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RELATÓRIO DE PRÁTICA Maria Lidiane Claudino Lemos Matrícula: 01596177 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: 08/04/2024 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Microbiologia e Parasitologia DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: Maria Lidiane Claudino Lemos MATRÍCULA: 01596177 CURSO: Nutrição POLO: Shopping Páteo Olinda PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Heytor Victor Pereira da Costa TEMA DE AULA: PREPARAÇÃO E ESTERILIZAÇÃO DE MATERIAIS UTILIZADOS NA MICROBIOLOGIA CLASSIFICAÇÃO, COMPOSIÇÃO QUÍMICA E PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA 1. PREPARAÇÃO E ESTERILIZAÇÃO DE MATERIAIS UTILIZADOS NA MICROBIOLOGIA A. Dentre os procedimentos utilizados na preparação de materiais utilizados na microbiologia, qual a importância no tamponamento dos tubos de ensaio e dos Erlenmeyer com algodão hidrofóbico? B. Qual material é utilizado para embalagem dos materiais que serão submetidos a processos de esterilização via estufa ou autoclave? C. Adicione uma ou mais fotos da preparação de materiais utilizados no laboratório de microbiologia. D. Descreva o fundamento da técnica de esterilização de autoclavação, e porque alguns meios de cultura não podem ser autoclavados? 2. CLASSIFICAÇÃO, COMPOSIÇÃO QUÍMICA E PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA A. Quanto a composição química como podemos classificar os meios de cultura? B. De acordo com os tipos de meios de cultura, no que diferem os meios sólidos, semissólidos e líquidos? C. Adicione uma ou mais fotos das etapas de preparo do meio de cultura. D. Descreva como deve ser feito o cálculo da pesagem do meio de cultura. E quais consequências são geradas por erro nesse cálculo na utilização desse meio? RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: 08/04/2024 RELATÓRIO: (Resumo do primeiro tema). Para iniciarmos o procedimento na microbiologia, se faz necessário a preparação esterilização do material a ser utilizado. Após toda a preparação inicia-se tampando os tubos de ensaio e dos Erlenmeyer com algodão hidrofóbico. Tal procedimento se faz necessário para evitar contaminação do material durante a esterilização e armazenamento. Esse procedimento é importante para não entrar líquidos e micro-organismos nos recipientes e manter a qualidade das culturas microbianas. Continuando o processo esterilização, também é necessário embalar com papel kraft (papel madeira), que suporta alta temperatura, no autoclave e também na estufa. Nessa técnica de esterilização por autoclave se usa o calor úmido sob pressão, eliminando assim os micro-organismos presentes no material, tais como Fungos vírus e bactérias. Com o calor dessa técnica, estruturas celulares como proteínas e membranas são eliminadas. A pressão utilizada nesse processo eleva a temperatura da água acima do ponto de ebulição eliminando os micro-organismos. Porém, existem meios de cultura sensíveis a altas temperaturas e pressão que não podem ser autoclavados. Como por exemplo, substâncias termolábeis, nutrientes específicos, hormônios, vitaminas e antibióticos que podem ser danificados ou interrompido no processo de autoclavação. Os meios de cultura são classificados: Como meios definitivos (são de composição popular e estabelecidas, e seus componentes, tais como sais inorgânicos, vitaminas e nutrientes são acrescidos de forma precisa e em quantidades conhecidas; os meios complexos (sua composição não é totalmente definida e conhecida, os mesmos são utilizados para o cultivo de micro-organismos sem necessidades nutricionais especificas que evoluem em condições variadas). O estado físico dos meios de cultura, são classificados: meios sólidos, semissólidos e líquidos. A diferença entre os mesmos é que os dois primeiros têm agar em sua composição (polissacarídeos solidificante) e os meios líquidos não tem o polissacarídeo solidificante. Para realizar o cálculo da pesagem do meio de cultura precisa determinar a quantidade essencial de cada componente de acordo com a formulação típica do meio. Pesa- se os ingredientes separadamente em balança de precisão. Após pesagem mistura os ingredientes para obter uma mistura homogênea antes de incluir a água no preparo do meio. Caso haja erro, trará consequências como ineficiência do meio, contaminação e inconsistência nos resultados. A pesagem realizada corretamente, assegura confiança e eficácia nos experimentos. