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UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS FACULDADE DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E AMBIENTAIS - FCBA DISCIPLINA DE BIOLOGIA CELULAR PROF. DR. MARCOS GINO FERNANDES ACADÊMICA: LUANA FERREIRA DUARTE XVl TURMA DE BIOTECNOLOGIA (P1) TEMA: CITOSOL E CITOESQUELETO PRÁTICA 7: ESTUDO DE OSMOSE EM CÉLULA ANIMAL Dourados - MS 2024 Introdução: A osmose é um processo fundamental no contexto do sangue humano. As hemácias, ou glóbulos vermelhos, e o plasma sanguíneo constituem um meio isotônico, o que significa que possuem a mesma pressão osmótica. Esta condição permite uma troca equilibrada de água entre o interior das hemácias e o plasma, mantendo a homeostase celular. Quando o plasma sanguíneo se torna menos concentrado em solutos do que o interior das hemácias, formando um meio hipotônico, a água entra nas células com mais facilidade. Esse influxo de água pode causar o inchaço das hemácias até que elas eventualmente rompam, num processo conhecido como hemólise. Por outro lado, se o plasma se torna mais concentrado em solutos que o interior das hemácias, formando um meio hipertônico, a água é retirada das células, fazendo com que elas murcham e percam a sua funcionalidade, num processo chamado crenação A osmose é o movimento de água, ou solvente, através de uma membrana semipermeável, de uma região de menor concentração de solutos para uma região de maior concentração, visando equilibrar as concentrações de solutos em ambos os lados da membrana. A pressão osmótica é a pressão necessária que deve ser aplicada a uma solução para impedir a entrada de água por osmose. Este processo é de extrema importância biológica, pois pode causar variações no volume celular que afetam a função celular. Por exemplo, as hemácias humanas são isotônicas em relação a uma solução de cloreto de sódio a 0,9%, também conhecida como solução fisiológica. Esta solução é utilizada em práticas médicas para evitar alterações no volume das células sanguíneas durante transfusões ou infusões intravenosas (Nelson, 2006). Adicionalmente, a osmose desempenha um papel crucial na regulação do equilíbrio hídrico e eletrolítico do corpo humano. O sistema renal utiliza a osmose para reabsorver água e nutrientes essenciais enquanto excreta resíduos e excesso de solutos na urina. Distúrbios na osmose podem levar a condições médicas severas, como desidratação ou edema, destacando a necessidade de um equilíbrio osmótico adequado para a saúde celular e geral do organismo. Andre Luiz Batista Holz Acrescentar as referências no final do parágrafo. Objetivos: • Analisar a morfologia das hemácias em diferentes meios: isotônico, hipertônico e hipotônico. • Compreender comportamento das hemácias em um meio isotônico. • Investigar as alterações morfológicas das hemácias em um meio hipertônico. • Estudar as mudanças na morfologia das hemácias em um meio hipotônico. • Avaliar as implicações das variações de meios na funcionalidade das hemácias. Materiais: ● Microscópio óptico ● Lâmina e lamínula ● Algodão ● Álcool iodado (para desinfecção dos dedos) ● Micro Lancetador ● Solução de cloreto de sódio 0,9% ● Corante Verde Janus ● Conta-gotas ● Papel filtro ● Palitos de madeira PROCEDIMENTO: 1.Passou-se algodão embebido em álcool iodado no dedo indicador 2. Com o auxílio de micro lanceta descartável e um microlancetador, furou-se a ponta do dedo indicador 3. Colocou-se uma gota de sangue em uma lâmina e pingou-se uma gota de NaCl 0,9% nesta gota e misturar com palito de madeira 4. Colocou-se a lamínula a 45°à laminina, logo abaixando-a de maneira suave 5.Com o papel absorvente, retirou-se o excesso da solução de cloreto de sódio 6. Seguiu- se para a etapa de focalização 7. Observou-se e fotografou-se nos aumentos 40x,100x, 400x e 1000x. Andre Luiz Batista Holz Procedimentos devem estar de acordo com o que foi feito durante a aula. Andre Luiz Batista Holz Não foram utilizados. 