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Hematologia
Automação
Profa Dra. Talita Sartori
Profa Alessandra Barone – como colaboradora de material didático 
Hemólise – lise de hemácias 
Linfócitos atípicos
*
Antígeno
Linfócito
Aumento de tamanho, citoplasma mais basófilo (Muito RNA), núcleo maior, cromatina mais frouxa (clara)
Clone
Clone
Linfócito ativado
Linfócito hiperbasófilo - atípico
Podem estar em crianças ou idosos em maior quantidade -normal
Principais causas para aparecimento de linfócitos atípicos 
Mononucleose infecciosa (vírus de Epstein-Barr): é a maior causa de aparecimento de atipias. Os linfócitos atípicos que surgem no esfregaço são célula T reagindo a linfócitos B parasitados pelos vírus Epstein-Barr. 
Infecção por Citomegalovirus* -
Adenovírus
Rubéola 
Varicela 
Herpes (simples e zoster) 
Meningite linfocitária 
AIDS inicial (2a semana após contaminação pelo HIV)
Infecção bacteriana: brucelose, tuberculose e sífilis.
Infecção por protozoários: Toxoplasmose*
Malária
https://portallabcursos.com.br/postagens-cientificas/18/variacoes-morfologicas-dos-linfocitos
Porque automatizar?
Mais rápida, reprodutível e confiável do que a técnica manual
Mais de 80 mil exames por dia
Hemograma automatizado
Criado no início na década de 50 por Walace Coulter.
Utilização da impedância elétrica para contagem de células. 
Os reagentes (diluidores) ficavam localizados na parte externa do aparelho.
Talita Sartori (TS) - dois irmão Coulter eles produziram os primeiros equiámentos que melhoraram a precisão de tudo
Extensões sanguíneas automatizadas
Quais são os principais métodos utilizados?
Impedância elétrica (origem da automação)
Dispersão laser
Impedância elétrica
Células hematológicas são más condutoras de eletricidade
Eletrodo +
Eletrodo -
Interrupção da corrente elétrica –
pulso
Histograma
Pulsos elétricos grandes correspondem a células grandes e pulsos elétricos pequenos a células pequenas 
Impedância elétrica
Interrupções longas de pulso indicam células grandes
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Conseguimos saber a intensidade do pulso – tamanho da células VCM
Impedância elétrica
HT= VCM x GV/10
Ex: Ht= 85fL x 4,5milhões mm3/sangue /10
HCT = 38,25%
Aqui seriam 4 pulsos 
Quantidade dos pulsos – número de células (RBC)
Lei de Ohm : V=IR
A voltagem gerada (corrente constante) é proporcional ao tamanho da partícula (obstrução)
Impedância elétrica
Impedância: oposição que um circuito faz a passagem da corrente elétrica . Material condutor apresenta baixa impêdância.. Medida em ohm
Cada impulso é proporcional ao volume celular e tem sua amplitude, sua duração e sua forma influenciadas pela forma celular.
