av I de biologia molecular

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Disciplina:
	Biologia Molecular 
	Avaliação:
	Avaliação I - Individual
	Prova Objetiva:
	
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	1.
	As endonucleases de restrição são produzidas naturalmente por diversas bactérias. De acordo com essas enzimas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
(    ) As enzimas de restrição são utilizadas para fragmentar o DNA em regiões específicas, permitindo a manipulação do DNA.
(    ) Cada bactéria produz uma enzima de restrição específica, que pode ser isolada e purificada a partir de colônias dessas bactérias.
(    ) As enzimas de restrição não reconhecem sequências específicas, apresentando regiões de clivagem aleatórias de 4 a 8 nucleotídeos.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
	
	a) F - F - V.
	
	b) F - V - F.
	
	c) V - V - F.
	
	d) V - F - F.
	 
	 
	2.
	A clonagem de DNA se refere à produção, dentro de uma célula, de diversas cópias de uma sequência específica de um fragmento de DNA. Sobre o exposto, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas:
I- A clonagem de DNA depende da utilização de um vetor, do fragmento de DNA e, posteriormente, de um organismo hospedeiro.
PORQUE
II- O fragmento de DNA de interesse, será inserido em uma molécula de DNA genômico com capacidade de autorreplicação (DNA do vetor), originando o DNA recombinante. Essa inserção se dá através de enzimas de restrição e enzimas de ligação.
Assinale a alternativa CORRETA:
	
	a) As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
	
	b) A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
	
	c) As asserções I e II são proposições falsas.
	
	d) As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
	3.
	O processo de transcrição reversa, é uma das técnicas mais utilizadas na área de pesquisa de expressão gênica. Essa técnica é conhecida como RT-PCR, ou transcrição reversa, seguida por PCR. Com base no RT-PCR, analise as sentenças a seguir:
I- O RT-PCR avalia a expressão diferencial do mRNA, o qual será convertido em DNA complementar (cDNA).
II- A enzima transcriptase reversa (RT) é responsável pela síntese de uma fita de DNA, utilizando como molde uma fita simples de RNA.
III- A técnica de RT-PCR é realizada em 40 ciclos, para formação de uma quantidade adequada de cDNA.
Assinale a alternativa CORRETA:
	
	a) Somente a sentença II está correta.
	
	b) Somente a sentença III está correta.
	
	c) As sentenças I e II estão corretas.
	
	d) As sentenças I e III estão corretas.
	4.
	Existem diferentes formas de sequenciar um genoma, sendo que cada uma se aplica dependendo da realidade do pesquisador em questão, podendo ser técnicas recentes, que são mais robustas e sofisticadas, ou então, técnicas mais antigas, que, ainda assim, demonstram um excelente resultado, apesar de serem mais complicadas e menos automatizadas. Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Sequenciamento de Sanger.
II- Next Generation Sequencing.
III- Sequenciamento de terceira geração.
(    ) Método de primeira geração, mais conhecido por utilizar nucleotídeos terminados de cadeia (ddNTP).
(    ) Método que permite a análise da sequência de nucleotídeos em uma única molécula de DNA, sem a necessidade de amplificação dessa molécula, em tempo real.
(    )  São métodos de nova geração, que não utilizam nucleotídeos terminadores de cadeia para o processamento das amostras.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
	
	a) II - I - III.
	
	b) I - II - III.
	
	c) I - III - II.
	
	d) III - II - I.
	5.
	Através da técnica de eletroforese, ocorre a separação de moléculas em populações de tamanhos semelhantes, as quais são visualizadas como bandas no gel através de marcadores específicos. Sobre os marcadores para técnica de eletroforese em gel, assinale a alternativa CORRETA:
	
	a) O corante mais utilizado para marcação de DNA é o azul de brometo.
	
	b) O marcador ideal para a técnica de eletroforese em gel será aquele capaz de separar as bandas de DNA em diferentes tons de cores.
	
	c) O corante ideal para eletroforese de DNA e RNA é aquele que não se liga ao DNA ou ao RNA, ficando somente na solução tampão da técnica.
	