8. Por capilaridade, colocou-se uma gota de NaCl 2,0% e removeu o excesso com o papel filtro 9. Observou-se e fotografou-se o resultado 10. Em uma nova lâmina, colocou-se uma gota de sangue e uma de NaCl 0,6%, misturado com o palito de madeira 11. Cobriu-se com lamínula 12. Observou-se e fotografou-se o resultado 13. Por capilaridade, colocou-se uma gota de NaCl 0,4% e removeu-se o excesso com o papel filtro 14. Observou e fotografou o resultado. RESULTADO: A. B. . Figura 1 - NaCl 0,9% Figura 2 - NaCl 0,9% Aumentado de 40x. Aumento de 100x C. D. Figura 3- NaCl 0,9% Figura 4- NaCl 0,9% Aumento de 400x Aumento de 1000x 1. Hemólise 1. Hemácias 2. Hemácias enrugadas E. F. Figura 5- NaCl 0,2% Figura 6- NaCl 0,2% Aumento de 40x Aumento de 100x G. H. Figura 7- NaCl 0,2% Figura 8- NaCl 0,2% Aumento de 400x Aumento de 1000x Nas imagens, é possível observar as células sanguíneas e compreender suas estruturas em diferentes meios: isotônico (NaCl 0,9%), hipertônico (2%) e hipotônico (0,6% e 0,4%). Nota-se uma distinção entre as amostras: no meio isotônico, a célula mantém seu estado normal, enquanto no meio hipertônico, ela se contrai. Já no meio hipotônico, não conseguimos fazer o procedimento. Discussão: 1. Como é a morfologia das hemácias colocadas em meio isotônico (NaCl 0,9% igual ao do soro sanguíneo)? As hemácias são envolvidas por uma solução isotônica de NaCl 0,9%, o que as mantém com uma forma arredondada e apresentando a distintiva biconcavidade no centro. 2. Quando se mistura o sangue com uma solução de NaCl 2,0%, o que acontece com a membrana das células? As células inseridas no meio hipertônico apresentam uma forma enrugada, como se estivessem passando por uma contração. 3. Quanto à concentração de 2,0%, que denominação recebe este meio? Esse meio com maior quantidade de solutos, com uma concentração de 2% de NaCl em relação ao soro sanguíneo, é denominado hipertônico. 4. Por que a célula libera água do citoplasma durante o murchamento e a absorve durante a turgescência? Trata-se de um processo natural que ocorre nas células para equilibrar a concentração de solutos entre o interior e o exterior celular. 5. O que é homólise? Hemólise é a destruição ou ruptura das hemácias (glóbulos vermelhos) que resulta na liberação da hemoglobina no plasma sanguíneo. Esse processo pode ocorrer de forma natural no final do ciclo de vida das hemácias, ou pode ser causado por fatores externos como infecções, toxinas, reações imunológicas, ou condições físicas adversas, como a exposição a soluções hipotônicas ou hipertônicas. Conclusão: O sangue é um tecido líquido vital para o funcionamento do corpo humano, composto por diferentes tipos de células, principalmente as hemácias. As hemácias desempenham um papel importante no transporte de oxigênio e dióxido de carbono entre os pulmões e os tecidos do corpo. Elas podem ser afetadas pelo processo de osmose, dependendo do meio em que estão inseridas. Em um meio hipertônico, as hemácias sofrem uma contração devido à perda de água; em um meio isotônico, mantêm seu estado natural, com um equilíbrio osmótico adequado; e em um meio hipotônico, elas se incham por absorverem água em excesso. Esses processos demonstram a importância do equilíbrio osmótico para a integridade e a funcionalidade das células sanguíneas. REFERÊNCIAS: GINO, M. PRÁTICAS DE BIOLOGIA CELULAR. Disponível em: <https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/3103/1/praticas-de- biologia-celular.pdf>. KEITH, F. P.; KEVIN, 5. Volume Regulation and Osmasensing in Animal Cells. Em: Osmatio and lonia Regulation. [5.1.1 CRG Press, 2008. p. 37-67. MILLER, C.; VANDOME, A. F.; MCBREWSTER, J. (EDS). Osmose. [s.1.] Alphaseript Publishing, 2011. NELSON, D. L.; LEHNINGER, A. L.; COX, M. M. Principios de Bioquimica. [s.l.] Omega, 2006. PORFIRIO, M. Citologia e Histologia (2a Edicão). EsL] Independently Published, 2021. https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/3103/1/praticas-de-biologia-celular.pdf https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/3103/1/praticas-de-biologia-celular.pdfAndre Luiz Batista Holz Remover Hiperlink.