Gabarito de praticas laboratoriais

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<p>Manual de práticas da</p><p>disciplina de Bioquímica Básica</p><p>e Metabolismo</p><p>2019</p><p>GABARITO DAS</p><p>AUTOATIVIDADES</p><p>2</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>PRÁTICA 1 - TEMÁTICA: ROTINAS DE LABORATÓRIO – PRINCIPAIS MATE-</p><p>RIAS UTILIZADOS NO LABORATÓRIO E TÉCNICAS DE PIPETAGEM</p><p>1 Você conheceu os principais materiais utilizados em laboratório, po-</p><p>rém existem outros equipamentos e vidrarias que não foram mencio-</p><p>nadas. Faça uma pesquisa e escreva em que situações são utilizados</p><p>materiais como: proveta, dessecador, cadinho, bastão de vidro, balão</p><p>de fundo chato, capela.</p><p>R.: Proveta: é um instrumento quase cilíndrico de medida para líquidos. Possui</p><p>uma escala de volumes razoavelmente rigorosa.</p><p>Dessecador: possibilita o uso de produtos químicos para secar ou preservar da</p><p>umidade do ar substâncias ou utensílios recém-aquecidos; dessecante.</p><p>Cadinho: para realizar certas operações químicas ou fisioquímicas que exigem</p><p>altas temperaturas.</p><p>Bastão de vidro: para misturar; agitar soluções.</p><p>Balão de fundo chato: utilizado nas destilações químicas</p><p>Capela: sua função é exaurir vapores, gases e fumos, mas serve também como</p><p>uma barreira física entre as reações químicas e o ambiente de laboratório, ofe-</p><p>recendo assim, uma proteção aos usuários e ao ambiente contra a exposição</p><p>de gases nocivos, tóxicos, derramamento de produtos químicos e fogo.</p><p>2 Você utilizou nas técnicas de pipetagem, o pipetador e/oi a pera. Qual</p><p>dos dois você considera mais fácil de utilizar? Existem vantagens na</p><p>utilização de um ou de outro?</p><p>R.: Geralmente os estudantes consideram mais fácil o uso do pipetador. Não</p><p>existem vantagens de um sob o outro. Cabe a cada estudante perceber em</p><p>qual dos dois equipamentos ele se sente mais seguro na utilização.</p><p>3 No início deste manual, são listadas algumas normas e condutas de</p><p>laboratório. Qual a importância de seguir essas recomendações? Justi-</p><p>fique sua resposta.</p><p>R.: O laboratório é um lugar diferenciado de trabalho e requer cuidados espe-</p><p>ciais durante sua utilização. Nesse sentido, é interessante conhecer as nor-</p><p>mas de segurança individuais e coletivas durante as atividades experimentais</p><p>3</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>PRÁTICA 2 - TEMÁTICA: ROTINAS DE LABORATÓRIO – TÉCNICAS DE</p><p>TITULAÇÃO</p><p>Explique por que a água foi fervida e porque foi novamente esfriada</p><p>para utilização.</p><p>R.: A água usada nas diluições contém, geralmente, certa quantidade de CO2</p><p>dissolvido, que pode ser removido ao se realizar a sua fervura por alguns mi-</p><p>nutos. Após o aquecimento é conveniente resfriar a água até a temperatura</p><p>ambiente antes do seu uso, para não alterar a velocidade das reações quando</p><p>adicionado os próximos reagentes.</p><p>PRÁTICA 3 - TEMÁTICA: MEIO ÁCIDO/BÁSICO – ANÁLISE DO pH UTILIZAN-</p><p>DO O REPOLHO-ROXO COMO INDICADOR E O pHMETRO</p><p>1 O que são indicadores?</p><p>R.: Indicadores de ácido-base são substâncias que devido às suas proprie-</p><p>dades físico-químicas apresentam a capacidade de mudar de coloração em</p><p>presença de um ácido ou uma base. Isto se deve ao fato destas substâncias</p><p>apresentarem comportamentos químicos opostos.</p><p>São utilizados para indicar o ponto de equivalência de uma reação (titulações)</p><p>e/ou para identificar o caráter ácido ou básico de substâncias (como na parte</p><p>II do nosso experimento).</p><p>2 Compare os resultados apresentados pela análise usando o indicador</p><p>e pela análise utilizando o pHmetro. Qual resultado apresenta maior</p><p>precisão?