Avaliação I - Biologia Molecular

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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:883916)
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Prova 75105997
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o sumário da aula prática, a hibridização é uma técnica que tem o 
princípio da complementariedade das bases nitrogenadas dos ácidos nucleicos como base (adenina com timina e 
citosina com guanina). Essa técnica consiste, de forma básica, em localizar sequências de interesse no genoma de 
quaisquer organismos, hibridizando-as ao próprio DNA da espécie.
Considerando a aula prática de hibridização, assinale a alternativa CORRETA:
A Ao final da reação é possível visualizar as células marcadas com pontos verdes e vermelho.
B A técnica de FISH utiliza a marcação de vários genes.
C A técnica de CGH array é avaliada diretamente no microscópio, sem o uso de scanner.
D O reagente DAPI é adicionado logo no início da reação, junto à sonda na técnica de FISH, sem necessidade
de incubação.
Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com enzimas de restrição e clonagem 
em vetor. Com base nas etapas para construção de uma biblioteca de DNA, ordene os itens a seguir:
I- Fragmentos de DNA são inseridos em vetores idênticos e ligados através da DNA ligase. 
II- Clivado do DNA com uma enzima de restrição, formando centenas a milhares de fragmentos de DNA.
III- Inserção do vetor em células hospedeiras, produzindo a clonagem dos diferentes fragmentos. 
IV- Extrair e isolar o DNA genômico de uma célula, tecido ou até mesmo de um organismo.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A IV - II - III - I.
B I - IV - III - II.
C IV - II - I - III.
D I - III - II - IV.
A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da molécula a ser isolada e 
do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e poliacrilamida para a técnica de eletroforese em 
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gel, analise as sentenças a seguir:
I- A poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base nitrogenada de diferença. 
II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda presente no gel, representa um agrupamento de 
moléculas de tamanho semelhantes. 
III- No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se movimentar, enquanto 
fragmentos maiores de DNA podem migrar facilmente no gel de agarose.
 
Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a sentença I está correta.
B As sentenças I, II e III estão corretas.
C Somente a sentença III está correta.
D Somente a sentença II está correta.
As bibliotecas de DNA e cDNA são essenciais para manter e replicar um fragmento clonado por tempo 
indeterminado. Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Biblioteca de cDNA.
II- Biblioteca de DNA.
III- Hibridização em colônia.
( ) Técnica que detecta os fragmentos do DNA de interesse com sondas específicas em meio de cultivo sólido.
( ) Clonagem de fragmentos aleatórios do DNA, permitindo a sua identificação, isolamento e sequenciamento 
do genoma. 
( ) Clonagem de mRNAs, em que cada célula/tecido pode originar uma biblioteca diferente, considerando o 
padrão de expressão gênica específico, relacionado sempre a sua função.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - III - II.
B II - I - III.
C III - II - I.
D I - II - III.
"A clonagem de genes possui variadas aplicações na área de pesquisa, por meio do conhecimento da organização 
de genomas, da sequência de genes e suas proteínas codificadas, da criação de bibliotecas de DNA e cDNA, além 
de produtos que beneficiam a sociedade, como a produção de enzimas industriais, produção de insulina humana, 
vacinas, hormônios de crescimento e melhoramento genético". Sobre as principais diferenças entre essas técnicas, 
destacando os objetivos de cada uma delas, analise as sentenças a seguir:
I- As Bibliotecas de DNA ou cDNA são grandes coleções de material genético mantidas em colônias de bactérias, 
nas quais um fragmento específico de DNA ou um gene podem ser procurados.
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II- Uma biblioteca de DNA é formada por fragmentos originados a partir de um DNA genômico. Já uma 
biblioteca de cDNA é formada por sequências codificantes dos genes que estavam expressos na forma de mRNA 
em uma determinada amostra.
III- A formação das bibliotecas de DNA e cDNA permite que fragmentos clonados sejam mantidos e replicados 
por tempo indeterminado.
Assinale a alternativa CORRETA:
Fonte: CALEFFE, R. T. T.; OLIVEIRA, S. R.; FREITAS, A. C. O.; KIDO, K. K.; GARCIA, A.; PAMPHILE, J. 
A. Clonagem de genes: métodos e aplicações. Revista UNINGÁ, v. 47, p. 73-77, jan./mar. 2016. Disponível em: 
http://revista.uninga.br/index.php/uninga/article/view/1252/874. Acesso em: 5 fev. 2021.
A As sentenças I, II e III estão corretas.
B Somente a sentença I está correta.
C Somente a sentença II está correta.
D Somente a sentença III está correta.
O processo de replicação do DNA é relativamente simples, envolvendo diversas enzimas para que a síntese 
de uma nova fita de DNA seja realizada. Com base nas enzimas envolvidas no processo de replicação in vivo, 
analise as sentenças a seguir:
I- A enzima DNA polimerase realiza a adição de novos nucleotídeos à nova fita do DNA que está sendo 
sintetizada, podendo atuar de modo independente do sentido da fita (3'-5' ou 5'-3'), já que não necessitam de 
iniciadores.
II- As primases são enzimas responsáveis por adicionar primers (iniciadores) à fita de DNA que está sendo 
sintetizada, pois a DNA polimerase necessita de uma extremidade 3' disponível para a inserção do novo 
nucleotídeo. 