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A somatória dos impulsos elétricos produzem os histogramas, importantes para análise da variabilidade das populações celulares
Impedância elétrica
volume na abscissa e frequência na ordenada
Impedância elétrica
VCM= 80-100 fL
Histograma
ADE = RDW
Impedância elétrica
A curva pode ser desviada para esquerda ou para direita evidenciando alterações no tamanho das células 
ADE: amplitude de distribuição eritrocitária = rdw
https://es.slideshare.net/MariclaudiaVsquezChacn/1-valores-normalesrapetti
ADE: amplitude de distribuição eritrocitária = rdw
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Impedância elétrica de leucócitos
Classificação das células:
Pequenas – linfócitos
(35 -90 fL)
Intermediárias – monócitos, eosinófilo, basófilo 
(90-160 fL)
Grandes - neutrófilos
(a partir de 160 fL)
WBC- White blood cells
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http://www.cenapro.com.br/noticias-detalhes.asp?codigo=332
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Histograma de plaquetas
VPM: volume plaquetário médio:
8 fL a 13 fL
Plaquetócrito:
0,13 a 0,43%
PDW: RDW das plaquetas
9 a 16%
Impedância elétrica
http://www.rbac.org.br/artigos/valores-de-referencia-dos-indices-plaquetarios-e-construcao-de-algoritmo-para-liberacao-do-plaquetograma/
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Histograma de plaquetas
VPM alto: 
plaquetas reativas, plaquetas mais agregáveis, maior poder trombótico
VPM baixo:
deficiência de ferro
Impedância elétrica
Pdw = RDW 
Alguns pesquisadores especulam que os níveis elevados de eritropoetina em pacientes com anemia por deficiência de ferro pode aumentar modestamente a produção de plaquetas por reação cruzada com o receptor de trombopoitina
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Histograma
Histograma
Anemia microcítica heterogenea
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Presença de células jovens pelo grau de hemólise. Lembrar que as células jovens são maiores aumentado o VCM = reticulocitos
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Dispersão laser
L
A
S
E
R
FSC – dispersão frontal
Tamanho 
da célula
SSC – dispersão lateral
Complexidade/Granulosidade da célula
Mais “evoluído” que impedância pois, conseguimos analisar características internas da célula
SSC- avalia a granulosidade intracelular
através da luz dispersada
FSC – avalia o tamanho da célula pela difração e refração da luz
FL – detectores que conseguem captar mais detalhes de características da célula
Contagem total e diferencial de leucócitos 
Dispersão laser
Para melhorar o diagnóstico, as populações celulares são medidas utilizando citometria de fluxo fluorescente. A substância fluorescente que interage com as
células (fluorochrome dye – marcador fluorescente) possui afinidade nuclear. O reagente que contém esta substância é o Stromatolyser – 4DS Dye.
dispersão lateral da luz (estrutura interna da célula), dispersão frontal (tamanho celular) e intensidade de fluorescência (tamanho do núcleo)
fórmula diferencial em que são medidas, após interação com um corante fluorescente: a dispersão lateral da luz (SSC), indicativa da estrutura interna da célula; a dispersão frontal da luz (FSC), indicativa do tamanho celular; e a intensidade da fluorescência (SFL), indicativa do tamanho do núcleo. São identificados (1) neutrófilos, (2) eosinófilos, (3) linfócitos e (4) monócitos. Granulócitos imaturos também são contados nesse canal.
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Tipos de dispersão a laser
Dispersão sem fluorescência 
Beckman Coulter
Dispersão com
fluorescência 
Sysmex
Une impedância com dispersão de luz
Dispersão de luz com fluorescência lateral
Dispersão laser
TAMANHO
Dispersão laser
Quanto maior o pulso de voltagem, maior é a complexidade interna da célula 
COMPLEXIDADE
Utilização de corantes fluorescentes (polimetina) que se ligam ao RNA dos ribossomos nas organelas e ao DNA 
O laser incide na substância fluorescente e a fluorescência emitida é captada por sensores
O aparelho converte esses sinais em pulsos identificando o tipo celular 
Dispersão laser
DNA/RNA
http://www.ciencianews.com.br/arquivos/ACET/IMAGENS/biblioteca-digital/hematologia/serie_branca/Alteracoes_reacionais_de_leucocitos/15-Como-interpretar-o-grafico-de-dispersao-leucocitaria.pdf
https://www.sysmex.com/la/pt/Products/Documents/XN-Tecnologia-Portugu%C3%AAs.pdf
http://www.ciencianews.com.br/arquivos/ACET/IMAGENS/biblioteca-digital/hematologia/serie_branca/Alteracoes_reacionais_de_leucocitos/15-Como-interpretar-o-grafico-de-dispersao-leucocitaria.pdf
Agregado plaquetário, eritoblasto;
Macroplaqueta
Linfocitose;
Linfopenia;
Linfócitos atípicos;
Bastonetes
Flags
Vá conferir, deu ruim!
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