</p><p>no laboratório, além dos conhecimentos da função e manuseio adequado dos</p><p>equipamentos de laboratório, com o intuito de minimizar os riscos de aciden-</p><p>tes e assegurar a integridade pessoal, dos equipamentos e das instalações.</p><p>4</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>R.: o uso do repolho-roxo como indicador ácido-base é um ótimo meio para de-</p><p>terminar a faixa de pH de um determinado meio; já o uso do pHmetro informa</p><p>o pH da solução com uma precisão de 0,1. Por exemplo, se uma dada solução</p><p>ficou azulada utilizando o repolh-roxo como indicar, pode-se dizer que seu pH</p><p>está entre 7 e 9; de outro modo, se for utilizado o pHmetro pode-se obter um</p><p>resultado com muito mais precisão, pois será fornecido um valor fixo (8,2, por</p><p>exemplo) e não uma faixa de pH.</p><p>3 Classifique as substâncias estudadas nessa prática de acordo com</p><p>seu caráter neutro, ácido e básico.</p><p>R.: A classificação do caráter ácido-básico de uma solução se dá de acordo com</p><p>o seguinte critério: se pH < 7, então a solução é ácida; se pH > 7, então a so-</p><p>lução é básica; se pH = 7, então a solução é neutra (podemos considerar que</p><p>um pH maior que 6 e menor que 8 seja um pH relativamente neutro). Dessa</p><p>forma, é provável que as respostas sejam: ácido clorídrico, ácido; hidróxido de</p><p>sódio, básico; vinagre branco, ácido; xampu, ácido; limpador de vidro, relativa-</p><p>mente neutro; leite, relativamente neutro; clara de ovo, relativamente neutro;</p><p>de ácido a neutro (depende da formulação do detergente); solução de sabão</p><p>em barra, de básico a neutro; refrigerante incolor, ácido; suco de limão, ácido;</p><p>pasta de dentes, ; de ácido a neutro (depende da formulação); água destilada,</p><p>relativamente neutro; água da torneira, relativamente neutro; cloreto de só-</p><p>dio, relativamente neutro.</p><p>4 Por que não se deve experimentar, cheirar e até mesmo tocar em</p><p>substâncias desconhecidas?</p><p>R.: No nosso cotidiano existem substâncias que apresentam sabor “azedo”, (vi-</p><p>nagre e suco de limão) e outras que apresentam sabor “adstringente” - que tra-</p><p>va a língua-, (caju e caqui verde). Esses dois tipos de sabores caracterizam dois</p><p>grandes grupos de substâncias: os ácidos e as bases. Porém, por uma questão</p><p>de segurança (não podemos provar substâncias desconhecidas) e pelos perigos</p><p>decorrentes desta ação (queimaduras, intoxicação e, em alguns casos, risco de</p><p>vida), o método mais utilizado é o teste com indicadores ácido-base.</p><p>5</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>PRÁTICA 4 - TEMÁTICA: MEIO ÁCIDO/BÁSICO ESCALA PADRÃO DE pH E</p><p>SISTEMA TAMPÃO</p><p>1 Na escala padrão de pH, classifique as soluções dos tubos de ensaio</p><p>3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 e 10 em ácidas, básicas ou neutras. Nesse experimen-</p><p>to foi utilizado o azul de bromotimol como indicador ácido-base, cite</p><p>outros exemplos de indicadores de pH.</p><p>R.: Tubo 3, 4, 5 e 6: pH ácido. Tubo 7: pH neutro. Tubos 8, 9 e 10: pH alcalino</p><p>(básico).</p><p>Outros indicadores ácido-base que podem ser citados são: fenolftaleína, ver-</p><p>de de bromocresol, alaranjado de metila, além da fita indicadora de pH.</p><p>2 O que é uma solução tampão?</p><p>R.: Uma solução-tampão é uma mistura usada para evitar que o pH ou o pOH</p><p>do meio sofra grandes variações quando for adicionado ácidos fortes ou ba-</p><p>ses fortes à solução.</p><p>3 Quantas gotas a mais de HCI (0,1 M) foram adicionadas ao tubo 2 para</p><p>saturar o tampão e se obter a mesma coloração do tubo 1? Justifique.</p><p>R.: Geralmente são adicionadas de 8 a 12 gotas a mais. Na presença da solu-</p><p>ção tampão, mesmo sendo adicionado o HCl, o pH se manteve estável por um</p><p>período, pois essa é a função da solução tampão - manter o pH constante em</p><p>uma solução.