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Hematopoese/Eritropoese Prof. Helder Andrey Rocha Gomes Hematopoese • Localização: medula óssea; Fonte: Silvethorn, 2017. Hematopoese • Células sanguíneas Sobre a coleta da amostra • Veia cubital mediana (preferida), cefálica ou basílica; • Outras fontes: superfície plantar do calcanhar (bebês), dedos (crianças e adultos). Fonte: Células Sanguíneas Tubos a vácuo para coleta de sangue Fonte: https://kasvi.com.br/tubos-de-coleta-vacuo-analise-sangue-cores-beneficios/ Distensão Coleta da amostra • EDTA – sangue venoso • Estabilidade de 4h – TA (20 – 25°C) • Estabilidade de 8h – em geladeira (2 – 8°C) • Esfregaço sanguíneo – preferencialmente sem EDTA Fixação e coloração • Fixação: preservação da estrutura celular; • Coloração: normalmente baseada nos trabalhos de Romanowsky (plasmódio); • Corantes iniciais: – Azul de metileno: núcleo em purpura; – Eosina: citoplasma. • Giemsa: azur e eosina; Fixação e coloração • Mecanismo geral; – Corante básico catiônico (azure B): cor azul/violeta; • Ácidos nucléicos, nucleoproteínas, grânulos dos basófilos. – Corante ácido aniônico (eosina): coloração laranja. • Hemoglobina, grânulos dos eosinófilos. – Componentes celulares acidófilos (rosa/laranja) e basófilos (azul/púrpura). Fixação e coloração • Estruturas químicas dos corantes. Azure B Eosina Eritropoese – Visão Geral Eritropoese Eritropoese • PROCESSO DE PRODUÇÃO DE HEMÁCIAS • ERITROPOETINA – Glicoproteína que estimula os progenitores eritróides a formar eritroblastos; – Liberada pelas células adjacentes aos túbulos proximais renais quando ocorre hipóxia renal; – Menor quantidade fígado; Células Tronco • PRÓ-ERITROBLASTO – Diâmetro em torno de 18-25 µm; – Núcleo tem cor vermelho purpúreo claro; – Cromatina delicada, distribuição uniforme; – 1 – 3 nucléolos bem evidentes; – Citoplasma: aspecto granular • Intensamente basófilo com halo claro ao redor do núcleo. A imagem Esta Fotografia de Autor Desconhecido está licenciada ao abrigo da CC BY-SA https://www.wikidoc.org/index.php/Proerythroblast https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/ Eritropoese • ERITROBLASTO BASÓFILO – Tamanho médio de 16 µ de diâmetro; – 2º dia de eritropoese; – Núcleo apresentas condensação de cromatina; – Não se observa nucléolos; – Citoplasmamais basofílico; • Início da hemoglobinização. Fonte: Melo e Silveira,2015 Eritropoese • ERITROBLASTO POLICROMÁTICO – Tamanho médio de 13 µ de diâmetro; – Citoplasma de cor acizentada; • Resultande da acidofilia da hemoglobina e da basofilia do RNA; – Núcleo apresenta cromatina condensada. Fonte: Melo e Silveira,2015 Eritropoese • ERITROBLASTO ORTOCROMÁTICO – Tamanho médio de 8 – 11 µ de diâmetro; – Núcleo picnótico, geralmente excêntrico; – Citoplasma alaranjado • Síntese acentuada de hemoglobina. Fonte: Melo e Silveira,2015 Fonte:laces.icb.ufg.br/p/20038-eritroblasto-ortocromatico Eritropoese • RETICULÓCITO – Não apresenta núcleo; – Tempo médio de 18h para se transformar em hemácia; – Tem capacidade residual • Sintetiza proteínas e mitocôndrias – Apresenta vestígios de RNA; • Responsável pela policromasia. Fonte: Melo e Silveira,2015 Eritropoese • HEMÁCIAS – ERITRÓCITOS – Discos bicôncabos, anucleadas; • Aumenta a superfície de contato da célula; • Facilita a troca gasosa; – 7 – 8 µ de diâmetro; – 95% de hemoglobina – 5% de enzimas e glicose – ~120 dias – Cerca de 4,5 – 6,0 milhões/ mm³ - homens; – Cerca de 4,1 – 5,5 milhões/ mm³ - mulheres; Fonte: Melo e Silveira,2015 Eritrócitos maduros • Bicôncavas; • Anucleadas; • Troca dos gases. Eritrócitos maduros - morfologia • Citoesqueleto; Hemoglobina • Coloração vermelha • Formada por 2 partes – Heme – porção que contém ferro – Globina – porção protéica • Função – Promove a absorção, transporte e liberação de oxigênio aos tecidos Hemoglobina • Síntese nas mitocôndrias • Formada por 4 anéis pirrólicos ligados por um átomo de ferro • Fase - Reticulócito: incorporação de ferro p/ formação de heme • 4 cadeias com um átomo de ferro no centro; Hemoglobina • Constitui a maior porção da molécula de hemoglobina • Síntese no ribossomo citoplasmático • Tetrâmero polipeptídico – 2 cadeias α – 2 outras que podem ser β γ δ • Falha na produção: – talassemias Hemoglobina • Cada cadeia globina possui o seu grupo heme • Hemoglobinas normais: – HbA1 → alfa2 beta2 – HbA2 → alfa2 delta2 – HbF → alfa2 gama2 A imagem Esta Fotografia de Autor Desconhecido está licenciada ao abrigo da CC BY https://natural-universe.net/the-scientific-view-of-the-universe/the-geological-present/more-physiology-communication-circulation-immunity/the-human-circulatory-system/ https://creativecommons.org/licenses/by/3.0/ Hemólise • Lise dos glóbulos vermelhos • Lise constante pelos macrófagos (baço) • Hemólise anormal ou eritropoese ineficaz→ anemia • Após 120d → esgotamento das enzimas eritrocitárias → ↓ metabolismo da glicose →↓ATP → alteração da membrana • Fagocitose: – heme → plasma – globina → degradada www.udf.edu.br Obrigado Slide 1: Hematopoese/Eritropoese Prof. Helder Andrey Rocha Gomes Slide 2: Hematopoese Slide 3: Hematopoese Slide 4: Sobre a coleta da amostra Slide 5: Tubos a vácuo para coleta de sangue Slide 6: Distensão Slide 7: Coleta da amostra Slide 8: Fixação e coloração Slide 9: Fixação e coloração Slide 10: Fixação e coloração Slide 11: Eritropoese – Visão Geral Slide 12: Eritropoese Slide 13: Eritropoese Slide 14: Células Tronco Slide 15: Eritropoese Slide 16: Eritropoese Slide 17: Eritropoese Slide 18: Eritropoese Slide 19: Eritropoese Slide 20: Eritrócitos maduros Slide 21: Eritrócitos maduros - morfologia Slide 22: Hemoglobina Slide 23: Hemoglobina Slide 24: Hemoglobina Slide 25: Hemoglobina Slide 26: Hemólise Slide 27