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Aluna: Larissa Sthefany do Nascimento Franco QUESTÕES DE APROFUNDAMENTO DE CONTEÚDO (AULA GNNF: CARACTERÍSTICAS E IDENTIFICAÇÃO) 1. Quais as características gerais dos Gram negativos não fermentadores? São microrganismos aeróbios, não esporulados, não fermentadores de carboidratos, utilizando eles pela via oxidativa. 2. Quais os Gram negativos não fermentadores de maior importância clínica? Pseudomonas spp., Burkholderia sp., Stenotrophomonas sp., e Acinetobacter sp. 3. Qual a relação fibrose cística e GNNF? Em pacientes com fibrose cística, a alteração no transporte de íons causa a produção de muco mais espesso e de difícil eliminação. Esse muco espesso facilita a aderência e a colonização de bactérias gram-negativas não fermentadoras, como a Pseudomonas aeruginosa e a Stenotrophomonas maltophilia, nos pulmões. Essas bactérias formam biofilmes que as protegem contra a ação dos antibióticos e do sistema imunológico. A produção de alginato por Pseudomonas aeruginosa, que é um mucopolissacarídeo, pode ser ativada em pacientes com fibrose cística e outras doenças respiratórias crônicas, contribuindo para a colonização persistente dessas cepas. Já a bactéria Stenotrophomonas maltophilia apresenta uma incidência crescente em pacientes com fibrose cística. 4. Quais as espécies do gênero Pseudomonas que compõem o grupo fluorescente? Quais os pigmentos elaborados? Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens e Pseudomonas putida. 5. Qual a importância da piocianina? A piocianina é um pigmento que suprime outras bactérias e anula a atividade ciliar respiratória, gerando lesão dos tecidos, principalmente dos oxigenados, como é o caso do pulmão. 6. Qual o reativo utilizado para determinar a enzima oxidase? N,N-dimetil-p-fenilenodiamina. 7. Sobre Pseudomonas aeruginosa determine: características da espécie, sítios de infecção, provas de identificação. Sua espécie é composta por bacilos gram negativos, aeróbios e móveis com 1 ou mais flagelos polares. Alguns dos seus sítios de infecção são o trato urinário e respiratório, a pele, os olhos e ouvidos, o coração (em caso de usuários de drogas) e outros locais que tendem a acumular umidade. Pode também levar o indivíduo à sepse. Na sua identificação é encontrado o seguinte perfil bioquímico: oxidase e catalase positiva, pigmento esverdeado na cultura e fluorescência sob luz UV devido a produção de piocianina e pioverdina, crescimento a 42°C, OF glicose oxidativo, lactose negativa no meio de cultura MacConkey e odor adocicado semelhante à uva. O meio de identificação é o Ágar Cetrimida. 8. Quais os requisitos básicos para a identificação de Pseudomonas aeruginosa? Bacilos gram negativos, oxidase positiva, lisina negativa, odor típico de uva, colônias chatas, grandes brilhosas, mucoides, rugosas ou pigmentadas podendo apresentar β hemólise no ágar sangue ou chocolate, além de colônias azuis no Ágar Cetrimida. 9. O que ocorre com as colônias mucoides de Pseudomonas aeruginosa? Podem ser isoladas de secreções de pacientes com fibrose cística que apresentam uma elevada produção de alginato. Essas colônias estão relacionadas à colonização de longa duração com cepas de P. aeruginosa e uma alta taxa de mortalidade. 10. Sobre Acinetobacter determine: características do gênero, espécies de maior ocorrência e suas características, sítios de infecção. São cocobacilos gram negativos, frequentemente se apresentam como diplococos imóveis, oxidase negativa, catalase positiva, apresentam OF-glicose oxidativo/inerte e lisina negativa. As espécies de maior ocorrência são A. baumannii e A. calcoaceticus, sendo relatadas como complexo Acinetobacter calcoaceticus- Acinetobacter baumannii (Acb). A A. baumannii apresenta crescimento a 42°C, OF glicose oxidativo, cresce bem no MacConkey (com oxidação fraca da lactose) e no EMB. No Ágar Sangue apresenta colônias translúcidas ou opacas (nunca pigmentadas) e é resistente à penicilina. Seus sítios de infecção são: o trato respiratório e urinário, feridas e queimaduras, meninges e ainda pode causar sepse. 11. Quais as características que diferem as espécies Acinetobacter baumannii da Acinetobacter iwoff? A espécie A. iwoff apresenta OF glicose inerte, já a A. baumannii apresenta OF glicose oxidativo/inerte. 12. Sobre Stenotrophomonas maltophilia determine: Características da espécie, sítios de infecção, provas de identificação e fatores de risco. Única espécie pertencente ao gênero Stenotrophomona, aeróbia, possui distribuição ubíqua e baixa virulência. São bastonetes gram negativos, móveis com flagelos polares. Dentre seus sítios de infecção estão: trato respiratório e urinário, feridas e queimaduras relacionadas ao uso de cateter, meninges e ainda pode causar sepse. Dentre suas provas de identificação se encontram: oxidase negativo ou fracamente positivo, OF-Glicose oxidativo, lisina descarboxilase positiva, DNase positiva, esculina positiva em 39% dos casos, sensível ao trimetoprim-sulfametoxazol, intrinsecamente resistente ao Imipenem, crescem bem em Ágar MacConkey e é resistente a maioria dos fármacos anti pseudomonas. Algumas colônias podem possuir pigmentos amarelos pálidos em meio ágar sangue. Alguns dos fatores de risco são o uso de ventilação mecânica e de antibióticos de amplo espectro, além de pacientes com fibrose cística. 13. Determine as características laboratoriais do complexo Burkholderia cepacia? Bacilos gram negativos, não esporulados, móveis, resistentes à polimixina, a maioria é lisina positiva, ureia variável, apresenta OF glicose oxidativo, oxidase positiva lenta, DNase negativa e hidrólise da esculina variável. 14. Qual a diferença dos meios de fermentação de carboidratos para o meio de HUGH E LEIFSON (O/F)? O meio de Hugh e Leifson apresenta concentração de peptona reduzida de 1% para 0,2 (o que reduz a formação de aminas), concentração de carboidratos aumentada de 0,5 para 1.0% (o que aumenta a quantidade de ácido) e concentração de ágar reduzida de 1,5 para 0,3 (o que permite que o ácido formado na superfície do ágar difunda-se em todo o meio). 15. Quais as leituras que podem ocorrer no meio O/F? Oxidativo, fermentativo ou não sacarolítico/inerte. 16. Qual a importância do teste da Lisina na identificação dos GNNF? A lisina permite descartar ou indicar a presença de Pseudomonas sp. e Acinetobacter sp., já que as duas são lisina negativa. 17. Qual dos Gram negativo não fermentador de importância clínica é DNAse positiva? Stenotrophomonas maltophilia. 18. Quais Gram negativos não fermentadores podem ser esculina positiva? Stenotrophomonas maltophilia e Complexo Burkholderia cepacia. 19. Qual é resistente à polimixina? Stenotrophomonas maltophilia. 20. Qual é resistente a imipenem? Complexo Burkholderia cepacia.