</p><p>PRÁTICA 5 - TEMÁTICA: AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS – CARACTERIZAÇÃO</p><p>DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS</p><p>1 Na reação com a ninidrina, o que aconteceu no tubo 1 e no tubo 2?</p><p>Por quê? Justifique sua resposta.</p><p>R.: No tubo 1, a solução ficou amarelada, pois a prolina não é um aminoácido.</p><p>Ela é considerada um imonoácido, pois não possui o grupo Amina (CH2) livre.</p><p>A prolina possui o grupo imina (CH). Como a Ninidrina é um marcador do grupo</p><p>6</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>PRÁTICA 7 - TEMÁTICA: PROTEÍNAS – SOLUBILIDADE DE PROTEÍNAS -</p><p>DESNATURAÇÃO</p><p>1 Explique detalhadamente as suas observações, de acordo com o pro-</p><p>cedimento executado:</p><p>a) Explique como podemos precipitar as proteínas.</p><p>R.: Uma das maneiras de promover a precipitação de uma proteína é atingir seu</p><p>ponto isoelétrico. Porém, existem outros fatores que influem de maneira im-</p><p>portante nessa</p><p>propriedade física das proteínas, como a ação de ácidos, bases,</p><p>sais e solventes orgânicos. Além disso, podemos incluir a temperatura como</p><p>um agente que pode ser utilizado para diminuir a solubilidade de uma proteína.</p><p>CH2, somente o tubo 2, com triptofano, ficou na coloração violeta, pois a Nini-</p><p>drina encontrou o grupo CH2 e reagiu.</p><p>2 Na reação com o biureto, o que aconteceu nos tubos 3, 4 e 5? Por</p><p>quê? Justifique sua resposta.</p><p>R.: Biureto é um marcador de ligações peptídicas e, portanto, indica a presença</p><p>de proteínas. Apenas no tubo 3, tínhamos uma proteína (ovoalbumina), por-</p><p>tanto, a solução ficou com uma coloração violeta. Os tubos 4 e 5, as soluções</p><p>ficaram em tons de azul, pois não foi encontrada ligações peptídicas.</p><p>PRÁTICA 6 - TEMÁTICA: PROTEÍNAS – DIGESTÃO DE PROTEÍNAS</p><p>Qual mancha some primeiro? Por quê?</p><p>R.: Irá sumir primeiro a mancha que foi utilizado sabão em pó com enzimas,</p><p>pois uma das funções das enzimas é acelerar as reações químicas e assim, a</p><p>mancha irá sumir primeiro.</p><p>7</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>b) Cite três agentes desnaturantes.</p><p>R.: Temperatura, pH e agentes químicos.</p><p>2 Dê um exemplo de processo de desnaturação que ocorre no nosso dia</p><p>a dia.</p><p>R.: Ao pingar gotas de limão no leite, o pH é alterado, causando a desnatu-</p><p>ração  das proteínas, que se precipitam na forma de coalho (Cf. queijo). Ao</p><p>cozinhar um ovo, o calor modifica irreversivelmente a clara, que é formada</p><p>pela proteína albumina e água.</p><p>PRÁTICA 8 - TEMÁTICA: PROTEÍNAS, AMINOÁCIDOS E ENZIMAS</p><p>– VERIFICAÇÃO DA ATIVIDADE PROTEOLÍTICA DE ENZIMAS</p><p>ENCONTRADAS EM FRUTOS</p><p>1. Por que, inicialmente, todos os canudos atingiram o fundo dos</p><p>cinco tubos?</p><p>R.: Nessa etapa, não houve a formação de gel, o que implica que a viscosidade</p><p>do meio é baixa, fazendo com que os canudos atinjam, inicialmente, o fundo</p><p>dos tubos de ensaio em todas as amostras.</p><p>É interessante, também nessa etapa, anotar as cores observadas para cada</p><p>amostra: o tubo 1 (controle negativo) é incolor; os tubos 2, 3 e 4 apresentam</p><p>as cores provenientes dos sucos das frutas (mamão, morango e abacaxi); e o</p><p>tubo 5 (controle positivo) possui a cor do amaciante para carne.</p><p>2. O que ocorreu, em cada tubo, após o processo de gelificação (perío-</p><p>do de 20 minutos na geladeira)? Quais as frutas utilizadas no experi-</p><p>mento que apresentam enzima proteolítica? Explique como é possível</p><p>obter essa conclusão.