Aula Pratica 8o Ano - Estudo do DNA

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EXTRAÇÃO DE DNA
	 
NOTA: ___________
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Visto do Professor
DATA: ______/____/_____
	
ALUNO(A):________________________________________________________________________________N.º______ SÉRIE/ANO: _____ 
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O DNA (Ácido DesoxirriboNucleico) é uma molécula orgânica responsável pelo armazenamento e transmissão das informações genéticas que compõem os organismos vivos. Nos organismos eucarióticos, como animais, plantas e fungos, o DNA está presente no núcleo das células sendo composto por três substâncias químicas: as bases nitrogenadas, um tipo de açúcar e um radical de ácido fosfórico. 
O tamanho microscópico do DNA faz com que só seja possível observar essa molécula utilizando métodos avançados de microscopia eletrônica. No entanto é possível identificar a presença de DNA em solução a partir da extração de uma grande quantidade dessa molécula de células. Com isso, o objetivo da aula é contribuir para a identificação do DNA extraído a partir de material celular.
	
	MATERIAL NECESSÁRIO PARA EXTRAÇÃO DE DNA: 
> Material biológico - aqui utilizaremos morango e banana. 
> Faca ou tesoura; 
> Água quente; 
> Recipiente para macerar o material biológico; 
> Gelo ou água fria; 
> Álcool de limpeza gelado (70%). 
- 3 Béqueres ou copos; 
- 2 Tubos de ensaio
- 1 colher de sopa de detergente líquido neutro; 
- 1 colher de chá de sal de cozinha; 
- 1 funil ou peneira
	
PROCEDIMENTO PARA EXTRAÇÃO DO DNA DAS AMOSTRAS: 
 
01 – Coloque 80 mL de água no béquer/copo. Acrescente uma colher de detergente líquido transparente e uma colher de chá de sal de cozinha e misture bem com o auxílio de uma colher, misturar com calma para não formar bolhas. Essa é a solução de lise que vamos utilizar para extrair o DNA do material biológico. 
02 – Macere o material vegetal dentro de um saco do tipo zip lock – Quanto mais amassado ficar, melhor 
03 – Coloque tudo dentro de um copo e adicione a solução de lise. Misture tudo vagarosamente para evitar a formação de bolhas devido a presença de detergente na solução. 
04 – Incube o béquer/copo em água-quente (aprox. 70 ºC) por 10 a 15 minutos. 
05 – Retire o recipiente de dentro da água quente e filtre o material utilizando um funil com papel filtro ou uma peneira. 
06 – Passe um pouco do material filtrado para um tubo de ensaio (cerca de 15 mL)
07 – Retire o béquer/copo do gelo e adicione o álcool gelado - com cuidado e pela parede do recipiente. O volume de álcool adicionado deve ser aproximadamente equivalente ao do material filtrado. 
08 – Observe o DNA precipitando como uma nuvem esbranquiçada no fundo da fase alcoólica. No topo da fase alcoólica irá se formar o acúmulo de outro tipo de substância (proteína) que não deve ser confundida com DNA. 
 	
APÓS TERMINAR A EXPERIÊNCIA, RESPONDA AS QUESTÕES PROPOSTAS ABAIXO: 
01. Qual é a função da solução de lise utilizada no início do experimento? Qual a função do sal e do detergente utilizados no preparo dessa solução? 
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02. No procedimento para a realização do experimento, é orientado que você pique o material o máximo possível, de tal maneira que quanto mais picado ele estiver, melhor a qualidade do resultado. A que se deve essa orientação? 
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03. Qual a importância da incubação à temperatura elevada de 70ºC? 
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04. Na ETAPA 06 é adicionado ao filtrado já resfriado cerca de 30 mL de álcool 70%. Qual a função do álcool nesta etapa da extração do DNA vegetal? 
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