitura realizada em espectrofotômetro UV/Vis no comprimento de onda (l) = 257 nm (MANUAL, 2023): Fonte: Manual Introdução Em Ciências Farmacêuticas, Unip, 2023. Resultados de absorbância (A) para a triplicata da concentração correspondente a 120% da concentração média da curva de calibração do método de dosagem de Paracetamol (7,2 mg/L). Leitura realizada em espectrofotômetro UV/Vis no comprimento de onda (l) = 257 nm (MANUAL, 2023): Fonte: Manual Introdução Em Ciências Farmacêuticas, Unip, 2023. Para efetuar os cálculos de média e desvio-padrão deverão ser empregadas as seguintes fórmulas Em que: x = dado tabelado, N = número de dados tabelados Tabela geral com os resultados obtidos: Depois de obter as médias e desvios-padrão dos valores da tabela anterior, o coeficiente de variação (CV%) foi determinado por meio da aplicação da seguinte fórmula: 𝐶𝑉% (𝐴 80%) = 0,003/0,405𝑥100 = 0,74% 𝐶𝑉% (𝐴 100%) = 0,0360/0,503𝑥100 = 0,71% 𝐶𝑉% (𝐴 120%) = 0,00406/0,654𝑥100 = 0,62% Conforme estabelecido na RDC 166/2017, a precisão é atestada quando o coeficiente de variação é igual ou inferior a 2,0 (BRASIL, 2017). Portanto, ao avaliar os cálculos do CV% para as análises em diversas concentrações de Paracetamol, observa-se que todas as três concentrações estão dentro do limite considerado aceitável. 1.5.3 Para a Exatidão: Segundo o Manual da atividade, exatidão: ‘’É a concordância entre o resultado de um ensaio e o valor de referência aceito como convencionalmente verdadeiro. Para a avaliação do requisito de exatidão do método de dosagem de Paracetamol por espectrofotometria, serão utilizadas as concentrações 4,8 mg/L (80% da concentração média obtida na curva linear), 6,0 mg/L (100% da concentração média obtida na curva linear) e 7,2 mg/L (120% da concentração média obtida na curva linear).’’ Resultados de concentração real (obtida através da conversão de absorbância em concentração, utilizando a equação de reta da curva analítica) e teórica para a triplicatada concentração correspondente a 80%, 100% e 120% da concentração média da curva de calibração do método de dosagem de Paracetamol. Leitura realizada em espectrofotômetro UV/Vis no comprimento de onda (l) = 257 nm (MANUAL, 2023). Fonte: Manual Introdução Em Ciências Farmacêuticas, Unip, 2023. Para o cálculo da %Rec descrito abaixo, usou-se os dados da tabela de resultados anteriores e a equação fornecida pelo manual da atividade: % 𝑅𝑒𝑐 (80) = 𝑥 100 = 91,6% % 𝑅𝑒𝑐 (100) = 𝑥 100 = 108,3% % 𝑅𝑒𝑐 (120) = 𝑥 100 = 105,5% De acordo com o critério de aceitação: 98% ≤ % rec ≤ 102% (MANUAL, 2023), conclui-se que as amostras se encontram fora da faixa de especificação descrita para a exatidão. CONCLUSÃO Ao avaliar os critérios mencionados neste trabalho acadêmico, podemos concluir que as amostras analisadas demonstram uma repetibilidade adequada, uma vez que a precisão exige um coeficiente de variação menor ou igual a 2,0. Contudo, mesmo que o método seja preciso, os valores para a porcentagem de recuperação (%Rec) estão fora da faixa aceitável estabelecida pela legislação, que pode variar de 98% a 120%. Quanto ao valor de 6,8 para o Limite de Quantificação, não há critérios de avaliação, uma vez que se refere à menor quantidade do analito presente em uma amostra. A validação de métodos é um procedimento fundamental e complexo na garantia da qualidade dos produtos farmacêuticos. É essencial considerar a precisão e a complexidade do processo, bem como a importância do uso adequado de planilhas eletrônicas e ferramentas estatísticas para assegurar que os métodos analíticos sejam confiáveis e cumpram as regulamentações, garantindo assim, a segurança dos pacientes. REFERÊNCIAS BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Monografia da DCB: Paracetamol. Disponível em: http://www.anvisa.gov.br/datavisa/fila_bula/frmVisualizarBula.asp?pNuTransaca o=75220122013&pIdAnexo=1754119. Acesso em: 6 nov. 2023. BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Farmacopeia Brasileira, 6ª Edição. Brasília, DF, 2023. Disponível em: https://www.gov.br/anvisa/ptbr/assuntos/farmacopeia/farmacopeia-brasileira. Acesso em: 05 nov. 2023. BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. RESOLUÇÃO DA DIRETORIA COLEGIADA - RDC No 166, DE 24 DE JULHO DE 2017. Brasília, DF, 2023. Disponível em: http://antigo.anvisa.gov.br/documents/10181/2721567/RDC_166_2017_COMP.p df/d5fb92b3-6c6b-4130-8670-4e3263763401. 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