</p><p>R.: No tubo 1 (controle negativo) houve gelificação, evidenciado pelo fato</p><p>de que o canudo não tocou o fundo do tubo. A explicação para isso é que a</p><p>proteína da gelatina não sofreu hidrólise, uma vez que não há uma enzima</p><p>proteolítica no meio. Já para o tubo 5 (controle positivo), observa-se que, após</p><p>o período de 20 min sob baixa temperatura, a amostra não gelificou, pois o</p><p>8</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>canudo tocou o fundo do tubo, indicando que o meio tem baixa viscosidade.</p><p>Para os tubos contendo suco de mamão e de abacaxi, observou-se que os</p><p>canudos atingiram o fundo (similar ao observado para a amostra do contro-</p><p>le positivo). Isso indica que para essas amostras houve a ação de enzimas</p><p>proteolíticas, que induziram a degradação das macromoléculas da proteína</p><p>presentes na gelatina, impedindo a formação do gel – de fato, o mamão e o</p><p>abacaxi possuem uma enzima proteolítica em sua composição, a papaína e a</p><p>bromelina, respectivamente.</p><p>Por fim, para o tubo que contém o suco de morango, observou-se que o canu-</p><p>do não tocou o fundo do tubo de ensaio (similar ao observado para a amos-</p><p>tra do controle negativo). Assim, para essa amostra não houve hidrólise das</p><p>proteínas da gelatina. Isso indica que as enzimas proteolíticas podem estar</p><p>ausentes no fruto do morango ou existir em concentrações muito baixas.</p><p>3. Qual a importância das enzimas proteolíticas para o fruto?</p><p>R.: A presença de enzimas proteolíticas é importante para auxiliar no processo</p><p>de digestão de proteínas e, consequentemente, na melhor absorção destas</p><p>pelo organismo.base inorgânica origina um sal orgânico e álcool. A reação de</p><p>saponificação também é conhecida como hidrólise alcalina, através dela é que</p><p>se torna possível o feitio do sabão. Falando quimicamente, seria a mistura de</p><p>um éster (proveniente de um ácido graxo) e uma base (hidróxido de sódio)</p><p>para se obter sabão (sal orgânico).</p><p>PRÁTICA 9 - TEMÁTICA: ENZIMAS – CATALISADORES E INIBIDORES DE</p><p>REAÇÃO QUÍMICA</p><p>1 Em qual dos experimentos a reação ocorreu com maior velocidade?</p><p>Existe alguma causa que justifique a diferença nas velocidades de reação?</p><p>R.: A reação ocorreu com maior velocidade para a amostra com batata e fígado</p><p>crus, devido à ação da enzima como catalisador na degradação do peróxido de</p><p>hidrogênio. Quando adicionamos a água oxigenada na batata e fígado cozidos</p><p>é capaz que não se observe a reação acontecer, pois, nesse caso, a elevação</p><p>da temperatura durante o cozimento acarretou modificações na estrutura da</p><p>enzima, provocando a desnaturação da proteína e inviabilizando sua ação.</p><p>9</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>2 O que ocorreu nos tubos contendo fígado cru, com adição do suco de</p><p>limão natural e a posterior adição de peróxido de hidrogênio?</p><p>R.: Quando se adiciona o suco de limão na amostra há mudança do pH do</p><p>fígado, fazendo com que a reação de degradação do peróxido de hidrogênio</p><p>não aconteça. Isso porque a catalase, assim como todas as enzimas, tem um</p><p>espectro específico de ação, ou seja, funciona melhor em um determinado pH.</p><p>Variações extremas de pH provocam modificações estruturais nas enzimas,</p><p>fazendo com que elas percam seu potencial de ação.</p><p>3 Por que o mesmo desprendimento gasoso é observado ao adicionar</p><p>água oxigenada em ferimentos?</p><p>R.: A solução água oxigenada apresenta peróxido de hidrogênio, com as mais</p><p>diversas finalidades, especialmente como antisséptico. Tratando de aspectos</p><p>químicos, o peróxido de hidrogênio se caracteriza pela reatividade da ligação</p><p>entre os dois átomos de oxigênio, a chamada ligação peróxido.