III- As enzimas, DNA girase e helicase, são as responsáveis por abrir a dupla fita de DNA, e cortar as pontes de 
hidrogênio entre os nucleotídeos, permitindo, assim, a separação da fita e síntese de uma nova fita.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As sentenças I e II estão corretas.
B As sentenças II e III estão corretas.
C Somente a sentença III está correta.
D Somente a sentença II está correta.
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A hibridização in situ foi elaborada com o objetivo de isolar e identificar fragmentos, através do anelamento 
entre duas fitas simples de origens distintas, sejam elas DNA ou RNA. Sobre essa técnica, associe os itens, 
utilizando o código a seguir:
I- Northen-blotting.
II- Southern-blotting.
III- Hibridização in situ.
( ) Técnica que utiliza sondas de ácidos nucleicos, com marcação química, no local em que a molécula de 
interesse deve ser encontrada (RNA dentro da célula, DNA específico em cromossomos). 
( ) Técnica que avalia padrões de sequências de nucleotídeos de genes do DNA e utiliza sondas de DNA molde, 
os quais são marcados com radiação ou quimicamente. 
( ) Nesta técnica, o RNA mensageiro (mRNA) é utilizado a fim de buscar comparar situações distintas, como, 
por exemplo, utilizar amostras controle como padrão para expressão do gene de interesse e, assim, comparar com 
a amostra de interesse. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - I - III.
B I - II - III.
C III - II - I.
D I - III - II.
O advento das técnicas de biologia molecular possibilitou o estudo genético de diversos organismos, 
incluindo os seres humanos. Esses estudos têm trazido ganhos significativos no entendimento de doenças, 
síndromes e mecanismos de ação de substâncias. De acordo com a importância das técnicas de clonagem do DNA 
e construção de bibliotecas genômicas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) As enzimas de restrição são utilizadas na construção de bibliotecas de DNA, com o objetivo de fragmentar o 
DNA genômico, já que podem ser conhecidas como tesouras moleculares. 
( ) Os vetores são essenciais na técnica de clonagem e são utilizados tanto na construção de bibliotecas de 
DNA, quanto de cDNA, uma vez que carregam os fragmentos de DNA ou o cDNA extraído.
( ) As bibliotecas de cDNA são construídas a partirda extração do DNA de células ou tecidos, que 
posteriormente é submetido à clonagem do DNA.
( ) O mRNA é convertido em cDNA pela transcrição reversa, para então serem introduzidos em vetores e 
submetidos ao processo de clonagem para originar as bibliotecas de cDNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A F - F - V - F.
B V - F - V - V.
C V - F - F - V.
D V - V - F - V.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Conforme o sumário da prática, os ácidos 
nucleicos apresentam características estruturais específicas, que permitem que sejam isolados e manipulados para 
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diversos tipos de aplicações. A técnica de hibridização in situ, por exemplo, baseia-se na complementaridade das 
fitas de DNA ou RNA, utilizando sondas fluorescentes para a detecção da fita complementar em uma 
determinada amostra. Essa técnica permite o estudo da expressão gênica. Outra técnica, que também tem o 
mesmo princípio e finalidade, é a reação em cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR), muito utilizada 
no diagnóstico de algumas infecções e doenças. Considerando esses aspectos, o primeiro passo para a maioria das 
técnicas citadas é o isolamento e a purificação das moléculas de DNA e RNA. O processo de extração do DNA 
pode ser dividido em etapas. 
Com relação às etapas visualizadas na aula prática, assinale a alternativa CORRETA:
A A primeira etapa é a Etapa de Ligação, em que adicionamos 250 µl de Proteinase K, 20 µl da amostra e 20
µl do tampão de lise S.
B A segunda etapa é denominada como Etapa de Ligação, em que é adicionado álcool 96% no eppendorf,
homogeneizado, e 640 µl são transferidos para o tubo spin. 
C O principal composto adicionado na Etapa de Ligação é a Proteinase K.
D Na Etapa de Lavagem, são adicionados 210 µl de álcool 96%.
O sequenciamento de DNA permite a identificação de qual nucleotídeo ocupa cada posição na fita de uma 
molécula ou fragmento de DNA. As primeiras técnicas que permitiram sequenciar o DNA começaram a ser 
desenvolvidas na década de 70, com o método desenvolvido por Sanger. Sobre o método de Sanger, assinale a 
alternativa CORRETA:
A Os didesoxinucleotídeos são ineficazes para a técnicas de Sanger, sendo utilizados somente os primers e
diversas fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, com a mesma extremidade 5'.
B A técnica de Sanger, utiliza terminadores de sequência em réplicas de DNA de uma fita molde diferenciada.
C Os didesoxinucleotídeos são similares aos primers ou iniciadores, já que iniciam a reação em diferentes
terminações 3'.
D
São utilizados iniciadores (primers), fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, ou seja, com a mesma
extremidade 5' e diferentes terminações 3', devido à inserção dos didesoxinucleotídeos, que são nucleotídeos
terminadores de cadeia (ddNTP: ddATP, ddTTP, ddCTP e ddGTP).
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