RELATORIO 1- Bioquimica Clinica - Dosagem HDL

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CENTRO UNIVERSITÁRIO LEONARDO DA VINCI
NÚCLEO DE EDUCAÇÃO A DISTÂNCIA - NEAD
RELATÓRIO DE PRÁTICA VIRTUAL
	IDENTIFICAÇÃO
	1. Acadêmico: 
	2. Matrícula: 
	3. Curso: Farmácia
	4. Turma: 8 semestre
	5. Disciplina: Hematologia
	6. Tutor(a) Externo(a): 
	DADOS DA PRÁTICA
	1. Título: HDL Colesterol
	2. Semestre: 8 semestre
	3. Data: 23/10/23
	INTRODUÇÃO
	Os exames laboratoriais são importantes na prática clínica e promovem melhores evidências e critérios para a prevenção, o diagnóstico e o tratamento de doenças. Um dos elementos mais importantes de um exame laboratorial é o valor de referência, por auxiliar os profissionais de saúde a interpretar os resultados (SZWARCWALD, et al. 2019).
Entre estes exames, há a importância de dosagem das HDLs na dinâmica de transporte de colesterol no organismo. Além da sua função na eliminação de colesterol, que diminui o risco de aparecimento de doenças cardiovasculares (ação antiaterogênica), as HDLs também participam em uma série de atividades de proteção. O colesterol corresponde a um esterol (álcool policíclico de cadeia longa) sintetizado por células de origem animal, que, isoladamente, é insolúvel no sangue. Para seu transporte, é necessário que essa molécula se associe, em forma de ésteres de colesterol, a lipoproteínas, formando partículas de diferentes densidades. Dessa forma, quando o colesterol é associado a lipoproteínas de alta densidade (HDLs, doinglês high density lipoproteins), passa a ser denominado HDL colesterol (HDL-C). A principal fonte de colesterol corresponde à síntese endógena realizada pelas células, enquanto a dieta é responsável somente por 25% do colesterol circulante. Assim, a concentração de colesterol no sangue precisa ser controlada por mecanismos regulatórios de absorção, síntese e excreção (ALGETEC, 2023).
	OBJETIVOS
	· - Conhecer o fundamento pelo qual as HDLs precisam ser separadas em amostras de soro ou plasma para sua quantificação;
· - Compreender a importância das HDLs na dinâmica de transporte de colesterol no organismo;
· - Realizar os cálculos necessários para a quantificação de HDL em amostras de soro ou plasma.
	MATERIAIS
	MATERIAIS NECESSÁRIOS
· Água destilada; 
• Cubetas; 
• Centrífuga; 
• Caneta marcadora;
 • Banho-maria; 
• Espectrofotômetro; 
• Micropipeta de 100 μL; 
• Micropipeta de 1000 μL; 
• Ponteira para micropipeta; 
• Kit HDL Colesterol (reagente de HDL e solução padrão de HDL); 
• Recipiente de descarte; 
• Suporte para micropipeta;
 • Suporte para tubo de ensaio; 
• Suporte para tubo de coleta; 
• Tubo de coleta com amostra de soro; 
• Tubo de ensaio.
	METODOLOGIA
	PROCEDIMENTOS
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO Higienize as mãos na pia. Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco, luvas e óculos de proteção. 
2. IDENTIFICANDO OS TUBOS Identifique o primeiro tubo de ensaio com a letra “A”, segundo tubo de ensaio com a letra “B” e o terceiro tubo de ensaio com a letra “P”. Identifique a primeira cubeta com a letra “A”, a segunda cubeta com a letra “B” e a terceira cubeta com a letra “P”. 
3. PREPARANDO A AMOSTRA Configure a micropipeta para 500 μL. Pipete 500 μL da amostra e transfira o conteúdo para o tubo de ensaio. Descarte a ponteira. Pipete 500 μL de reagente precipitante e transfira o conteúdo para o tubo de ensaio. Descarte a ponteira. Homogeneíze o tubo de ensaio com a solução por 20 segundos. Abra a centrífuga. Mova o tubo de ensaio para a centrífuga e centrifugue por 15 segundos. Retire o tubo de ensaio da centrífuga e coloque no suporte. 
4. ADICIONANDO O REAGENTE Configure a micropipeta para 1000 μL. Pipete 1000 µL do reagente de trabalho. Transfira a solução pipetada para o tubo de ensaio B (branco). Repita o procedimento anterior, pipete 1000 µL do reagente de trabalho e transfira para o tubo B. Repita o procedimento anterior e transfira o reagente de trabalho para o tubo de ensaio P e A. Descarte a ponteira. Configure a micropipeta para 200 μL. Pipete 200 μL do sobrenadante contido no tubo de ensaio e transfira o conteúdo para o tubo de ensaio A. Descarte a ponteira. Configure a micropipeta de para 20 μL. Pipete 20 μL de solução padrão e transfira o conteúdo para o tubo de ensaio P. Descarte a ponteira. Homogeneíze os tubos de ensaio A, B e P por 20 segundos. 
5. PREPARANDO O TESTE Ligue o banho-maria a uma temperatura de 37°C. Mova os tubos de ensaio para o banhomaria e aguarde 10 minutos. Retire os tubos do banho-maria. Configure a micropipeta para 500 μL. Pipete 500 μL de água e transfira o conteúdo para o tubo de ensaio B. Descarte a ponteira. Repita o processo anterior, pipete 500 μL de água e transfira o conteúdo para o tubo de ensaio P e A. Descarte a ponteira. 
6. REALIZANDO A LEITURA Ligue o espectrofotômetro e configure o comprimento de onda para 505 nm. Abra o equipamento. Configure a micropipeta para 1000 μL. Pipete 1000 μL do conteúdo do tubo B e transfira para a cubeta B. Descarte a ponteira. Posicione a cubeta B no equipamento e feche. Zere o espectrofotômetro. Abra e retire a cubeta B do espectrofotômetro. Pipete 1000 μL do conteúdo do tubo P e transfira para a cubeta P. Descarte a ponteira. Posicione a cubeta P no equipamento e feche. Realize a leitura com o espectrofotômetro. Abra e retire a cubeta P do espectrofotômetro. Pipete 1000 μL do conteúdo do tubo A e transfira para a cubeta A. Descarte a ponteira. Posicione a cubeta A no equipamento e feche. Realize a leitura com o espectrofotômetro. Abra e retire a cubeta A do espectrofotômetro. Feche o equipamento. Realize o cálculo, utilizando a fórmula HDL colesterol (mg/dL) = Abs. amostra / Abs. padrão x 200 x 0,22. Preencha o laudo com o resultado encontrado.
	RESULTADOS E DISCUSSÕES
	