</p><p>A decomposição do peróxido de hidrogênio libera água, oxigênio molecular e</p><p>calor, conforme pode ser evidenciado na equação abaixo:</p><p>Observa-se que, os béqueres que continham o peróxido de hidrogênio com-</p><p>preendem um controle ou um branco (H2O2), padrão positivo (H2O2 + tubérculo</p><p>cru) e padrão negativo (H2O2 + tubérculo cozido).</p><p>Neste último béquer houve desnaturação e consequente inativação enzimáti-</p><p>ca. Na ausência de enzimas, essa reação não ocorre, pois, a decomposição do</p><p>peróxido de hidrogênio é demasiadamente lenta sem a atuação destas.</p><p>Pode-se relacionar esta questão ao fato da ocorrência do desprendimento ga-</p><p>soso ocorrido ao se utilizar H2O2 sobre ferimentos. Este resultado se dá em vir-</p><p>tude da ação da enzima catalase, presente nas células sanguíneas e em tecidos</p><p>animais e vegetais (RODRIGUES E BARBONI, 1998 apud NOVAES et al. 2013).</p><p>PRÁTICA 10 - TEMÁTICA: CARBOIDRATOS – CARACTERIZAÇÃO,</p><p>IDENTIFICAÇÃO E PODER REDUTOR DE CARBOIDRATOS</p><p>1 Na reação de Benedict, comente o que você observou nos tubos de</p><p>ensaio 1, 2 e 3.</p><p>10</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>R.: Tubo 1 (Glicose): A presença de um precipitado vermelho tijolo ou solução</p><p>amarelo esverdeada indica a redução do cobre, possibilitando um resultado</p><p>positivo.</p><p>Tubo 2 (Sacarose): Não há mudança do reativo, a cor permanece azul, indi-</p><p>cando resultado negativo. Tubo 3 (Água): Não há mudança do reativo, a cor</p><p>permanece azul, indicando resultado negativo.</p><p>2 Na reação de Molisch, os monossacarídeos presentes em solução</p><p>são submetidos à ação de um forte agente desidratante (ácido sulfú-</p><p>rico concentrado) originando hidroximetilfurfurais e furfurais a partir</p><p>de hexoses e pentoses, respectivamente. O que você observou no</p><p>tubo de ensaio que foi submetido a reação de Molisch? Conceitue o</p><p>termo “açúcar redutor”.</p><p>R.: Foi observado a formação de um anel violeta, quando Molisch foi adiciona-</p><p>do a uma solução com glicose</p><p>(Hexose).</p><p>Um açúcar redutor é qualquer açúcar que, em solução básica, apresenta um</p><p>grupo carbonílico livre aldeído. Sua capacidade de redução se dá pela presen-</p><p>ça de um grupo aldeído ou cetona livre. Percebemos que no tubo 1, não houve</p><p>reação alguma, pois a solução que estava presente era a água. Já no tubo 2,</p><p>a reação foi positiva, pois houve a formação de precipitado avermelhado do</p><p>óxido cuproso.</p><p>3 Na reação de Fehling o cobre presente em solução é reduzido pela ação</p><p>de açúcares redutores. O que você observou no tubo 1 e no tubo 2?</p><p>R.: Um açúcar redutor é qualquer açúcar que, em solução básica, apresenta um</p><p>grupo carbonílico livre aldeído. Sua capacidade de redução se dá pela presen-</p><p>ça de um grupo aldeído ou cetona livre. Percebemos que no tubo 1, não houve</p><p>reação alguma, pois a solução que estava presente era a água. Já no tubo 2,</p><p>a reação foi positiva, pois houve a formação de precipitado avermelhado do</p><p>óxido cuproso.</p><p>4 A reação de Seliwanoff tem como objetivo identificar o grupo cetose</p><p>nos carboidratos. O que aconteceu nesse experimento? Diferencie ce-</p><p>tose de aldose.</p><p>R.: Seliwanoff é um importante marcador do grupo cetose dos carboidratos.</p><p>No tubo de ensaio 1, que estava na solução a frutose, após ser aquecido, for-</p><p>mou-se um precipitado na cor do tijolo, indicando a presença do grupo cetose</p><p>11</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>nesse carboidrato. Já no tubo 2, onde tínhamos a glicose, a solução ficou com</p><p>uma coloração azulada, pois a glicose possui o grupo aldose. Uma ALDOSE é</p><p>um monossacarídeo que apresenta um grupamento aldeído em uma extremi-</p><p>dade, por exemplo, a glicose. Já a CETOSE é um monossacarídeo que tem um</p><p>grupo cetona, normalmente no carbono 2, como exemplo temos a frutose.