Lista de exercícios cromatografia HPLC

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Lista de exercícios cromatografia HPLC, CI e ITC 
Questões de Cromatografia 
1. Defina 
a) Fase móvel: parte do sistema cromatográfico que se move através da fase 
estacionária, levando os componentes da amostra (HPLC a fase móvel é um líquido; CG a 
fase móvel é um gás) 
b) Fase estacionária: parte fixa do sistema cromatográfico pela qual flui a fase móvel e é 
onde ocorre a separação dos componentes da amostra com base em suas interações 
com a fase estacionária. 
c) Tempo de retenção: tempo que leva para um componente da amostra passar pela 
coluna cromatográfica desde sua injeção até sua detecção. 
d) Fator de retenção: é a medida quantitativa da afinidade de um componente da 
amostra pela fase estacionária em relação à fase móvel em um processo de 
cromatografia 
e) Altura de prato: medida da eficiência de uma coluna cromatográfica na separação de 
componentes da amostra (capacidade da coluna de separar os componentes da 
amostra) 
f) Resolução: capacidade de distinguir e resolver componentes que estão próximos um 
do outro no cromatograma 
g) Eficiência: capacidade da coluna cromatográfica de separar os componentes da 
amostra de maneira eficaz 
h) Seletividade: indica a preferência da coluna em reter alguns componentes mais 
fortemente do que outros, o que permite uma separação mais eficaz 
l) Cromatografia de íons ou iônica: técnica de separação utilizada principalmente para 
análise de íons em solução 
 
2. Liste as variáveis que causam alargamento do pico: 
R: Dispersão de banda 
Volume morto 
Tempo de residência 
Inércia do sistema 
Coluna cromatográfica (diâmetro interno, comprimento e tipo de fase estacionária) 
Condições de fluxo (taxa de fluxo da fase móvel) 
Difusão longitudinal 
Resistência à transferência de massa na fase estacionária e na fase móvel 
 
3. Quais as variáveis que afetam o fator de separação (alfa)? 
R: Natureza da fase estacionária 
Composição da fase móvel 
Temperatura da coluna 
pH da fase móvel (em cromatografia líquida) 
Interações específicas entre os analitos e a fase estacionária 
 
4. Como melhorar a separação de duas substâncias em uma coluna cromatográfica? 
Cite duas maneiras. 
R: Alterar a composição da fase móvel: Ajustar a polaridade, pH ou a concentração de 
modificadores na fase móvel para melhorar a seletividade. 
Usar uma coluna com uma fase estacionária diferente: Escolher uma fase estacionária 
com características químicas que ofereçam melhor separação para os analitos 
específicos. 
 
5. O que é eluição por gradiente em HPLC? E eluição isocratica? 
R: Eluição por gradiente: Técnica em que a composição da fase móvel é alterada 
gradualmente durante a separação. Isso pode ajudar a separar compostos que têm uma 
ampla gama de polaridades ou interações com a fase estacionária. 
Eluição isocrática: Técnica em que a composição da fase móvel permanece constante 
durante toda a separação. É geralmente mais simples e rápida, mas pode ser menos 
eficaz para separar misturas complexas. 
 
6. Como se determina o número de pratos teóricos de uma coluna? 
R: O número de pratos teóricos (N) de uma coluna pode ser determinado usando a 
equação: 
𝑁 = (𝑡𝑟/𝑤1/2)2.5,54 
onde: 
• tr é o tempo de retenção do pico 
• w1/2 é a largura do pico à meia altura. 
 
 
 
 
7. O que é a programação de temperatura em CG. Por que ela é tão usada? 
R: A programação de temperatura em cromatografia gasosa (CG) envolve o aumento 
gradual da temperatura da coluna durante a análise. É usada para melhorar a separação 
de compostos com uma ampla gama de volatilidades, permitindo a eluição de 
compostos menos voláteis sem alargar excessivamente os picos dos compostos mais 
voláteis. 
9. Cite 3 detectores usados em CG e 3 em HPLC? 
R: Detectores usados em CG: 
• Detector de Ionização de Chama (FID) 
• Detector de Captura de Elétrons (ECD) 
• Detector de Espectrometria de Massas (MS) 
Detectores usados em HPLC: 
• Detector de UV/Vis 
• Detector de Fluorescência 
• Detector de Refratometria 
• 
10. Qual é a equação de van Deemter? Escreva e explique o porquê ela é tão usada? 
que significam os termos A, B e C na equação? 
R: A equação de van Deemter descreve a relação entre a altura de prato (H) e a velocidade 
linear da fase móvel (u): 
H = A + B/u + C.u 
onde: 
• A é o termo de Eddy diffusion, que representa as variações de caminho que as 
moléculas da fase móvel podem tomar através do leito da coluna. 
• B é o termo de difusão longitudinal, que descreve a dispersão do analito ao longo 
da coluna devido à difusão. 
• C é o termo de resistência à transferência de massa, que representa a resistência 
à transferência de massa dos analitos entre a fase móvel e a fase estacionária. 
A equação de van Deemter é usada porque permite otimizar as condições de fluxo para 
minimizar a altura de prato e, portanto, maximizar a eficiência da coluna cromatográfica. 
 
 
 
 
 
 
3– Quais os componentes instrumentais principais de um sistema (desenhe): 
a) HPLC 
b) GC 
c) CE 
d) CI 
4- O