Exerccios_CG-CLAE

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UFRRJ – IQ -DQO-Exercícios de CLAE-CGAR 
DISCIPLINA IC –IC 363– Cromatografia – Profa Rosane Nora 
 
Aluno: ____________________________________________Mat,:____________________ 
 
1 Observe os cromatogramas A e B abaixo, obtidos por cromatografia com fase gasosa de alta 
resolução, a partir das análises realizadas em duas colunas com polaridades distintas. As condições 
de injeção e de programação de temperatura foram idênticas e a detecção foi efetuada com detector 
de ionização de chama (FID). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Estes cromatogramas mostram os perfis de separação obtidos a partir da injeção de uma 
mistura contendo diferentes substâncias, conforme tabela abaixo. 
 
Pico número Substâncias Ponto de ebulição(C) 
1 Xileno 111 
2 Octanol 165 
3 2,6-dimetilanilina 188 
4 Dimetilcicloexano 173 
5 Benzoato de butila 222 
6 Hexadecano 216 
 
Os picos não identificados correspondem ao solvente utilizado nas injeções. 
A. Considerando as diferenças observadas nos cromatogramas A e B, determine e justifique a 
ordem crescente de polaridade das duas fases estacionárias utilizadas e explique também, a 
ordem de eluição das substâncias em cada caso, baseado nas interações envolvidas. 
B. Considerando que o cromatógrafo a gás é o único instrumento disponível no laboratório, e 
sendo desconhecida a ordem de eluição das substâncias, descreva o procedimento a ser 
utilizado para identificar o dimetilcicloexano em qualquer uma das duas colunas. Qual seria a 
vantagem de se identificar o dimetilcicloexano utilizando ambas as colunas 
 
C. Quais as modificações que você faria para melhorar a resolução entre os picos 1 e 4 do 
cromatograma B. Justifique sua resposta. 
 
2 Uma mistura teste consistindo de 7-hidroxicumarina, 7-metoxi-cumarina, 7-metoxi-4-
metilcumarina, 7-alil-oxi-4-metilcumarina e 7-acetoxi-4-metilcumarina, em solução etanólica, é 
analisada por CLAE em fase normal, utilizando-se como fase móvel hexano: acetato de etila (7:3). 
Nessas condições pergunta-se: 
 
(a) Qual a ordem de eluição para cada uma das substâncias? Indique em ordem crescente o tR 
(tempo de retenção) de cada substância. 
(b) Como você mudará a composição da fase móvel de forma a aumentar a retenção dos solutos ? 
(c) Como a retenção dos solutos é afetada pelo uso de fase C18 ligada ao invés de sílica? 
 Explique devidamente sua resposta. 
(d) Qual seria o melhor método de detecção para analisar estas substâncias por CLAE? 
 Obs: É dada a estrutura da cumarina 
 
 
 
 
 
3-Um aluno está no laboratório e recebe uma amostra de plasma no qual se quer investigar a 
presença de cinco barbitúricos (classe de fármacos usados como hipnóticos e sedativos – abaixo 
relacionados). O aluno desenvolveu a análise, segundo as condições abaixo: 
Cromatógrafo líquido Shimadzu: coluna analítica C-18 (25cmx 4mmx5m) e fase móvel metanol: 
solução de K2H2PO4 em pH= 7,0, com gradiente de solvente linear de 20:80 a 80:20 em 60 
minutos. 
a) Considerando o cromatograma A, onde o pico 3 é secobarbital, explique a ordem de eluição dos 
outros solutos com base na fase móvel, fase estacionária e as interações envolvidas na separação 
cromatográfica. 
 
b) Qual(is) a(s) vantagem(ns) de se usar sistema de gradiente de solvente ao invés de utilizar 
sistema isocrático em uma separação cromatográfica por CLAE? 
 
c) Sugira uma explicação para se utilizar o pH da fase aquosa ajustado em 7,0, e qual seria a 
melhor maneira de fazer a detecção de tais substâncias? Justifique sua reposta. 
 
d) Qual seria a ordem de eluição dessas substâncias se estivéssemos usando como fase estacionária 
sílica? Sugira a fase móvel utilizada. 
 
e) Sugira uma maneira de fazer a análise mais rápida ( em 20 min), porém sem perder a resolução, 
 eficiência e seletividade. 
 
 
 
 
O O
2
34
5
 6
7
 
 
N 
N 
O 
O 
O 
R 1 
R 2 
H 
R 3 
B A R B I T Ú R I C O S 
 
 
 
 
 R1 R2 R3 
Amobarbital 
-C2H5 
 
-CH2CH2CH(CH3)2 
 
-H 
Secobarbirtal 
-CH2CH=CH2 
 
-CH(CH3)-C3H7 
 
-H 
Fenobarbital 
-C2H5 
 
-C6H5 
 
-H 
Aprobarbital 
-CH2CH=CH2 
 
-CH(CH3)2 
 
-H 
 
 
4 Cite duas principais diferenças (com relação a coluna e a amostra) entre a cromatografia gasosa de 
alta resolução e a cromatografia líquida de alta eficiência. Exemplifique uma análise em fase 
normal para CLAE e um exemplo genérico para CG. 
 
 
5. Os dados abaixo se referem a uma coluna para cromatografia líquida: 
 Comprimento da coluna 25 cm 
 Vazão 0,5mL/min 
 Um cromatograma de uma mistura de substâncias: A, B, C e D forneceu os seguintes dados: 
 
 
 Calcule: 
a) O número de pratos de B 
b) A altura equivalente a um prato para a coluna. 
c) O fator de retenção de cada substância. 
d) O fator de separação entre C e D. 
e) A resolução entre os picos C e D.