</p><p>5 Os monossacarídeos podem ser classificados de acordo com o número</p><p>de átomos de carbono em: trioses, tetroses, pentoses e hexoses. A</p><p>reação de Bial é um teste específico para as pentoses. O que aconteceu</p><p>nesse experimento? Cite exemplos de pentoses.</p><p>R.: Nesse experimento observamos que no tubo de ensaio 2, onde tínhamos</p><p>a xilose, surgiu um precipitado vermelho, o que indica a presença de uma</p><p>pentose. Existem outros exemplos de pentose como: ribose e desoxirribose.</p><p>PRÁTICA 11 - TEMÁTICA: ÁCIDOS NUCLEICOS – EXTRAÇÃO DO DNA DO</p><p>MORANGO</p><p>1 Qual o objetivo de macerar os morangos nesse experimento?</p><p>R.: Macerando os morangos, as células ficam mais expostas aos reagentes,</p><p>possibilitando assim uma melhor extração do DNA.</p><p>2 Qual a função dos reagentes cloreto de sódio, detergente e álcool</p><p>durante o processo de extração do DNA do morango?</p><p>R.: cloreto de sódio: desnaturação das proteínas presentes no material genético.</p><p>Detergente: rompe a dupla camada fosfolipídica que forma a membrana plas-</p><p>mática e a membrana nuclear, liberando o material genético.</p><p>Álcool: permite a precipitação do DNA e consequentemente conseguimos visu-</p><p>alizá-lo.</p><p>12</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>PRÁTICA 12 - TEMÁTICA: LIPÍDIOS – SOLUBILIDADE E INSATURAÇÃO EM</p><p>LIPÍDIOS</p><p>1 Qual a semelhança e a diferença entre óleos de gorduras?</p><p>R.: Tanto os óleos como as gorduras são constituídos por triglicerídeos (ou</p><p>seja, um tipo de lipídio formado entre a reação de uma molécula de glicerol e</p><p>três moléculas de ácido graxo). A diferença entre os óleos e gorduras se dá</p><p>pelo seu aspecto à temperatura ambiente: os óleos são líquidos a temperatu-</p><p>ra ambiente, enquanto que as gorduras são sólidas.</p><p>2 O que foi observado nos testes de solubilidade? Explique</p><p>R.: O teste de solubilidade serve para identificar a presença de lipídios nas</p><p>amostras, além de caracterizar o meio como polar ou apolar. Sabendo que os</p><p>lipídios são moléculas apolares e sabendo do princípio de solubilidade que</p><p>"semelhante dissolve semelhante", as amostras que contêm lipídios formarão</p><p>soluções de apenas uma fase em meios apolares (ou seja, solubiliza), enquan-</p><p>to que em meios polares serão observadas duas fases (ou seja, não solubili-</p><p>za). Dessa forma, os resultados esperados são:</p><p>• Em água (solvente polar): duas fases (pois os lipídios são insolúveis)</p><p>• Em éter etílico (solvente apolar): uma fase (pois os lipídios são solúveis)</p><p>• Em solução de hidróxido de sódio (solvente pouco polar): duas fases, po-</p><p>rém é possível observa uma pequena porção solúvel (pois os lipídios são</p><p>parcialmente solúveis)</p><p>• Em solução de ácido clorídrico (solvente pouco polar): duas fases, porém</p><p>é possível observa uma pequena porção solúvel (pois os lipídios são par-</p><p>cialmente solúveis)</p><p>3 O que foi observado no teste de insaturação? Explique.</p><p>R.: O teste de insaturação identifica a presença de ácido graxos insaturados</p><p>(ou seja, que contém ligações duplas em suas cadeias), devido a reação do</p><p>iodo presente no lugol com as insaturações, fazendo com que haja mudança</p><p>de coloração no meio.</p><p>Dessa forma, os resultados esperados são:</p><p>• Óleo vegetal (girassol, soja ou milho): esses óleos apresentam altas quan-</p><p>tidades de ácidos graxos insaturados (como o oleico, o linoleico e o linolê-</p><p>nico), portanto, nesses casos é provável que haja mudança de coloração;</p><p>13</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>PRÁTICA 13 - TEMÁTICA: LIPÍDIOS - SAPONIFICAÇÃO DE LIPÍDEOS</p><p>1. O que foi verificado no processo de saponificação?