1. Qual a importância do colesterol HDL no organismo? 
O colesterol cumpre diversas funções biológicas no nosso organismo. Entre elas, destacam-se: a sua participação na arquitetura celular, fazendo parte fundamental dasmembranas biológicas; e o seu papel metabólico, participando da síntese de ácidos biliares que permitem a emulsão e a absorção de lipídeos e vitaminas lipossolúveis, assim como de hormônios e vitamina E.
Lipoproteínas de alta densidade (HDLs): correspondem à lipoproteína de menor tamanho, mas que conta com maior porcentagem de componente proteico. As após correspondem aproximadamente a 45% da composição, sendo as principais: A-I (65%), A-II (10 a 23%), C (5 a 15%) e E (1 a3%). Em termos quantitativos e funcionais, a LDL corresponde ao principal componente de lipoproteínas no sangue, e a HDL representa a principal forma de transporte de colesterol das células para o fígado. As HDLs são formadas a partir do colesterol livre sintetizado nas células, que é movimentado para o meio extracelular por meio de um transportador de membrana, sendo, dessa forma, captado pela apoAI. Essa ação é mediada pela proteína de transferência de fosfolípides.
Além da sua função na eliminação de colesterol, que diminui o risco de aparecimento de doenças cardiovasculares (ação antiaterogênica), as HDLs também participam em uma série de atividades de proteção. Entre essas atividades, destacam- se: ação antioxidante, exercida pela paraoxidase presente na sua composição; atividade anticoagulante e pró-fibrinolítica, atuando na inibição da ativação de fatores da coagulação e da agregação plaquetária; participação em uma série de mecanismos de proteção endotelial, fundamentais para evitar o aparecimento de acidentes vasculares.
2. O que as alterações nos parâmetros do colesterol HDL podem indicar?
O perfil individual das análises pode indicar se o paciente apresenta ou não risco de aparecimento de doenças cardiovasculares. Assim, a interpretação do resultado da dosagem de HDL-C em amostras de soro ou plasma precisa ser acompanhada da observação dos demais resultados obtidos no perfil lipídico. Dessa forma, diversos estudos apontam que concentrações elevadas de HDL-C (> 40mg/dL) estão relacionadas a um baixo risco de aparecimento de doençascardiovasculares, com valores de colesterol total menores que 190mg/d Levalores de LDL menores que 130mg/dL em pessoas com baixo risco vascular.
	REGISTRO FOTOGRÁFICO
	
	REFERÊNCIAS
	
ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO. Tipagem Sanguínea. Laboratório de Hematologia Tipagem Sanguínea https://uniasselvi.grupoa.education/sagah/object/default/55526683.
SZWARCWALD, CÉLIA LANDMANN, et al. Valores de referência para exames laboratoriais de colesterol, hemoglobina glicosilada e creatinina da população adulta brasileira. Rev. bras. epidemiol. 22 (Suppl 02). 2019. 
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