Prévia do material em texto
PROTOCOLO DE AULA PRÁTICA Número: LAB-PAP-178 CURSO: BIOMEDICINA E FARMÁCIA Aprovação: DISCIPLINA: IMUNOLOGIA CLÍNICA Diretoria Acadêmica Ser Educacional ELABORADO POR: MARIANA ARAGÃO MATOS DONATO DATA: 28/03/2013 Revisão: 00 1 / 2 Quando impresso este documento passa a ser cópia não controlada. Antes de imprimir, pense na Natureza. NOME DA PRÁTICA: TESTE RÁPIDO - HIV OBJETIVOS DA PRÁTICA: Detectar anticorpos anti HIV1 e 2 OBS.: A quantidade (qtd) material listada abaixo é estimada para apenas um grupo de alunos. A quantidade de grupos, por aula, deve ser definida pelo professor. Sugestão (04-06) alunos por grupo. QTD DESCRIÇÃO DAS VIDRARIAS QTD REAGENTES E SOLUÇÕES 1 KIT HIV QTD MATÉRIA-PRIMA/INSUMO OU ANALITO QTD EQUIPAMENTOS POR GRUPO 2 Amostras pacientes* 1 Geladeira * 1 Estantes para tubos* 20 Ponteiras de pipetas* 1 Recipiente para descarte* MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO PROTOCOLO DE AULA PRÁTICA Número: LAB-PAP-178 CURSO: BIOMEDICINA E FARMÁCIA Aprovação: DISCIPLINA: IMUNOLOGIA CLÍNICA Diretoria Acadêmica Ser Educacional ELABORADO POR: MARIANA ARAGÃO MATOS DONATO DATA: 28/03/2013 Revisão: 00 2 / 2 Quando impresso este documento passa a ser cópia não controlada. Antes de imprimir, pense na Natureza. Sistema de detecção qualitativa rápida de anticorpos anti-HIV em amostras de soro, plasma ou sangue total AMOSTRAS: utilizar soro sem hemólise. Não utilizar plasma para realizar o teste. As amostras podem ser armazenadas até 8 dias entre 2-8 oC. Pode-se congelar por até 3 meses as mesmas amostras. O congelamento e descongelamento repetidas vezes pode fornecer resultados inconsistentes. PROCEDIMENTO 1. As placas e as amostras devem estar em temperatura ambiente no momento da realização do teste. 2. Remover a placa de reação do envelope protetor, identificá-la adequadamente e colocá-la em uma superfície horizontal. 3. Adicionar 100uL da amostra no orifício da placa de reação. 4. Logo em seguida, adicionar 3 gotas de solução diluente no orifício da amostra. 5. Realizar a leitura dos resultados entre 10 e 15 minutos. Interpretação dos resultados. Um resultado positivo (aparecimento da linha na posição teste) só deve ser interpretada no máximo até 15 minutos após o início do teste. Após esse tempo, qualquer linha que aparecer invalida o resultado do teste. Negativo: Ocorre a formação de uma linha colorida na posição de controle e ausência de linha colorida na posição de teste. Positivo: Ocorre a formação de uma linha colorida na posição teste e outra linha na posição controle. A linha na posição teste, mesmo quando sua intensidade for menor que a linha na posição controle, mostra que o teste deve ser considerado positivo. Não considerar resultados positivos quando a linha na posição teste se mostrar visível depois de decorridos 15 minutos do inicio do teste. Inválido: A ausência de formação da linha controle após 15 minutos indica em erro de procedimento ou deterioração do sistema e o teste deve ser considerado como inadequado. OBSERVAÇÃO: toda amostra que apresentar um resultado positivo em um teste rápido, devido a este ser um teste de triagem, deve ser analisada por metodoliga confirmatória, como imunofluorescência indireta ou western blot. Testes rápidos podem ser utilizados como única metodologia para diagnóstico da infecção do HIV somente em situações especiais. OBSERVAÇÃO 1. Conservar os reagentes entre 2-8ºC. Não congelar. 2. Leituras feitas após 2 minutos podem apresentar resultados falsamente positivos. 3. Após o uso, lavar os cartões-teste com água destilada. Se isto não for efetuado imediatamente, usar água com detergente neutro e enxagüar várias vezes com água destilada ou deionizada. Secar antes de usar novamente. Resíduos de detergentes podem gerar resultados falsamente positivos. 4. Usar uma vareta plástica para cada determinação. 5. Descarte o material conforme regulamentações locais. 6. Seguir as boas práticas laboratoriais (BPLs) na conservação, manuseio e descarte dos materiais.