</p><p>R.: Observamos uma hidrólise alcalina dos triglicerídeos presentes no óleo,</p><p>formando uma mistura de sais de ácidos graxos (que compõem os sabões) e</p><p>glicerol. Esse experimento permite observar um mecanismo reacional empre-</p><p>gado industrialmente, fazendo uso de reagentes de baixo custo e de proce-</p><p>dimentos simples.</p><p>2. Como acontece o mecanismo da reação de saponificação?</p><p>R.:  Reação de saponificação ocorre quando um éster em solução aquosa de</p><p>base inorgânica origina um sal orgânico e álcool. A reação de saponificação</p><p>também é conhecida como hidrólise alcalina, através dela é que se torna pos-</p><p>sível o feitio do sabão. Falando quimicamente, seria a mistura de um éster</p><p>(proveniente de um ácido graxo) e uma base (hidróxido de sódio) para se obter</p><p>sabão (sal orgânico).</p><p>3. Como você pode explicar o processo de solubilização dos lipídios.</p><p>R.: São substâncias cuja característica principal é a insolubilidade em sol-</p><p>ventes polares e a solubilidade em solventes orgânicos (apolares), apresen-</p><p>tando natureza hidrofóbica, ou seja, aversão à molécula de água. Essa ca-</p><p>racterística é de fundamental importância mesmo que o organismo possua</p><p>considerável concentração hídrica. Isso porque  a insolubilidade permite</p><p>uma interface mantida entre o meio intra e extracelular.</p><p>• Manteiga: os ácidos graxos da manteiga são insaturados, por isso a mu-</p><p>dança de coloração não deve ser observada;</p><p>• Gordura animal (banha de porco): essencialmente, os ácidos graxos de</p><p>gorduras animais são saturados, porém existem pequenas quantidades</p><p>de ácidos graxos insaturados; dessa forma, é possível que seja observada</p><p>uma pequena mudança da coloração.</p><p>14</p><p>Manual de práticas da disciplina de Bioquímica Básica e</p><p>Metabolismo</p><p>PRÁTICA 14 - TEMÁTICA: METABOLISMO – DETERMINAÇÃO DA</p><p>CONCENTRAÇÃO DE ÁCIDO ASCÓRBICO</p><p>1 Explique o que é uma titulação</p><p>R.: A titulação é uma técnica para determinar a quantidade de uma determi-</p><p>nada espécie química em uma amostra. O processo é realizado por meio da</p><p>adição gradual de um reagente (cuja concentração é devidamente conhecida)</p><p>à amostra, o qual deve reagir completamente com a substância de interesse.</p><p>Geralmente, utiliza-se um indicador, que serve para indicar o ponto de vira-</p><p>gem da titulação</p><p>O volume exato para se completar a reação é chamado de ponto de equivalên-</p><p>cia ou estequiométrico, este é detectado através de modificação física, poden-</p><p>do ela ser intrínseca da equação ou proveniente de um indicador adicionado</p><p>(mudança de cor/turbidez).</p><p>Para que seja possível realizar a titulação existem alguns requisitos mínimos</p><p>que as reações devem atender: o titulado deve reagir em proporção estequio-</p><p>métrica ou equivalente com o titulante; a reação</p><p>deve ser rápida; e no ponto de</p><p>viragem deve haver alteração física ou química da solução que seja perceptível.</p><p>Existem vários tipos de titulação, destacando-se a titulação ácido-base, titula-</p><p>ção de oxidação-redução e titulação de complexação.</p><p>2. Por que a dosagem de ácido ascórbico no suco fervido difere daquela</p><p>realizada sem este tratamento?</p><p>R.: O ácido ascórbico pode ser reduzido pela ação do calor, impossibilitando</p><p>sua reação com o iodo e, consequentemente, não sendo titulado.</p><p>3 Por que os alimentos que contém vitamina C não são vendidos em</p><p>embalagens transparentes?</p><p>R.: Porque o ácido ascórbico pode sofrer degradação por influência da luz, en-</p><p>tão embalagens mais escuras preservam a concentração de ácido ascórbico</p><p>presente nos alimentos.</p>