	d) O marcador ideal é o brometo de etídio, um corante fluorescente, que se liga ao DNA ou RNA e possibilita a sua visualização através de luz ultravioleta (UV).
	6.
	Para detecção do DNA em bibliotecas de DNA, uma membrana é colocada em contato com as colônias na placa logo após o crescimento das colônias bacterianas em placas de cultivo contendo meio sólido. Algumas células irão se aderir à membrana, formando uma impressão das colônias presentes na placa. Em seguida, as células aderidas sofrem lise celular, a fim de liberar o DNA, que permanece aderido à membrana. Por fim, a membrana é incubada com sondas de hibridização marcadas, complementares à porção do gene de interesse, permitindo a visualização da posição dos clones que contêm o fragmento de interesse. Sobre a técnica exposta, assinale a alternativa CORRETA:
	
	a) Hibridização in situ.
	
	b) Hibridização em colônia.
	
	c) Northen-blot.
	
	d) Southern-blot.
	7.
	O advento das técnicas de biologia molecular possibilitou o estudo genético de diversos organismos, incluindo os seres humanos. Esses estudos têm trazido ganhos significativos no entendimento de doenças, síndromes e mecanismos de ação de substâncias. De acordo com a importância das técnicas de clonagem do DNA e construção de bibliotecas genômicas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
(    ) As enzimas de restrição são utilizadas na construção de bibliotecas de DNA, com o objetivo de fragmentar o DNA genômico, já que podem ser conhecidas como tesouras moleculares.
(    ) Os vetores são essenciais na técnica de clonagem e são utilizados tanto na construção de bibliotecas de DNA, quanto de cDNA, uma vez que carregam os fragmentos de DNA ou o cDNA extraído.
(    ) As bibliotecas de cDNA são construídas a partir da extração do DNA de células ou tecidos, que posteriormente é submetido à clonagem do DNA.
(    ) O mRNA é convertido em cDNA pela transcrição reversa, para então serem introduzidos em vetores e submetidos ao processo de clonagem para originar as bibliotecas de cDNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
	
	a) V - V - F - V.
	
	b) V - F - V - V.
	
	c) V - F - F - V.
	
	d) F - F - V - F.
	8.
	Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar o gene de um organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica possíveis mutações, cadeias de transmissão e origem da chegada do vírus a uma região específica. De acordo com as técnicas empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
(    ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizados para o sequenciamento com o método de Sanger, em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência com eletroforese.
(    ) O pirosequenciamento tem como base a formação de pirofosfato a cada novo nucleotídeo adicionado à nova fita.
(    ) O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos testes de sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de sequenciamento de DNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
	
	a) V - F - F.
	
	b) F - F - V.
	
	c) V - V - F.
	
	d) V - F - V.
	9.
	O mais recente avanço no campo de sequenciamento de DNA foi o desenvolvimento de plataformas portáteis capazes de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos. Um exemplo dessas plataformas é a MinION. Sobre a plataforma MinION, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas:
I- Para que seja realizado o sequenciamento por meio da plataforma MinION, as amostras a serem sequenciadas são ligadas a enzimas de processamento. Essas enzimas induzem o fragmento de DNA a passar pelo nano poro, onde as variaçõesda corrente elétrica são detectadas.
PORQUE
II- Sendo conhecidas as variações características de cada nucleotídeo, a sequência de nucleotídeos é formada rapidamente.
Assinale a alternativa CORRETA:
	
	a) A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
	
	b) As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
	
	c) As asserções I e II são proposições falsas.
	
	d) As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
	10.
	Os ciclos do PCR (reação em cadeia da polimerase) são críticos para o sucesso da técnica. Em torno de 20-40 ciclos são programados no termociclador, a fim de se obter milhares de cópias de DNA. Sobre os ciclos do PCR associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Desnaturação.
II- Anelamento.
III- Extensão.
(    ) Estágio em que os primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar.
(    ) Estágio inicial, em que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos de cada uma das fitas simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em cerca de 95º C.
(    ) Estágio correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA polimerase específica, denominada como Taq DNA polimerase, em uma temperatura de 72º C.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
	
	a) II - I - III.
	
	b) III - II - I.
	
	c) I - III - II.
	
	d) I - II - III.
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