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: 08/04/2024 TEMA DE AULA: TÉCNICAS ASSÉPTICAS DE ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS COLORAÇÃO DE DIFERENCIAL DE GRAM 1. TÉCNICAS ASSÉPTICAS DE ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS A. O que é zona de esterilidade e qual sua importância para o manuseio de materiais microbiológicos? B. Cite as principais técnicas utilizadas para realização de semeio bacteriano? C. Qual o objetivo da técnica de semeio por esgotamento? Por que a mesma é comumente utilizada nas análises clínicas? D. Como visualmente pode-se identificar que um semeio bacteriano apresenta apenas um tipo de bactéria isolada? 2. COLORAÇÃO DE DIFERENCIAL DE GRAM A. Qual o fundamento da coloração de Gram que permite a separação das bactérias em dois grandes grupos? B. Geralmente quais formas bacterianas são classificadas como Gram positivas e quais são classificadas como Gram-negativas? C. Adicione uma foto ou mais da realização da coloração de Gram ou da leitura microscópica da lâmina. D. Qual a importância da coloração de Gram na rotina clínica no laboratório de microbiologia? RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: 08/04/2024 RELATÓRIO: (Resumo do segundo tema). O trabalho feito com materiais microbiológico é chamado de ária de esterilidade ou esterilizada com a intenção de evitar contaminação. Fundamental para prevenir a entrada de organismos indesejados no decorrer do experimento microbiológico, garantido a integridade nos resultados e segurança do operador. No meio bacteriano temos técnicas necessárias para a realização do mesmo, tais como esfregaço em placa (alça bacteriológica é usada para espalhar uma amostra bacteriana numa placa de petri com meio de cultura sólido), Estrias em placa(uso da alça bacteriológica para fazer estrias da amostra bacteriana previamente diluída na superfície de uma placa de petri contendo meio de cultura sólido), Inoculação por picada (agulha ou alça bacteriológica usada para introduzir amostra bacteriana no meio de cultura sólida da placa de petri) e esvaziamento (a suspensão bacteriana é espalhada desordenadamente na placa de petri). O intuito da semeadura por esvaziamento é dissolver a amostra bacteriana para obter colônias bacterianas isoladas em meio sólido. Essa técnica semeio normalmente é usada em análises clínicas afim de identificar e dimensionar a quantidade de micro-organismos presentes em amostras clinicas, permitindo a expansão de uma diversidade de micro-organismos em um só meio. O semeio bacteriano que detecta um tipo de bactéria isolada com a existência de colônias de aspectos parecido, tais como cor, tamanho e textura. A falta de tais aspectos sugere que existe só um tipo de bactéria na placa. O que explica a coloração de Gram é a fusão da mesma com a estrutura da parede celular das bactérias. Sendo assim forçado a coloração de Gram dividida em dois principais grupos, os Gram-negativos e Gram-positivos, fundamentados na formação da parede celular. Geralmente, as bactérias de formas especificas (cocos), classificam-se como Gram- Positivos, enquanto as com formato de bastonetes (bacilos) são identificadas como Gram- Negativas. A coloração de Gram é fundamental no dia a dia da clínica laboratorial de microbiologia, permitindo a rápida identificação debactérias, contribuindo na escolha do antibiótico para o tratamento e eficaz. Ajuda também na seleção de técnicas que fornecem informações relevantes para o diagnóstico e tratamento eficiente de infecções bacterianas. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: 08/04/2024 TEMA DE AULA: OBSERVAÇÃO DE LÂMINAS DE Schistosoma mansoni E PROTOZOÁRIOS 1. OBSERVAÇÃO DE LÂMINAS DE CERCARIAS E OVOS DE Schistosoma mansoni A. Como o ser humano é contaminado pela forma infectante (cercarias) e contrai a esquistossomose? B. Visto ao microscópio óptico, o ovo pode ser reconhecido pela presença de qual estrutura morfológica? 2. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE CISTOS DE Entamoeba histolytica A. Descrever a característica morfológica que permite a diferenciação entre os cistos da Entamoeba histolytica da Entamoeba coli 3. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE TROFOZOITO DE Giardia lamblia. A. Cite qual estrutura permite a fixação do trofozoíto da Giardia lamblia no intestino humano. 4. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE Leishmania sp. A. Quais características morfológicas permitem a diferenciação das firmas evolutivas amastigota e promastigotas? 5. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE TROFOZOITO DE Trichomonas vaginalis A. Quais as estruturas substituem as mitocôndrias no trofozoíto de Trichomonas vaginalis? 6. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE EPIMASTIGOTA DE Trypanosoma cruzi A. Descrever as diferenças morfológicas entre as formas evolutivas amastigota, epimastigota e tripomastigota de Trypanosoma cruzi, citando em qual hospedeiro elas são encontradas. 7. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE TAQUIZOITO DE Toxoplasma gondii A. Em que fase do ciclo evolutivo do Toxoplasma gondii, estão presentes os taquizoítos. E como eles podem infectar o ser humano? RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: 08/04/2024 RELATÓRIO: (Resumo do terceiro tema) A infecção em humanos acontece por contato direto com água contaminada, por caramujo do gênero Biomphalaria, que deposita miracidios, que evolui para esporocistos, produzindo cercarias na água doce, que permeia a pele por meio do contato com a água, normalmente por membros inferiores. Utilizando o microscópio, é possível detectar os ovos do Schistosoma mansoni através da presença de espiculo ou espinho lateral. Quanto a observação da lâmina de cistos da Entamoeba histólitica, é possível detectar a diferença dos cistos com os da Entamoeba coli porque o núcleo da histólitica geralmente é central, e o núcleo da coli é singular e grande. O trofozoíto da Giardia lambia é possível ser afixado no intestino humano por meio do disco de sucção, popularmente conhecido como ventosa, No tocante a lâmina da Leishmania SP de formato progressivo amastigotas e Promastigotas, é possível diferenciar pelo aspecto do corpo e colonização do cinetoplasto. Os Amastigotas de (estrutura boleada e o cinetoplasto geralmente junto ao núcleo) e promastigotas (estrutura alongada e o cinetoplasto localizado previamente ao núcleo). Na observação da lâmina com trofozoíto de Trichomonas vaginalis é possível ver a mudança das mitocôndrias por organelas consideradas como hidrogenossomos. O que discerne o aspecto evolucional do Trypanossoma cruzi são: Amastigota (formato boleado sem flagelo localizado nas células do hospedeiro vertebrado, normalmente em tecido muscular e cardíaco); epimastigota (formato esticado com flagelo livre, alojado no intestino do vetor geralmente no inseto triatomíneo); tripomastigota (formato esticado com flagelo, alojado no sangue e tecidos do hospedeiro vertebrado, tais como humanos e outros animais mamíferos). É na fase aguda do ciclo progressivo do Toxoplasma gondii que detecta-se os taquizoítos. Os mesmos contaminam os seres humanosquando ingeridos através de carne mal cozida, alimentos e água infectados com oocistos esporulados. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: 08/04/2024 ALGUMAS FOTOS DOS PROCEDIMENTOS: Fotos da preparação do material a ser usado em laboratório de microbiologia, tais como: (tubos de ensaio, placas de petri, Erlenmeyer, algodão hidrofóbico, papel graft e outros). Fotos da preparação de etapas de meios de cultura em laboratório de microbiologia, tais como caldo meio quimicamente definido, Agar MacConkey, Agar Cled. Fotos da realização da coloração de Gram positivo e negativo da bactéria Estafilococos. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: 08/04/2024 REFERENCIAS: https://www.scielo.br/j/cr/a/psYvv5Tr3qRKz6DpSG9LN8L/ Pesquisado em 08/04/24 https://sanarmed.com/resumo-bacterias-gram-negativas-definicao-classificacao-e- patologias/ Pesquisado em 15/04/24 https://www.msdmanuals.com/pt- br/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-bacterianas- bact%C3%A9rias-gram-positivas/considera%C3%A7%C3%B5es-gerais-sobre- bact%C3%A9rias-gram-positivas Pesquisado em 04/05/24 Práticas de Microbiologia – Assistindo as aulas práticas com a professora: Rosilma Mello, nos dias 19, 20 e 21/04/24. Aulas gravadas com o professor Heytor Victor Pereira da Costa, nos dias 25, 27, 29 e 30/04/24. https://www.scielo.br/j/cr/a/psYvv5Tr3qRKz6DpSG9LN8L/ https://sanarmed.com/resumo-bacterias-gram-negativas-definicao-classificacao-e-patologias/ https://sanarmed.com/resumo-bacterias-gram-negativas-definicao-classificacao-e-patologias/ https://www.msdmanuals.com/pt-br/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-bacterianas-bact%C3%A9rias-gram-positivas/considera%C3%A7%C3%B5es-gerais-sobre-bact%C3%A9rias-gram-positivas https://www.msdmanuals.com/pt-br/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-bacterianas-bact%C3%A9rias-gram-positivas/considera%C3%A7%C3%B5es-gerais-sobre-bact%C3%A9rias-gram-positivas https://www.msdmanuals.com/pt-br/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-bacterianas-bact%C3%A9rias-gram-positivas/considera%C3%A7%C3%B5es-gerais-sobre-bact%C3%A9rias-gram-positivas https://www.msdmanuals.com/pt-br/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-bacterianas-bact%C3%A9rias-gram-positivas/considera%C3%A7%C3%B5es-gerais-sobre-bact%C3%A9rias-gram-positivas